Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 2:00 min • June 17th, 2025
Commencez par une boîte contenant des tranches de cerveau cortical provenant d’embryons de souris transgéniques dans un milieu complété par de la luciférine.
La région corticale contient des cellules souches neurales qui expriment des protéines fluorescentes vertes ou GFP et un gène d’intérêt fusionné à un gène rapporteur de la luciférase.
Placez la parabole sur la platine du microscope pour les mesures de fluorescence et de luminance.
Capturez des images de test de fluorescence GFP, en vous concentrant sur les régions d’intérêt.
Au cours de la différenciation neuronale, les cellules souches commencent à exprimer le gène d’intérêt et produisent des protéines fusionnées avec l’enzyme luciférase.
La luciférine interagit avec les enzymes luciférase, générant une bioluminescence qui reflète directement l’expression du gène d’intérêt lors de la différenciation.
Capturez une image de fluorescence pour identifier des régions d’activité spécifiques, une image de bioluminescence pour surveiller l’expression dynamique des gènes et une image en fond clair pour fournir des informations morphologiques.
Acquérez ces images tridimensionnelles en accéléré pour visualiser l’expression des gènes pendant la
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