Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 2:29 min • August 7th, 2025
Prenez une souris anesthésiée avec un monofilament inséré dans son artère cérébrale moyenne pour induire une occlusion.
Cela bloque le flux sanguin vers le cerveau, déclenchant une ischémie focale.
L’occlusion restreint l’apport en oxygène et en glucose, provoquant une déplétion de l’ATP et une dépolarisation neuronale.
Les neurones dépolarisés libèrent un excès de glutamate, qui se lie aux récepteurs postsynaptiques, provoquant un afflux massif de calcium.
Un taux élevé de calcium intracellulaire perturbe la fonction mitochondriale et favorise la production de ROS, initiant ainsi des lésions neuronales.
Anesthésier à nouveau la souris.
Rouvrez l’incision et retirez le monofilament pour obtenir une reperfusion.
La réintroduction soudaine d’oxygène génère un excès de ROS à partir de mitochondries dysfonctionnelles, aggravant les lésions neuronales.
Pour atténuer cela, exposez la souris à un mélange de gaz à haute teneur en dioxyde de carbone pour le post-conditionnement acide ou APC après le début de la reperfusion.
Cela augmente la concentration de protons dans le cerveau, inhibe les récepteurs, réduit l’afflux de calcium et prévient l’excitotoxicité médiée par le calcium.
De plus, l’APC stabilise les mitochondries et inhibe la production de ROS, fournissant ainsi une neuroprotection.
55 minutes après le début de l’occlusion, anesthésier à nouveau l’animal avec de l’isoflurane et positionner l’animal comme avant. Ouvrez ensuite l’incision du cou et réexposez l’artère carotide commune. Après la période d’occlusion, utilisez une pince ophtalmique pour retirer doucement le filament afin d’obtenir une reperfusion. Transformez ensuite la suture temporaire en une suture permanente en resserrant le nœud. Pour le traitement de l’acidose, changez le gaz inhalé par le cône nasal en 20 % de dioxyde de carbone, 20 % d’oxygène et 60 % d’azote pendant cinq minutes. Après avoir fermé l’incision avec une suture chirurgicale interrompue, placez la souris dans une cage chauffée à 30 degrés Celsius jusqu’à ce que la souris reprenne conscience.