Administration intranasale de cellules souches mésenchymateuses dans un modèle murin de lésion cérébrale traumatique

Commençons par une souris anesthésiée avec une lésion cérébrale traumatique.

Au site de la lésion, la démyélinisation axonale et les lésions neuronales déclenchent la libération de cytokines pro-inflammatoires.

Sécurisez la souris et administrez par voie intranasale une enzyme protéolytique.

Ensuite, positionnez la souris face vers le haut pendant une courte durée et répétez l’administration de l’enzyme.

Les enzymes protéolytiques dégradent la matrice extracellulaire de l’épithélium nasal et améliorent la perméabilité cellulaire.

Ensuite, administrez par voie intranasale la solution de cellules souches mésenchymateuses marquées, ou CSM.

Tenez la tête de la souris à la verticale pendant un certain temps pour éviter un drainage prématuré et permettre l’absorption des CSM dans le tissu nasal.

Répétez le processus de livraison MSC.

Laissez la souris récupérer.

Les signaux chimiotactiques des cytokines pro-inflammatoires dirigent les CSM à migrer de la cavité nasale vers le site de la lésion cérébrale.

Sur le site de la blessure, les CSM sécrètent des facteurs neurotrophiques qui favorisent la remyélinisation. Cela met en évidence le potentiel neurothérapeutique des CSM pour la réparation neuronale.

Pour l’administration cellulaire, après avoir confirmé une absence de réponse au pincement des orteils, écorchez la souris tout en immobilisant le crâne. Placez l’extrémité d’une pipette contenant 4 unités d’hyaluronidase par microlitre de PBS près de la nare de la souris à un angle de 45 degrés et administrez 3 microlitres de suspension d’hyaluronidase dans chaque narine. Placez l’animal face vers le haut sur un tampon propre pendant cinq minutes avant de répéter le traitement quatre fois pour un total de 100 unités de traitement à l’hyaluronidase.

Après le dernier traitement, replacez la souris sur le tapis pendant 30 minutes avant de retenir la souris, comme nous venons de le démontrer. Avec la tête immobilisée, administrez 3 microlitres de suspension de cellules souches mésenchymateuses dans chaque narine sur une période de trois secondes par administration de solution, en maintenant la souris en position pendant 30 secondes jusqu’à ce que les gouttes d’échantillon aient complètement disparu. Après deux minutes, répétez l’administration jusqu’à trois fois jusqu’à ce que tout le volume de cellules souches mésenchymateuses ait été délivré. Remettez ensuite la souris dans sa cage avec surveillance jusqu’à ce qu’elle dépose complètement.