Le test de suspension caudale

Le test de suspension de la queue est un test comportemental courant utilisé pour prédire l’efficacité antidépressive de diverses manipulations expérimentales. Cette vidéo montre les procédures de ce test. Le test de suspension de la queue est validé pour la souris et n’est pas recommandé pour les rongeurs plus gros.

Dans le test de suspension de la queue, les souris sont suspendues par leur queue. La souris reste suspendue pendant six minutes. Les comportements du sujet sont enregistrés pendant ce temps.

À la fin de la période de test de six minutes, le ruban est retiré de la queue du sujet. Une fois le test terminé, les enregistrements visuels sont transférés sur un ordinateur ou un moniteur vidéo. Pour l’analyse, un observateur mesure le temps qu’une souris passe à lutter pendant toute la session de six minutes.

Les composés aux propriétés antidépressives augmentent le temps que je passe à lutter. Cela se traduit par des périodes d’immobilité plus courtes. Par exemple, nous avons rapporté que le médicament stabilisateur de l’humeur lithium, qui est cliniquement utile comme médicament antidépresseur d’appoint, diminuait le temps d’immobilité dans le test de suspension de la queue.

Bonjour, je m’appelle Sean du laboratoire du Dr Todd Gould au Département de psychiatrie de la faculté de médecine de l’Université du Maryland à Baltimore. Bonjour, je suis Chantel du même laboratoire. Dans cette vidéo, nous allons vous montrer comment effectuer et noter le test de suspension arrière.

Le test de suspension de la queue est utilisé pour évaluer l’efficacité potentielle des traitements antidépresseurs. Allons donc au laboratoire et montrons comment mener l’expérience. Bien que cela ne soit pas obligatoire, nous utilisons une boîte de suspension arrière spécialement conçue.

Pour ce test. Notre boîte de suspension arrière est divisée en quatre compartiments, chacun réservé à une seule souris. Les séparateurs empêchent les souris de s’observer pendant le test.

Cependant, il est possible d’utiliser une étagère ou une autre structure pour suspendre les souris. Les dimensions de la boîte de test de suspension de la queue sont choisies pour empêcher les souris d’atteindre et de s’accrocher aux bords. Avant de commencer l’expérience, coupez suffisamment de fragments de ruban adhésif et marquez le segment qui va être utilisé pour l’adhérence à la queue.

Dans notre laboratoire, nous utiliserons des fragments de bande de 17 centimètres. À deux centimètres de l’extrémité de ce fragment de ruban adhésif doit être marqué et sera utilisé pour adhérer à la queue. Nous plaçons la queue au milieu de cette portion de deux centimètres.

Positionnez le boîtier de test de la suspension arrière et la caméra vidéo. Avant d’introduire les animaux, la boîte doit être soigneusement nettoyée avec une solution stérilisante pour neutraliser les odeurs laissées par les sujets précédents. Dans notre laboratoire, nous utilisons deux boîtes de suspension arrière différentes, identiques en tous points sauf la couleur.

Pour les souris albinos, une boîte gris foncé offre un bon contraste pour les enregistrements vidéo. Pour les souches de souris de couleur plus foncée, une boîte blanche est appropriée. Démarrez la machine à bruit blanc.

Il doit masquer les sons intermittents. Amenez les souris dans la salle d’intervention pour qu’elles s’acclimatent. Les conditions dans la pièce doivent être constantes et exemptes de bruits, de changements de niveaux de lumière et d’autres perturbations possibles.

Cette période est généralement d’au moins une heure. Une fois la période d’acclimatation terminée, le test peut alors se poursuivre afin d’empêcher certaines souches de souris de grimper sur leur queue. Lors du test de suspension de la queue, nous utilisons des cylindres en plastique que nous plaçons sur les queues.

Ces cylindres reposent à la base de leur queue pendant l’essai. Dans notre laboratoire, nous utilisons des cylindres en plastique de quatre centimètres de long, d’un centimètre de diamètre et pesant 1,5 gramme. Si des cylindres en plastique sont utilisés pour empêcher l’escalade, ils doivent être placés sur les queues avant d’appliquer le ruban.

Nous appliquons du ruban adhésif à l’extrémité de la queue avec deux à trois millimètres de la queue restant à l’extérieur du ruban. Collez le ruban adhésif sur la queue des souris dans leur cage domestique. Utilisez l’extrémité marquée du ruban et assurez-vous que le ruban adhère à la queue et repousse sur lui-même.

Une fois le ruban appliqué, fixez chaque souris aux parois de la cage afin d’éviter l’enchevêtrement du ruban attaché à différents animaux. Terminez ce processus rapidement. Sinon, les souris seront soumises à un stress inutile.

L’enregistrement doit être commencé avant que les animaux ne soient suspendus. Suspendez les animaux en plaçant l’extrémité libre du ruban sur la barre de suspension dans un ordre qui est contrebalancé entre les groupes de traitement et de manière à ne pas obstruer la vue de la caméra. Parce que les souris sont suspendues une par une, chaque animal a une heure de début légèrement différente pour le test.

Assurez-vous de commencer à noter chaque souris exactement au début de sa période de suspension. Il est important de ne pas obstruer la vue de la caméra. Étant donné que toute la session de suspension de queue sera marquée comme obstruante, la vue de la caméra pourrait entraîner des données manquantes.

Assurez-vous que toutes les extrémités du ruban sont perpendiculaires à la barre de suspension avec la même longueur de mou. Pour chaque sujet, démarrez le chronomètre. L’essai de suspension de queue dure six minutes.

Une fois la période de test de six minutes écoulée, retirez le ruban adhésif de l’extrémité de chaque queue et remettez les souris dans leur cage d’origine. À la fin du test, les informations sur le sujet doivent être enregistrées sur vidéo. Une fois les souris renvoyées dans la salle de la colonie, la boîte de test doit être soigneusement nettoyée et essuyée avec une solution de stérilisation.

Maintenant que nous avons terminé les tests, nous allons discuter de l’évaluation des comportements. La seule variable qui est généralement évaluée lors de la notation du test de suspension de la queue est le temps pendant lequel les animaux sont immobiles. Pour obtenir le temps d’immobilité, nous allons mesurer le temps pendant lequel les souris sont mobiles et le déduire du temps de test de six minutes. Nous marquerons les six minutes du test.

Nous couvrons d’abord les souris qui ne sont pas évaluées pour permettre à l’observateur de se concentrer sur un seul animal pour chaque temps passé sur une souris. Le mobile est mesuré par un chronomètre à l’écran contrôlé par une manette de jeu. Ici, comme vous pouvez le voir, il y a deux chronomètres distincts à l’écran qui sont contrôlés simultanément.

Le premier chronomètre compte à rebours à partir de 360 secondes et indique la durée du test à l’observateur. Le deuxième chronomètre mesure le temps pendant lequel les sujets restent mobiles. Comme vous pouvez le remarquer, le deuxième chronomètre est couvert par le premier chronomètre et seules ses décimales millisecondes sont visibles par l’observateur.

De cette façon, l’observateur pourra voir si le chronomètre compte, mais ne pourra pas voir le temps de mobilité total tant que le score n’est pas terminé. Nous faisons cela pour éviter que le biais de l’observateur n’affecte les résultats. Les souris, surtout au début de la session, manifestent des comportements liés à l’évasion.

Ces comportements comprennent la tentative d’atteindre les parois de l’appareil et de la barre de suspension, de fortes secousses du corps et des mouvements des membres semblables à la course. Ces mouvements constituent clairement de la mobilité. Cependant, au fur et à mesure que le test progresse, les mouvements deviennent plus subtils.

Dans notre laboratoire, nous ne comptons pas les petits mouvements qui sont confinés aux pattes avant, mais sans aucun mouvement des pattes arrière comme mobilité. En plus de ce pendule, les balançoires qui sont dues au gain d’élan lors des périodes de mobilité précédentes ne sont pas considérées comme de la mobilité. Voyons maintenant le score d’une séance d’essai réelle de suspension arrière.

Le temps d’immobilité, et non le temps de mobilité, est généralement signalé. Le temps d’immobilité peut être calculé en soustrayant le temps total de mobilité du temps de test de 360 secondes. Marquer. Le test de suspension arrière demande de l’entraînement et de la pratique.

Il est important d’établir une norme de laboratoire interne et de former de nouveaux observateurs jusqu’à ce qu’ils atteignent un haut niveau de fiabilité. Dans cet article, nous expliquons comment effectuer et noter le test de suspension de queue. Bonne chance pour vos futures expériences.