Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 2:28 min • June 17th, 2025
Commençons avec une souris immunocompétente anesthésiée avec des cellules tumorales exprimant la luciférase implantées dans le tissu cérébral.
La souris reçoit également de la luciférine, un substrat de l’enzyme luciférase.
La luciférine circule dans la circulation sanguine, traverse la barrière hémato-encéphalique et atteint les cellules tumorales exprimant la luciférase.
Configurez le système d’imagerie avec des paramètres pour mesurer les signaux bioluminescents des cellules tumorales exprimant la luciférase.
Placez la souris anesthésiée dans la chambre d’imagerie de bioluminescence et acquérez des images.
La luciférine pénètre dans la cellule et interagit avec l’enzyme luciférase, produisant un signal bioluminescent proportionnel au nombre de cellules tumorales.
Utilisez l’outil Région d’intérêt pour définir une zone de signal et quantifier le signal bioluminescent.
Pour évaluer la croissance tumorale, répétez l’imagerie sur plusieurs jours et mesurez le signal de luminescence de la même zone.
Au fil du temps, les cellules exprimant la luciférase commencent à proliférer, formant un glioblastome ou une tumeur.
L’augmentation des signaux de luminescence confirme la croissance du glioblastome.
Pour imager la croissance de la tumeur intracrânienne, il faut d’abord initialiser la station d’imagerie comme nous venons de le démontrer.
Ensuite, après avoir confirmé le niveau de sédation approprié par pincement de la queue, configurez les paramètres du système d’imagerie comme nous venons de le démontrer, à l’exception de la sélection Auto pour le temps d’exposition. Lorsque le système d’imagerie est prêt, placez les souris sur la station d’imagerie et sélectionnez Acquérir pour obtenir des images de l’expression de la luciférase. Une fois l’image acquise, sélectionnez l’outil Région d’intérêt dans la palette d’outils et Auto dans l’icône du cercle.
Encerclez les zones de signal pour définir les régions d’intérêt. Et puis obtenez des mesures des régions en unités de photons par seconde, par stéradian et par centimètre carré. Enfin, retirez les souris de la chambre d’imagerie et surveillez les animaux porteurs de tumeurs jusqu’à ce qu’ils soient complètement rétablis.