Le test de suspension caudale

Le test de suspension par la queue est un test comportemental courant utilisé pour prédire l'efficacité antidépressive de diverses manipulations expérimentales. Cette vidéo montre les procédures de ce test. Le test de suspension par la queue est validé pour la souris et n'est pas recommandé pour les rongeurs de plus grande taille.

Dans le test de suspension par la queue, les souris sont suspendues par la queue. La souris reste suspendue pendant six minutes. Les comportements du sujet sont enregistrés pendant cette période.

À la fin de la période de test de six minutes, le ruban est retiré de la queue du sujet. Une fois le test terminé, les enregistrements vidéo sont transférés sur un ordinateur ou un moniteur vidéo. Pour l'analyse, un observateur mesure le temps qu'une souris passe à se débattre pendant l'ensemble de la session de six minutes.

Les composés aux propriétés antidépressives augmentent la durée pendant laquelle l'animal lutte activement. Ceci se traduit par des périodes d'immobilité plus courtes. Par exemple, nous avons rapporté que le lithium, un médicament stabilisateur de l'humeur utile cliniquement comme traitement antidépressif adjoint, réduit la durée d'immobilité dans le test de suspension par la queue.

Bonjour, je m'appelle Sean du laboratoire du Dr Todd Gould, du département de psychiatrie de la faculté de médecine de l'Université du Maryland à Baltimore. Salut, je suis Chantel du même laboratoire. Dans cette vidéo, nous allons vous montrer comment réaliser et évaluer le test de suspension par la queue.

Le test de suspension par la queue est utilisé pour évaluer l'efficacité potentielle des traitements antidépresseurs. Rendons-nous donc au laboratoire pour vous montrer comment réaliser l'expérience. Bien que cela ne soit pas obligatoire, nous utilisons une boîte spécialement conçue pour le test de suspension par la queue.

Pour ce test, notre boîte de suspension par la queue est divisée en quatre compartiments, chacun réservé à une souris unique. Les séparations empêchent les souris d'observer les autres pendant le test.

Cependant, il est possible d'utiliser une étagère ou une autre structure pour suspendre les souris. Les dimensions de la boîte du test de suspension par la queue sont choisies de manière à empêcher les souris d'atteindre et de s'accrocher aux bords. Avant de commencer l'expérience, découpez suffisamment de morceaux de ruban adhésif et marquez le segment qui sera utilisé pour l'adhésion à la queue.

Dans notre laboratoire, nous utiliserons des fragments de ruban de 17 centimètres. Un repère doit être placé à deux centimètres de l'extrémité de ce fragment de ruban et servira à fixer la queue. Nous positionnons la queue au milieu de cette portion de deux centimètres.

Positionnez la boîte du test de suspension par la queue et la caméra vidéo. Avant d'introduire les animaux, la boîte doit être soigneusement nettoyée avec une solution stérilisante afin de neutraliser les odeurs laissées par les sujets précédents. Dans notre laboratoire, nous utilisons deux boîtes de suspension par la queue différentes, identiques en tout point sauf par la couleur.

Pour les souris albinos, une boîte gris foncé offre un bon contraste pour les enregistrements vidéo. Pour les souches de souris aux couleurs plus foncées, une boîte blanche est appropriée. Mettez en marche le générateur de bruit blanc.

Il doit masquer tous les sons intermittents. Amenez les souris dans la salle de procédure pour qu'elles s'acclimatent. Les conditions dans la pièce doivent être maintenues constantes et exemptes de bruits, de variations du niveau de lumière et d'autres perturbations possibles.

Cette période d'acclimatation est généralement d'au moins une heure. Une fois cette période terminée, le test peut commencer afin d'empêcher certaines souches de souris de grimper le long de leur queue. Lors du test de suspension par la queue, nous utilisons des cylindres en plastique que nous plaçons autour des queues.

Ces cylindres reposent à la base de la queue des souris pendant le test. Dans notre laboratoire, nous utilisons des cylindres en plastique mesurant quatre centimètres de long, un centimètre de diamètre et pesant 1,5 gramme. Si des cylindres en plastique sont utilisés pour empêcher l'escalade, ils doivent être placés sur les queues avant d'appliquer le ruban adhésif.

Nous appliquons un ruban adhésif à l'extrémité même de la queue, en laissant dépasser deux à trois millimètres de la queue hors du ruban. Fixez le ruban sur les queues des souris dans leur cage d'origine. Utilisez l'extrémité marquée du ruban et assurez-vous qu'il adhère à la queue puis se replie sur lui-même.

Une fois le ruban appliqué, fixez chaque souris aux parois de la cage afin d'éviter que les rubans attachés à différents animaux ne s'emmêlent. Effectuez ce processus rapidement. Sinon, les souris seront soumises à un stress inutile.

L'enregistrement doit commencer avant que les animaux ne soient suspendus. Suspendez les animaux en plaçant l'extrémité libre du ruban sur la barre de suspension selon un ordre contrebalancé entre les groupes de traitement et de manière à ne pas obstruer la vue de la caméra. Étant donné que les souris sont suspendues une par une, chaque animal présente un temps de début légèrement différent pour le test.

Veillez à commencer l'évaluation de chaque souris exactement au début de sa période de suspension. Il est important de ne pas obstruer la vue de la caméra. Puisque toute la séance de suspension par la queue sera évaluée, une obstruction de la vue de la caméra pourrait entraîner une perte de données.

Veillez à ce que toutes les extrémités du ruban soient perpendiculaires à la barre de suspension et présentent la même longueur de mou. Pour chaque sujet, démarrez le chronomètre. La durée du test de suspension par la queue est de six minutes.

Une fois la période de test de six minutes écoulée, retirez le ruban adhésif de l'extrémité de chaque queue et remettez les souris dans leur cage d'origine. À la fin du test, les informations concernant le sujet doivent être enregistrées en vidéo. Après le retour des souris dans la salle d'élevage, la boîte de test doit être soigneusement nettoyée et essuyée avec une solution de stérilisation.

Maintenant que nous avons terminé les tests, nous allons aborder la notation des comportements. La seule variable généralement évaluée lors de la notation du test de suspension par la queue est la durée pendant laquelle les animaux sont immobiles. Pour obtenir la durée d'immobilité, nous mesurerons le temps pendant lequel les souris sont mobiles, puis soustrairons cette valeur du temps total du test, qui est de six minutes. Nous noterons l'ensemble des six minutes du test.

Nous couvrons d'abord les souris qui ne sont pas évaluées afin de permettre à l'observateur de se concentrer sur un seul animal pour chaque durée d'observation par souris. La mobilité est mesurée à l'aide d'un chronomètre à l'écran contrôlé par un dispositif de manette de jeu. Ici, comme vous pouvez le voir, il y a deux chronomètres distincts à l'écran qui sont contrôlés simultanément.

La première minuterie décompte à partir de 360 secondes et indique la durée du test à l'observateur. La deuxième minuterie mesure le temps pendant lequel les sujets restent en mouvement. Comme vous pouvez le remarquer, la deuxième minuterie est masquée par la première, et seules ses décimales en millisecondes sont visibles pour l'observateur.

De cette manière, l'observateur pourra voir si le chronomètre est en marche, mais ne pourra pas voir le temps total de mobilité avant la fin du comptage. Nous procédons ainsi afin d'éviter que des biais de l'observateur n'affectent les résultats. Les souris, en particulier au début de la séance, manifestent des comportements liés à l'échappement.

Ces comportements incluent des tentatives d'atteindre les parois de l'appareil et la barre de suspension, des secousses vigoureuses du corps et des mouvements des membres comparables à la course. Ces mouvements constituent clairement une mobilité. Toutefois, à mesure que le test progresse, les mouvements deviennent plus subtils.

Dans notre laboratoire, nous ne comptons pas les petits mouvements limités aux membres antérieurs, sans aucun déplacement des membres postérieurs, comme étant de la mobilité. En outre, les oscillations de type pendulaire, dues à l'acquisition de moment cinétique lors des épisodes de mobilité précédents, ne sont pas considérées comme de la mobilité. Voyons maintenant l'évaluation d'une session réelle de test de suspension par la queue.

On signale généralement le temps d'immobilité, et non le temps de mobilité. Le temps d'immobilité peut être calculé en soustrayant le temps total de mobilité de la durée totale du test, soit 360 secondes. Évaluation. Le test de suspension par la queue nécessite une formation et une pratique.

Il est important d'établir une norme interne en laboratoire et de former les nouveaux observateurs jusqu'à ce qu'ils atteignent un niveau élevé de fiabilité. Dans cet article, nous expliquons comment réaliser et évaluer le test de suspension par la queue. Bonne chance dans vos futures expériences.