Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 5:18 min • June 17th, 2025
Prenez une larve de poisson-zèbre transgénique paralysée montée dans une chambre de perfusion.
La larve exprime des indicateurs calciques localisés dans la membrane dans les cellules ciliées du neuromaste, un composant du système de la ligne latérale qui détecte le mouvement de l’eau.
Les cellules ciliées comprennent des faisceaux de cheveux apicaux et des régions présynaptiques basales, qui forment des synapses avec des neurones afférents pour transmettre des signaux.
Sous un microscope confocal, utilisez un faible grossissement pour positionner une pipette à jet de fluide près de la larve.
Augmentez le grossissement pour localiser un neuromaste, repositionnez la pipette près de celui-ci et passez à l’imagerie par
fluorescence.
Délivrer des impulsions fluides pour dévier les faisceaux de cheveux, ouvrant des canaux de mécanotransduction pour l’afflux de cations apicals, y compris les ions calcium.
Les indicateurs faiblement fluorescents se lient au calcium, provoquant une augmentation localisée de la fluorescence.
L’afflux de cations dépolarise la cellule, déclenchant l’entrée du calcium par des canaux voltage-dépendants au niveau de la présynapse basale, où il se lie aux indicateurs et a
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