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Commencez par un tissu cérébral de souris excisé contenant des thrombus, ou caillots sanguins, dans les vaisseaux sanguins cérébraux.
Les thrombus sont marqués à l’aide d’une sonde fluorescente ou NIRF dans le proche infrarouge qui se lie de manière covalente aux brins de fibrine pendant la maturation du thrombus.
Placez le tissu cérébral dans un imageur proche infrarouge, en positionnant la base du cerveau ou la face ventrale vers le haut pour imager le thrombus dans les principales artères cérébrales.
Appliquez une lumière proche infrarouge sur le tissu cérébral qui excite la sonde NIRF dans le thrombus marqué.
Lors de l’excitation, la sonde émet de la lumière à une longueur d’onde plus longue.
Cela provoque la fluorescence du thrombus et son apparition brillante sur un fond sombre, minimisant ainsi les interférences des tissus environnants.
Ensuite, inversez le tissu cérébral et imagez la face dorsale du cerveau pour visualiser le thrombus dans les petits vaisseaux sanguins corticaux.
Cela garantit une visualisation complète du thrombus dans le tissu cérébral avec un contraste élevé.
Pour visualiser le thrombus par imagerie proche infrarouge ex-vivo, placez le tissu cérébral excisé dans l’imageur avec la base pointant vers le haut. Obtenez des images des thromboemboles marqués par fluorescence dans les artères du cercle de Willis. Ensuite, positionnez le tissu avec le vertex pointant vers le haut et imagez les thromboembolis corticaux.
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