Injection sous-rétinienne de vecteurs viraux dans l’épithélium pigmentaire rétinien dans un modèle murin

Commencez avec une souris anesthésiée et appliquez un agent dilatateur des pupilles.

Au microscope, ouvrez la paupière et faites légèrement saillir l’œil pour exposer le site d’injection.

Appliquez une goutte de solution viscoélastique ophtalmique, puis placez une lamelle pour visualiser la rétine.

À l’aide d’une aiguille fine, créez un trou derrière la jonction cornée-sclérotique, en évitant d’endommager les vaisseaux sanguins et le cristallin.

À travers ce trou pré-perforé, insérez une seringue émoussée tangentiellement dans l’espace sous-rétinien près de l’épithélium pigmentaire rétinien ou EPR, qui soutient les neurones rétiniens.

Injecter le vecteur lentiviral porteur des gènes cibles dans l’espace sous-rétinien.

Observez la formation d’une bulle sous-rétinienne due à l’accumulation de liquide, confirmant la réussite de l’administration du vecteur.

Fermez doucement la paupière pour couvrir le site d’injection et permettre à la souris de récupérer.

Le lentivirus pénètre dans l’EPR par endocytose, libère son matériel génétique et le convertit en l’ADN correspondant, qui s’intègre au génome de l’hôte, permettant l’expression des gènes.

Tout d’abord, préparez une seringue d’un microlitre