JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurosciences
0 vues • 3:42 min • June 17th, 2025
Prenez une souris anesthésiée avec une artère carotide commune ou ACC exposée, qui bifurque en l’artère carotide externe ou ECA et l’artère carotide interne ou ICA.
Suturez fermement l’ECA distale, placez un nœud lâche près de la bifurcation, puis coupez l’ACC et l’ICA pour restreindre le flux sanguin.
Incisez l’ECA, puis insérez un capillaire relié à une seringue contenant la substance d’essai.
Faites avancer le capillaire entre la bifurcation et le clip CCA, puis fixez-le en serrant le nœud ECA proximal.
Retirez le clip ICA et perftirez la substance pour une administration ciblée au cerveau tout en contournant la circulation systémique.
La substance traverse la barrière hémato-encéphalique pour atteindre le parenchyme cérébral.
Une fois que l’ECA et l’ICA sont exposés, utilisez une pince pour placer un segment de suture en nylon de 1 centimètre sous l’artère carotide externe, puis placez un deuxième segment de 1 centimètre. Faites ensuite un nœud permanent au point le plus haut possible de l’ECA.
Au point le plus bas possible de l’ECA, immédiatement au-dessus de la bifurcation de l’ACC, faites un nœud amovible plus lâche. Ensuite, utilisez des clips de récipient pour fermer le CCA au point le plus bas possible et pour fermer l’ICA.
Fermer correctement l’artère carotide interne avant de faire une petite incision dans l’artère carotide externe empêchera les saignements.
Maintenant, à l’aide de ciseaux à ressort de microdissection, faites une coupe de 2 millimètres dans l’ECA entre les deux nœuds.
Il est important de garder la coupe petite, car une grande coupe provoquera une fuite de la substance à perfaction.
Assemblez le système de perfusion en fixant 6 pouces de tube capillaire à une seringue à tuberculine contenant 250 microlitres de la substance à perfuser. Ensuite, insérez doucement l’extrémité du tube capillaire dans l’incision de l’ECA. Continuez à avancer la pointe jusqu’à ce qu’elle atteigne la moitié entre la bifurcation et le clip sur le CCA.
Attachez le nœud ECA inférieur. Vérifiez que le nœud est suffisamment lâche pour permettre la fluidité capillaire et suffisamment serré pour éviter les fuites. Ensuite, retirez le clip de l’ICA. Appliquez doucement une pression sur le piston de la seringue, permettant une perfusion de la substance à environ 10 microlitres par seconde.
Après la perfusion de la substance d’essai, remettez le clip sur l’ICA. Retirez délicatement le tube capillaire, puis attachez complètement le nœud ECA inférieur. Retirez le clip de l’ICA et du CCA. Retirez ensuite l’écarteur ou les crochets en tissu et l’oreiller.
Nettoyez la zone à suturer avec une solution saline stérile, puis fermez l’incision à l’aide de sutures en nylon. Après avoir administré un agent anti-inflammatoire et un analgésique approuvés pour soulager l’inconfort postopératoire, placez l’animal dans une cage sur un coussin chauffant pendant au moins une heure et surveillez la récupération.