Analyse de la morphologie dendritique à travers les couches et les colonnes de la drosophile

Commencez avec un cerveau de drosophile éliminé par le glycérol dans un milieu de montage anti-décoloration.

Le cerveau contient des neurones rachidiques disposés en couches, qui organisent les connexions synaptiques, et des colonnes, qui coordonnent les circuits neuronaux.

Quelques-uns de ces neurones sont marqués avec des marqueurs fluorescents verts, contrastant avec les axones photorécepteurs fluorescents rouges.

Positionnez le cerveau face ventrale vers le haut. Placez une lamelle avec de petites plaques d’argile sur les côtés pour éviter d’écraser l’échantillon de cerveau.

Au microscope, obtenez la pile d’images en vue horizontale, contenant le neurone marqué en vert.

Retirez la lamelle et repositionnez le cerveau, côté antérieur vers le haut.

Capturez une pile d’images de la vue frontale du même neurone.

À l’aide du logiciel, combinez ces images, supprimez le canal photorécepteur et visualisez l’image 3D du neurone.

Tracez l’axone, puis les dendrites, en suivant chaque branche jusqu’à sa terminaison, pour cartographier l’organisation dendritique à travers les couches et les colonnes de la moelle.

Pour monter le cerveau dans l’orientation horizontale, transférez un cerveau éliminé au