JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurosciences
0 vues • 2:47 min • August 7th, 2025
Commençons par un rat implanté chirurgicalement avec des fibres optiques ciblant les synapses entre les neurones du noyau géniculé médial (MGN) et de l’amygdale latérale (LA).
Le rat est conditionné à appuyer sur un levier pour recevoir un narcotique à travers un cathéter, une action associée à des indices auditifs et visuels.
Lors d’un conditionnement répété, les signaux auditifs voyagent via le MGN et induisent une régulation positive des récepteurs des neurotransmetteurs au niveau des synapses, renforçant ainsi les connexions synaptiques.
Le rat transduit par voie virale exprime des canaux ioniques sensibles à la lumière dans les neurones MGN.
Délivrer des impulsions à basse fréquence via les fibres optiques pour ouvrir ces canaux, un processus appelé stimulation optogénétique.
L’afflux de cations qui en résulte induit la libération de neurotransmetteurs à basse fréquence.
Les neurotransmetteurs se lient aux récepteurs des neurones de l’AL et induisent un afflux de calcium de faible niveau, ce qui induit l’internalisation des récepteurs des neurotransmetteurs et affaiblit les synapses.
L’affaiblissement de la transmission synaptique MGN-LA entraîne une diminution de la communication neuronale, connue sous le nom de dépression à long terme (DLT), et réduit le comportement de recherche de narcotiques associé aux signaux.
Pour l’induction optogénétique de la dépression à long terme ou LTD, connectez les câbles de raccordement à une diode laser bleue de 473 nanomètres via un joint rotatif suspendu au-dessus d’une cage de logement de rongeur propre et standard. Allumez le laser conformément au mode d’emploi et connectez le laser à un générateur d’impulsions. Ajustez les paramètres pour donner au rat les 900 impulsions de lumière à 2 microsecondes à 1 Hertz. Mesurez le flux lumineux à travers le cordon de raccordement à l’aide d’un capteur de lumière et ajustez l’intensité du laser de sorte que le flux lumineux à travers le câble de raccordement soit d’environ 5 à 7 mw.
Placez le rat dans la cage de logement propre et retirez les couvercles anti-poussière et les manchons de virole, exposant ainsi les viroles. Connectez ensuite les cordons de brassage de manière bilatérale à chaque virole. S’ils sont correctement installés, les rongeurs pourront se déplacer librement dans la cage pendant la stimulation optogénétique. Après avoir permis au rat d’explorer l’environnement pendant trois minutes, allumez le générateur d’impulsions pour lancer la stimulation optogénétique. Après l’induction d’une dépression à long terme, laissez le rat rester dans la cage pendant trois minutes avant de le remettre dans la cage de la maison.