Induction d’une lésion du nerf fibulaire chez une souris pour étudier la régénération de la jonction neuromusculaire

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Placez une souris anesthésiée avec une patte arrière rasée sous un microscope chirurgical.

Incisez la peau de la jambe rasée, puis coupez les couches de tissu conjonctif pour exposer les muscles sous-jacents.

À l’aide d’écarteurs, séparez les muscles pour exposer le nerf fibulaire commun.

Le nerf contient des motoneurones, dont les terminaisons axonales se connectent aux fibres musculaires pour former des jonctions neuromusculaires ou NMJ.

Localisez l’intersection du nerf avec le tendon du muscle gastrocnémien dans le genou.

Tenez le nerf avec des pinces et appliquez une pression pour induire une blessure.

Un site de lésion translucide indique une lésion axonale, ce qui entraîne une altération de la JNM.

Assurez-vous que la couche externe de l’épineurium du nerf est intacte pour guider la régénération axonale.

Retirez les écarteurs et réalignez les muscles. Suturez le site d’incision et laissez la souris récupérer.

Les signaux des axones endommagés recrutent les macrophages pour éliminer les débris axonaux, ce qui favorise la régénération axonale et le rétablissement des JNM.

Placez la souris sur la planche chirurgicale et confirmez l’absence de réponse au pincement des orteils. Alignez les membres à l’intérieur des attaches, avec le membre postérieur cible dans une position anatomiquement naturelle et l’articulation du genou légèrement étendue sans rotation interne ou externe.

Transférez ensuite l’animal sous un microscope chirurgical. Et ajustez la planche jusqu’à ce que l’articulation osseuse du genou et la crête entre le tibial antérieur et les muscles gastrocnémiens soient visibles à travers l’objectif. À l’aide d’un scalpel et d’une pince, faites une incision d’environ trois centimètres à travers la peau perpendiculairement au trajet sous-jacent du nerf fibulaire commun. Poursuivez l’incision à travers le fascia superficiel, en exposant les muscles biceps fémoral et le vaste latéral, suivie d’une incision de 1 à 2 centimètres à travers le fascia profond de liaison pour séparer les muscles.

Ensuite, utilisez des écarteurs mécaniques pour faire reculer le muscle biceps fémoral vers la caudale afin de révéler le nerf fibulaire commun. Tracez le nerf proximal jusqu’à ce que son intersection avec le tendon de la tête latérale du muscle gastrocnémien soit trouvée. Ensuite, à l’aide d’une pince fine, saisissez le nerf, en alignant les pointes parallèlement au bord latéral du tendon gastrocnémien. Et appliquez une pression concentrée constante pendant 5 secondes pour écraser le nerf fibulaire commun.

En tenant la pince perpendiculairement à la fibre, saisissez le tissu avec la zone juste derrière la pointe de la pince. Et appliquez une pression ferme mais douce pour un écrasement net et linéaire du nerf le long du bord du tendon.

Inspectez visuellement le nerf à l’aide du microscope chirurgical pour confirmer un écrasement complet du tissu. Le nerf apparaîtra translucide au site de la blessure. Si le nerf a été suffisamment endommagé, retirez les écarteurs. Et réalignez les muscles dans leurs positions anatomiques. Ensuite, utilisez des sutures en soie 6-0 pour fermer le site d’incision avec une à trois sutures simples et interrompues et placez la souris sur un coussin chauffant dans une cage propre avec surveillance jusqu’à ce qu’elle soit complètement rétablie.