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DOI: 10.3791/50085-v
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La méthode la plus couramment utilisée pour générer un grand nombre de cellules dendritiques autologues (CD) pour l'utilisation dans l'immunothérapie tumorale est décrite. La méthode utilise IL-4 et GM-CSF pour différencier les PED à partir de monocytes. Les DC immatures sont stimulées à maturité, puis chargé avec des antigènes avant qu'ils ne soient réinjectées au patient.
L’objectif global de cette procédure est de démontrer la préparation de cellules dendritiques de qualité clinique pour l’immunothérapie. Ceci est accompli en congelant d’abord des cellules mononucléées du sang périphérique isolées de la leucaphérèse. Dans la deuxième étape, les aliquotes congelées de pbmc sont décongelées et les monocytes sont différenciés en cellules dendritiques en présence de G-M-C-S-F et IL quatre pendant cinq jours.
Ensuite, les cellules dendritiques sont récoltées, pulsées avec des peptides et matures pendant la nuit avec le poly ICLC à trois agonistes du TLR. Au cours de la dernière étape, les cellules dendritiques matures sont récoltées et congelées dans des aliquotes. Ces aliquotes congelées de cellules dendritiques matures peuvent être décongelées, transférées dans des seringues et réinjectées aux patients dans le cadre de leur immunothérapie.
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