Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:00 min • June 17th, 2025
Prenez une tranche de cerveau de souris fixée chimiquement dans une plaque multipuits.
Le tissu contient des axones entourés de gaines de myéline riches en lipides. Les corps cellulaires contiennent des corps de Nissl composés d’un réticulum endoplasmique rugueux et de ribosomes.
Incuber dans une solution de perméabilisation contenant un colorant fluorescent Nissl. La solution perméabilise les membranes cellulaires, permettant au colorant de se lier à l’ARN ribosomique dans les corps de Nissl et de marquer les corps cellulaires.
Placez le tissu sous un microscope confocal avec un système d’imagerie cohérent anti-spectroscopie Raman de Stokes, ou CARS.
La pompe synchronisée directe et les faisceaux laser de Stokes sur le tissu, réglés pour exciter les liaisons moléculaires dans la gaine de myéline riche en lipides.
Introduire un faisceau laser de sonde pour interagir avec les liaisons excitées et produire un signal anti-Stokes spécifique à la myéline.
Un photodétecteur capte le signal pour générer une image spécifique à la myéline.
Utilisez l’imagerie confocale pour capturer les signaux des corps de Nissl marqués.
Superposez les images confocales et CARS pour visualiser l’architecture neuro
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