Administration intranasale de siRNA dans le cerveau de la souris à l’aide d’un dispositif de positionnement

Commencez avec des souris anesthésiées placées sur un dispositif de positionnement, le dos parallèle au support dorsal de la chaise et perpendiculaire au siège.

Les souris sont positionnées dans une posture tête baissée et avancée et sécurisées à l’aide de ceintures de chaise.

À l’aide d’une micropipette chargée d’un complexe peptide-siRNA ciblant les neurones, placez une goutte près d’une narine, permettant à la souris d’inhaler la solution naturellement.

Appuyez doucement sur la tête de la souris vers le bas pendant l’inhalation pour éviter que la solution ne s’écoule dans les poumons.

Faites une brève pause, puis répétez l’administration dans l’autre narine.

Répétez la procédure pour les souris restantes.

Le complexe pénètre dans la muqueuse nasale, d’où il pénètre dans les nerfs olfactif et trijumeau et les traverse pour atteindre le cerveau.

À l’intérieur du cerveau, le complexe se lie aux récepteurs neuronaux, subit une endocytose et facilite l’administration intracellulaire de siRN.

Le siRNA fait partie du complexe RISC, qui, en se liant à l’ARNm cible, induit le silençage génique.

Pour commencer cette procédure, évaluez le niveau d’anesthésie du réflexe bipède de la souris afin de