Imagerie par bioluminescence in vivo de cellules progénitrices neurales humaines dans le cerveau d’une souris

Commençons par une souris immunodéficiente à qui l’on injecte des cellules progénitrices neurales humaines génétiquement modifiées, ou NPC, dans son cerveau.

Ces cellules expriment la luciférase, une enzyme productrice de lumière.

Injectez de la luciférine, le substrat de la luciférase, par voie intrapéritonéale dans la souris.

Anesthésie la souris, puis applique un lubrifiant ophtalmique sur ses yeux pour éviter le dessèchement et rase sa tête pour l’imagerie.

Positionnez la souris en position couchée à l’intérieur d’une chambre d’imagerie avec des conditions prédéfinies pour l’imagerie.

La luciférine circule dans la circulation sanguine et pénètre dans le tissu cérébral en passant à travers les cellules endothéliales, atteignant les NPC transplantés.

À l’intérieur des cellules, la luciférine réagit avec la luciférase et produit une lumière bioluminescente.

Le système d’imagerie capte ces signaux bioluminescents émis par le site de transplantation de NPC.

Ces signaux bioluminescents confirment la transplantation réussie des NPC humains dans le cerveau de la souris.

Injectez la luciférine par voie intrapéritonéale et, après cinq minutes, anesthésez les animaux avec un apport continu d’isoflurane. Rasez les animaux sous sédation sur la région de la tête à l’aide d’un rasoir à cheveux conventionnel. Placez l’animal dans la chambre d’imagerie et commencez l’imagerie 15 minutes après l’injection de luciférine en cliquant sur Acquérir dans le panneau de configuration.