Name: Évaluation des membres antérieurs Fonction après unilatérale du col SCI utilisant de nouvelles tâches: Membre étape alternance, linstabilité posturale et pâtes manutention (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-09-16T18:10:00.000+00:00
Duration: 8 min 11 s
Description: Découvrez trois tests comportementaux simples pour évaluer la fonction des membres antérieurs après lésion cervicale de la moelle épinière chez le rat. Ces méthodes mesurent l'alternance des pas, l'instabilité posturale et la motricité fine.

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Nous tenons à remercier le financement de la Mission Connect, un projet de la Fondation TIRR (CES et ZZK), la Fondation Craig Nielsen (CES) et la NSF Graduate Research Fellowship (Grant #: 2011112479 pour SAG).

Toutes les procédures d&#39;animaux ont été effectuées conformément aux protocoles approuvés avec le IACUC interne à l&#39;Université du Texas à Austin et dans National Institutes of Health (NIH) guidelines. Les animaux utilisés dans cette étude avaient une blessure contusion latérale C3/C4 l&#39;aide d&#39;un horizon infini de frappe, ou un modèle de hemisection latérale C3/C4 et ces méthodes peuvent être appliquées plus largement à d&#39;autres modèles 18. Nous recommandons que les chercheurs testent les animaux pendant 2 semaines avant de blessures, 3 jours après la blessure et régulièrement (par exemple chaque semaine) pour la durée de l&#39;étude. Lors de l&#39;exécution des tests comportementaux sur les animaux post-opératoires, en particulier dans trois jours après la chirurgie, il faut veiller à ce que les animaux ont suffisamment récupéré de la chirurgie et que les procédures de test de comportement ne causent pas de douleur supplémentaire ou de stress pour les animaux. En général, les 2-3 semaines de traitement et de pré-tests peuvent être nécessaires avant la chirurgie. Il s&#39;agit d&#39;obtenir l&#39;animal à l&#39;aise à l&#39;environnement de test en les manipulant de manière similaire à la façon dont ils seront traités lors des essais ainsi que de permettre à l&#39;animal de se déplacer librement sur la surface d&#39;essai. Il est également important d&#39;obtenir l&#39;animal habitué à être tenue, ce qui peut être fait en déplaçant sur l&#39;animal et à proximité de la surface de test dans des mouvements non directs pour s&#39;acclimater à l&#39;animal de la manipulation. Il est également important de se détendre les animaux au début et entre les sessions de test. Pour se détendre les animaux, tenir l&#39;animal sur une table dans une position portant la patte avant-seulement, dans une position &quot;brouette&quot; et rebondir l&#39;animal doucement sur la table permettant aux membres antérieurs de toucher la surface. Cette enseigne les animaux pour détecter dessous d&#39;eux pour une surface stable et est une étape importante et nécessaire dans la procédure, car il garantit que les animaux sont détendus avant le début des essais. Une. Forelimb essai Step-alternance <ol><li> Résumé du test: Placez les animaux avec les deux pattes avant de toucher la table pour déterminer si ils alternent l&#39;usage de leurs membres antérieurs. Déplacez le rat avant, en transférant leur centre de gravité, les forçant à essayer de l&#39;étape. Cet essai est répété quatre fois avec chaque animal et, si une capacité de spectacles d&#39;animaux d&#39;alterner à, ou supérieure à 75%, elle est considérée comme un alternateur. Il s&#39;agit d&#39;une tâche de mouvement forcé, pour que les animaux qui sont considérés comme non-alternateurs vont intervenir à plusieurs reprises avec la même patte avant. </li><li> Tenir un animal sur une table dans un poids-roulement position des membres antérieurs seule, dans une position &quot;brouette&quot; avec leur corps de près de 90 ° de la table. </li><li> Une fois l&#39;animal apparaît détendu, pousser l&#39;animal avant de se déplacer le long de la surface de la table. </li><li> Déterminer et indiquer si les suppléants de rats utilisent des membres antérieurs tout en se déplaçant sur la surface. </li><li> Noter et enregistrer la patte antérieure qui a lancé le mouvement et si l&#39;animal peut alterner ou pas on la Forelimb étape Alternance Score Test Sheet (fourni). </li><li> Répétez ce test au moins deux fois tout en tenant l&#39;animal avec une main (droite ou gauche). Répéter au moins deux fois à nouveau tout en maintenant l&#39;animal dans l&#39;autre main. </li><li> Si les rats ont montré cette capacité, étape alternance peut être testé à nouveau par l&#39;introduction d&#39;une attente de 5 secondes après la première étape pour déterminer si le modèle de l&#39;alternance reste après un délai. Notez les résultats et enregistrement dans la feuille de pointage. </li><li> Ce test peut être utilisé quotidiennement, et il est recommandé que les animaux testés au moins une fois par semaine pour une expérience de mesures répétées. </li></ol> Remarque: il est important d&#39;alterner la position de la main de l&#39;expérimentateur, car il peut affecter le comportement d&#39;alternance des animaux d&#39;essai. La feuille de pointage étape alternance fourni peut être utilisé pour noter la position de la patte et utiliser pendant pas à pas. Bien que nous n&#39;avons pas intégré ces données dans notre système de notation a (nous avons seulementutilisée statut d&#39;alternance à regrouper les animaux lésés dans la présente étude), les utilisateurs peuvent facilement inclure des données de position de la patte dans le cadre de l&#39;analyse en fonction du projet spécifique. 2. Postural test d&#39;instabilité <ol><li> Résumé du test: Pour ce test de comportement, maintenez rats dans une position similaire à celle de l&#39;essai des membres antérieurs de l&#39;alternance, toutefois, chaque membre antérieur doit être testé individuellement. Le plateau devrait être couvert avec du papier de verre (n ° 220) pour éviter de glisser, contreventement, ou en faisant glisser les pattes avant pendant le test. <ol><li> Dans cet essai, la distance qu&#39;il faut pour l&#39;animal de prendre un peu de la patte antérieure en cours d&#39;examen à retrouver son équilibre sera enregistrée. </li><li> Animaux sein d&#39;un groupe d&#39;étude devrait être approximativement le même poids, la taille et l&#39;âge que de grandes différences dans le poids du corps peut entraîner des variations dans la distance de base nécessaires pour maintenir le centre de gravité pour un animal donné 19. Un groupe témoin doit êtreinclus en utilisant PIT pour vérifier que les changements de comportement sont dus à la régénération ou de récupération plutôt que l&#39;âge et le gain de poids. </li></ol></li><li> Tenir un animal sur une table dans une position confortable et permettre aux deux pattes avant d&#39;atteindre la surface, l&#39;animal doit être confortablement dans une position &quot;brouette&quot; avec leur corps de près de 90 ° de la table. On notera qu&#39;il est important de maintenir l&#39;animal dans une position plus verticale. Ceci permettra à une distance plus uniforme nécessaire pour déclencher une étape de regagner le centre de gravité. </li><li> Légèrement empêcher un membre antérieur contre le torse de l&#39;animal et aligner le nez du rat avec la ligne zéro en vue de dessus. </li><li> Déplacez le rat avant. Cela déplace le centre de gravité vers l&#39;avant stimulant l&#39;animal à l&#39;étape de retrouver son équilibre de l&#39;animal. </li><li> Enregistrer la nouvelle position du nez après les étapes de rat deux fois et utiliser la moyenne de ces deux étapes que la distance nécessaire pour déclencher une étape. </li><li> Testez chaque forelimb indépendamment 5x, ce qui porte l&#39;animal à la position 0 et vérifier que l&#39;animal continue à être assouplies dans les mains de l&#39;expérimentateur avant de continuer à assurer des résultats cohérents. </li><li> Fiche sur le test d&#39;instabilité posturale (PIT) Score Sheet, fourni. Ce test peut être effectué quotidiennement, et il est recommandé que les animaux sont testés au moins une fois par semaine pendant la durée de l&#39;expérience. </li></ol> 3. Pâtes Manipulation test <ol><li> Résumé du test: Ce test permet de déterminer le temps qu&#39;il faut pour manger un morceau de pâte et de la préférence de la patte pendant une session de pâtes alimentaires. Dans ce test, utilisez 4,0 cm brins de pâtes sèches (spaghetti minces; diamètre ~ 1,6 mm). Le test doit être administré à peu près au même moment chaque jour de test. Rongeurs mangent généralement pâtes sèches facilement, mais 4-6 heures de retrait des aliments est recommandé avant l&#39;essai si cela ne se produit pas. </li><li> mesures de base doivent être acquises 1-2 semaines avantd&#39;une blessure. Avant enregistrements de référence, les rats doivent avoir le même type de pâtes dans leur cage afin de les préparer pour les tests. Ensuite, permettent aux rats de manger des pâtes dans une chambre d&#39;essai et d&#39;enregistrer le temps de manger des pâtes. morceaux de pâtes doivent être placés à l&#39;avant de la chambre de test où l&#39;utilisation des pattes antérieures peut être observée facilement. Chaque session de pâtes-manger doit inclure manger au moins trois morceaux de pâtes. Les rats sont considérés compétents en mangeant des pâtes si leur temps de pâtes-manger est conforme pour au moins 3 jours. </li><li> Après la formation des rats à manger des pâtes constante dans la chambre d&#39;essai, placer les rats dans des chambres d&#39;enregistrement. </li><li> Placez les morceaux de pâtes sur le sol près de l&#39;avant du temps de la chambre d&#39;essai et dossier de manger un morceau de pâte, membres antérieurs utilisés, et les positions des membres antérieurs, comme on le voit sur la feuille de score Pâtes de manutention. </li><li> Ce test peut être effectué quotidiennement, mais il est recommandé d&#39;effectuer chaque semaine tout en respectant le poids des animaux to pas trop nourrir les animaux. </li></ol> Remarque: La feuille de score Pâtes de manutention fournit l&#39;espace pour enregistrer le temps de manger des pâtes et de l&#39;utilisation de la patte, similaires aux données incluses dans cette étude. Nous avons également inclus les zones à enregistrer des détails supplémentaires sur l&#39;utilisation de la patte pendant une session de manger des pâtes, telles que la position de la patte.

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Aucun conflit d&#39;intérêt déclaré.

Lésions de la moelle épinière cervicale (CSCI) peut entraîner des blessures dévastatrices et qui change la vie des patients. Il existe un certain nombre de modèles de lésion de la moelle épinière cervicale développés chez les rongeurs qui sont utilisés pour étudier la plasticité des substrats neuronaux et des agents thérapeutiques. Développer sensible, efficace, reproductible et facile à utiliser des tests comportementaux pour évaluer les déficits et la récupération fonctionnelle après CSCI est un objectif important. Ici, nous décrivons en détail l&#39;utilisation de trois de ces tests comportementaux: membre alternance, l&#39;instabilité posturale et de manipulation de pâtes. Lésions de la moelle épinière chez les rongeurs, comme dans la population humaine, est une lésion hétérogène. Une blessure très similaire peut induire une variété de troubles du comportement. Par conséquent, il est important de déterminer la gravité des lésions chez des animaux blessés. Nous avons constaté que la tâche des membres de l&#39;alternance est un moyen très efficace de déterminer si le côté contralésionnel est endommagé après une blessure unilatérale (de hemisection ou contType usion blessure) à la moelle épinière cervicale 19. Les données de notre groupe ont montré que l&#39;utilisation de cette branche tâche d&#39;alternance peut déterminer la gravité de la lésion à l&#39;intérieur de la première semaine après la lésion. En outre, les animaux les plus gravement blessés (non-alternateurs) avaient un profil de récupération significativement différente par rapport à des alternateurs (en utilisant l&#39;échelle de la locomotion des membres antérieurs). Par conséquent, la tâche des membres de l&#39;alternance est extrêmement utile en regroupant les rats blessés dans les alternateurs et les non-alternateurs, en particulier si l&#39;étude comprend un traitement chronique pour s&#39;assurer qu&#39;il ya une répartition égale de la gravité des lésions dans chaque groupe de traitement. Il est recommandé que le test forelimb-alternance être utilisé en combinaison avec d&#39;autres tâches qui peuvent examiner l&#39;utilisation des membres antérieurs des animaux (tels que l&#39;échelle des membres antérieurs locomotrice ou le test de préférence cylindre de la patte). Bien que l&#39;administration de ce test, il est impératif que l&#39;expérimentateur effectuer le test le même nombre de foisavec chaque main (par exemple, deux fois avec la main gauche et deux fois avec la droite) pour minimiser l&#39;effet de la position expérimentateur de main sur le comportement des rats. Ce test n&#39;est efficace que si l&#39;animal est relâché dans les mains de l&#39;expérimentateur, les 2-3 semaines de manipulation proposées devraient permettre de détente. En outre, une fois que l&#39;animal est détendu, l&#39;expérimentateur doit tenir l&#39;animal à environ 90 ° dans une position pour empêcher la brouette variation intra-animal. Le test forelimb-alternance peut également fournir un aperçu de connexions neuronales transversale de la colonne vertébrale lorsque les animaux sont incapables de l&#39;étape individuellement avec une patte, mais sont capables d&#39;effectuer une tâche d&#39;alternance. Pour locomotion quadrupède normale chez les animaux tels que les rats, les nombreuses régions du cerveau ainsi que des générateurs de motifs centraux locaux (GPC) sur la longueur de la moelle épinière sont impliqués. Spécifiquement pour les membres antérieurs mouvement rythmique, les segments cervicaux, C3-C6 sont jugées importantes 22. Auparavant, nous décridifférences de lit anatomiques entre les alternateurs et les non-alternateurs en animaux lésés (un Hémisection latérale à C3/C4 a été effectuée) et ont trouvé plus de dommages à la colonne dorsale et contralésionnel faisceau cortico-spinal chez les animaux non-alternance 18. On pense que pour le mouvement des membres antérieurs, générateur de motif rythmique est présent à chaque niveau de l&#39;hémi-segment cervical et que les connexions inhibitrices contre-cord sont responsables de l&#39;alternance 23. Nos résultats anatomiques antérieures implique également que les dommages à la face contralésionnel de la moelle épinière peut entraîner une perturbation de la sortie du moteur rythmique (comme alternance), alors que si la contralésionnel de la moelle épinière est plus intact, les puissances des moteurs rythmiques sont plus susceptibles d&#39; fonctionner normalement. Nous n&#39;avons pas observé d&#39;importants dégâts à toutes les parties ventrales médianes contralésionnel des cordes et donc que l&#39;analyse n&#39;a pas été effectuée. Le test de l&#39;instabilité posturale décrite ici est un ver<html> test utile y car il peut détecter des changements dans les deux membres antérieurs (ipsi-et contralésionnel) causée par une lésion unilatérale. Il est important de noter que ce test doit être administré que lorsque l&#39;animal est relâché dans les mains de l&#39;expérimentateur. Dans notre expérience, cela peut prendre manipulation quotidienne des animaux pendant 2-3 semaines. Une fois l&#39;expérimentateur et l&#39;animal sont à l&#39;aise, ce test est très sensible et peut être utilisé pour obtenir des données de déplacement très cohérents pour chaque membre antérieur. Si l&#39;animal est tendue, l&#39;expérimentateur peut tenir doucement l&#39;animal et les déplacer au large de et vers le bas sur la table jusqu&#39;à ce que l&#39;animal est confortable et comprend que le tableau est un endroit sûr. Une fois l&#39;animal est détendu, il est important de maintenir les animaux dans une position brouette à près de 90 ° pour des résultats cohérents. Ce test est facile à administrer et donne un aperçu au-delà d&#39;autres tests de comportement en fournissant des informations sur la rémunération et le déficit avec une tâche simple. t &quot;&gt; rats mangent facilement pâtes sèches après la formation en face de la caméra. Par conséquent, le traitement des pâtes est un test relativement facile à administrer. Dans cette étude, nous enregistrions et utiliser les données pour l&#39;utilisation du membre (gauche, droite ou les deux) et le temps manger des pâtes seulement. Une analyse plus détaillée, y compris des ajustements de patte pendant pâtes alimentaires a été décrit précédemment chez les animaux avec des blessures telles que des lésions ischémiques unilatérales et unilatérale du striatum déplétion en dopamine 20,21,24. Par conséquent, il est possible de développer et d&#39;utiliser un plus . analyse sensible de l&#39;essai pâtes de manger après CSCI Nous comprenait la position de la patte sur la feuille de pointage, comme ce peut révéler l&#39;impartialité ou la capacité de chaque main En outre, nous prenons note de la poignée de chaque patte;. certains animaux se reposent de leur patte sur un côté de les pâtes, utiliser éventuellement comme un support, plutôt que de saisir la pâte lors de la consommation. Si les animaux sont réticents à manger des pâtes, une étape de la privation de nourriture peut être introduit dans le protocole avant le test.

Col de l&#39;utérus blessures de la moelle épinière (CSCI) est la forme la plus répandue de la SCI chez les patients, ce qui représente environ 62% de tous les SIC ( <a href="http://www.spinalcord.uab.edu" target="_blank">http://www.spinalcord.uab.edu</a> ). Les blessures à la moelle épinière cervicale peut entraîner des déficiences dans les membres supérieurs ainsi que la respiration. Une étude récente chez les patients atteints CSCI suggère que la fonction partielle ou totale du bras et / ou de la main est considérée comme une priorité majeure 1. Par conséquent, le développement de modèles CSCI et tests comportementaux associés qui sont faciles, sensible et fiable à utiliser est un objectif important. Il existe plusieurs tests de comportement utiles pour évaluer la fonction des membres antérieurs après CSCI chez les rongeurs 1-17, cependant, beaucoup de ces essais sont difficiles à utiliser et ne nécessitent un équipement spécialisé. des tests de manipulation de pâtes ont été développés par d&#39;autres groupes 18,19, mais ces tests exigent que les animaux filmés dans des cages alimentaires de pâtes spécifiques, ce qui nécessite une longuepériode de formation, alors que la méthode que nous proposons peut être effectuée dans la maison de la cage de l&#39;animal. Tests de pâtes décrites précédemment nécessitent significative le temps d&#39;analyse et souvent des logiciels coûteux, contrairement à l&#39;essai décrit ici. L&#39;objectif de notre méthode est de développer et d&#39;utiliser des tests de comportement qui sont faciles à utiliser, fiables et ne nécessitent pas de matériel coûteux. Plus précisément, l&#39;étape de test-alternance membre antérieur décrit ici permet aux chercheurs d&#39;estimer le volume de la lésion précoce après une blessure, offrant un moyen de créer des groupes de traitement équivalent avant un traitement chronique est administré. Dans cette étude, nous décrivons en détail trois nouveaux tests comportementaux: (1) membre antérieur étape alternance, (2) l&#39;instabilité posturale, et (3) la manipulation de pâtes. Déterminer les tests comportementaux droit d&#39;utiliser peut être difficile. En effet, nous pensons que personne ne test comportemental peut évaluer le fonctionnement des membres antérieurs de manière adéquate. Par conséquent, nous vous conseillons d&#39;utiliser une combinaison de quelques tests comportementaux de culess fonction de membre antérieur après la SCI. Parler catégoriquement, il faut utiliser une tâche plein champ de type locomoteur (par exemple, des membres antérieurs échelle locomotrice, cylindre) où les animaux sont évalués sur l&#39;utilisation de leurs membres antérieurs lors de la locomotion normale, et un test spécifique de la tâche, où les animaux sont invités à effectuer une tâche spécifique impliquant l&#39;utilisation de leur membres antérieurs (par exemple, les pâtes alimentaires, l&#39;instabilité posturale, la force de préhension, etc.) Les tests comportementaux décrits ici en détail sont utiles pour déterminer la gravité des lésions à ~ une semaine après la lésion (membre antérieur étape alternance, l&#39;instabilité posturale, la manipulation de pâtes), les effets d&#39;une lésion unilatérale de la patte avant contralésionnel (membre antérieur étape alternance, l&#39;instabilité posturale ) et le mouvement de la motricité fine des membres antérieurs (manipulation de pâtes). Connaissant la gravité et les effets de la lésion utilisé peut également dicter les tests comportementaux appropriés. Si les mouvements de motricité fine du poignet ne sont pas possibles après lésion, en utilisant un test qui mesure et QUANTIFs l&#39;utilisation des membres antérieurs pattes est inapproprié. Par exemple, la plupart des tests de manipulation de pâtes décrites précédemment regarder plus en profondeur les mouvements individuels de chiffres, cependant, nous avons trouvé avec la gravité et l&#39;emplacement de notre blessure, ce n&#39;était pas pertinent et à la place les différences observées dans le classement général de la branche. Les chercheurs peuvent être tentés de procéder à de nombreux tests de comportement et d&#39;utiliser un échantillon d&#39;entre eux pour la démonstration sur la base des résultats, cependant, il est recommandé que, pour chaque modèle expérimental utilisé une étude pilote est effectuée pour déterminer les tests comportementaux appropriés pour la lésion. Par conséquent, il est important de noter que l&#39;utilisateur doit avoir au moins une certaine connaissance préalable du type de déficit et l&#39;étendue d&#39;un type de lésion particulière avant de décider de tests comportementaux pour être employées. Évaluer la gravité des lésions sur la base de la performance comportementale permet également des groupes de traitement à être créés avec une répartition égale de la gravité des lésions avant traitementment est administré.

<table><tbody><tr><td>Du papier de verre</td><td>3M</td><td>5097</td><td>Du papier de verre 3M Gold Fre-Cut a été utilisé. N’importe quel papier de verre de grain 220 ferait bien </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td> l’affaire<td>. Il est disponible chez Walmart</td></tr></tbody></table>

Évaluation des membres antérieurs fonction après unilatérale du col sci utilisant de nouvelles tâches: membre étape alternance, l&#39;instabilité posturale et pâtes manutention

Assessing Forelimb Function after Unilateral Cervical SCI using Novel Tasks: Limb Step-alternation, Postural Instability and Pasta Handling

Lésions de la moelle épinière cervicale (CSCI) peut provoquer des déficits neurologiques dévastateurs, y compris la dépréciation ou la perte d&#39;un membre supérieur et de la fonction de la main. La majorité des blessures de la moelle épinière chez l&#39;homme se produisent au niveau du col. Par conséquent, le développement de modèles de lésions cervicales et le développement de tests comportementaux pertinents et sensibles est d&#39;une grande importance. Nous décrivons ici l&#39;utilisation d&#39;un membre antérieur nouveau test étape alternance après une blessure de la moelle épinière cervicale chez les rats. En outre, nous décrivons deux tests comportementaux qui n&#39;ont pas été utilisés après une blessure de la moelle épinière: un test de l&#39;instabilité posturale (PIT), et un essai de pâtes manipulation. Tous les trois tests comportementaux sont très sensibles aux blessures et sont faciles à utiliser. Par conséquent, nous pensons que ces tests comportementaux peuvent jouer un rôle dans les enquêtes sur les stratégies thérapeutiques après CSCI.

Nous recommandons que les animaux soient testés régulièrement tout au long de l&#39;expérience dans une expérience mesures de type répétée pour une meilleure analyse et d&#39;analyser l&#39;amélioration au fil du temps. Forelimb essai Step-alternance Ce test est conçu pour déterminer la capacité d&#39;un animal à alterner l&#39;utilisation de ses pattes avant. Utilisation de l&#39;étape de test-alternance des membres antérieurs, seulement 50% des animaux ont pu alterner l&#39;utilisation de leurs membres antérieurs après CSCI 19 à 12-16 semaines après la blessure (figure 1A). Suivant nous avons introduit un retard (5 sec) en maintenant l&#39;arrêt des animaux après la première étape avant de passer l&#39;animal avant pour la deuxième étape. Seulement 50% des animaux qui ont été l&#39;utilisation alternée de leurs branches (25% du groupe de lésion totale) ont été en mesure d&#39;alterner après un délai de 5 secondes (Figure 1B). Nous avons corrélé ces résultats avec les études anatomiques et l&#39;analyse a révélé que les alternateurs ont significantly plus grande surface de faisceau cortico-spinal épargné [F (1,1) = 5,56, p &lt;0,05] et la colonne dorsale [F (1,1) = 19,2, p &lt;0,003] sur le côté contralésionnel 19. Ces données indiquent que le test de l&#39;alternance de pas de patte avant peut prévoir la gravité de la lésion, ainsi que unilatéralité des lésions. Ce test peut entraîner des données catégorique nominale qui devrait être analysée par une analyse des mesures répétées. Dans cet exemple, il n&#39;a pas été répétée une mesure, on a utilisé un point de temps pour illustrer la différence entre les groupes. Chaque animal sera classé comme un &quot;alternateur&quot; ou un &quot;non-alternateur&quot;, séparant les animaux en deux groupes de blessures modérées (vs grave, respectivement). Postural test d&#39;instabilité Lésions unilatérales de la moelle épinière peuvent provoquer des changements non seulement à la branche facultés et / ou affectées, mais aussi à la branche non-altérée. Le test de l&#39;instabilité posturale (PIT) était auparavant described et utilisée chez les animaux avec un modèle de rongeur de la maladie de Parkinson et 18 dans un modèle de rongeur de CsCl 19. Nous avons utilisé PIT après CSCI et constaté qu&#39;il y avait un effet significatif de l&#39;état de la lésion [F (1,1) = 8.17, p &lt;0,01]. En outre, le déplacement des membres antérieurs (à distance pour reprendre le centre de gravité) a été significativement plus importante dans le côté ipsilésionnelle (patte antérieure droite) des animaux blessés par rapport à des animaux ayant subi une chirurgie fictive (6,00 ± 0,24 cm contre 8,00 ± 0,10 cm, p &lt;0,0001; Figure 2 ). La distance de déplacement sur ​​la patte antérieure contralésionnel était significativement plus faible chez les animaux lésés par rapport aux animaux opérés de manière fictive (6,00 ± 0,25 cm pour imposture contre 4,00 ± 0,10 cm pour CSCI, p &lt;0,0001; Figure 2). Ce résultat indique que des membres antérieurs contralésionnel également entraîné des changements en raison de la lésion sur le côté opposé (exemple, des changements dans l&#39;ajustement postural par les foreli contralésionnelmb pour regagner le centre de gravité). Les données de cet essai seront quantitatifs et doivent être analysés en utilisant une analyse de variance à mesures répétées pour examiner les changements dans les groupes tout au long de l&#39;expérience. Pâtes Manipulation test manipulation de pâtes a été conçu pour tester l&#39;utilisation habile des membres antérieurs tout en mangeant un morceau de pâte sèche. Un test similaire a déjà été utilisé pour détecter les déficits dans l&#39;utilisation habile des pattes antérieures dans des modèles animaux d&#39;AVC unilatéral et la maladie de Parkinson 20,21 et après CSCI 19. A des moments chroniques après une blessure (12 semaines après la lésion), tous les animaux sham ont mangé des pâtes en utilisant deux pattes au cours de la période d&#39;essai. Dans le groupe à lésion, nous avons constaté que la durée globale de manger un morceau de pâte est similaire au groupe témoin (Figure 3). Cependant, plus alternateurs (entorse bénigne; 10 sur 15) ont pu utiliser leur patte avant ipsilésionnelle par rapport aux non-alternateurs (gravement blessé groupe; 1 sur 7; <strong&gt; Figure 3). Le test de maniement de pâtes fournit des données qui est à la fois continue et quantitative (temps de manger des pâtes), et catégorique (utilisation de la patte) et doivent être analysés de manière appropriée. <img alt="Figure 1" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50955/50955fig1highres.jpg" /> Figure 1. Évaluation chronique de la fonction des membres antérieurs en utilisant le test étape alternance des membres antérieurs a révélé deux groupes différents d&#39;animaux avec différents gravité de la lésion. Animaux ont montré une différence de comportement pendant l&#39;avance pas à pas avec les deux pattes. Seulement 50% des animaux lésés alterné pattes tout en renforçant (alternateurs; rats 5 sur 10 lésés), tandis que les autres ont montré un manque d&#39;étape alternance en prenant deux étapes contralésionnel dans une rangée (non-alternateurs; 5 sur 10 lésé rats). Plus d&#39;animaux affichés cette tendance à prendre plusieurs mesures contralésionnel si un retard de 5 secondes a été introduit entre steps (8 sur 10 rats lésés). <img alt="Figure 2" fo:content-width="4.6in" src="/files/ftp_upload/50955/50955fig2highres.jpg" /> .. Figure 2 chronique des membres antérieurs évaluation comportementale à l&#39;aide du test de l&#39;instabilité posturale (PIT) Comme prévu, le membre antérieur ipsilésionnelle chez les animaux avec col blessures de la moelle épinière (CSCI) avait significativement plus grande distance de déplacement que les animaux ayant subi une chirurgie de feinte (6 cm contre 8 cm; * p &lt;0,0001). En outre, la distance de déplacement sur ​​la patte antérieure contralésionnel était significativement plus petite chez les animaux lésés en comparaison aux animaux subi une opération fictive (6 cm par rapport à 4 cm, * p &lt;0,0001). Cela peut suggérer fonction améliorée de la branche contralésionnel pendant PIT chez les animaux lésés. <img alt="Figure 3" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50955/50955fig3highres.jpg" /> <strong&gt; Figure 3. évaluation des membres antérieurs en utilisant le traitement de pâtes et de manger test a montré des déficiences importantes dans les non-alternateurs lésés. Les animaux ont reçu un morceau norme de pâtes. utilisation de patte et le temps de manger des pâtes ont été enregistrées. Les résultats indiquent qu&#39;un faible nombre d&#39;alternateurs (33%) utilisé exclusivement leur patte avant contralésionnel (indiquant déficience plus sévère) par rapport aux non-alternateurs (86%). En outre, les animaux dans les trois groupes (simulacre, alternateurs lésé, et non lésé alternateurs) ont une durée similaire à manger les pâtes (p &lt;0,05). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50955/50955fig3large.jpg" target="_blank">Cliquez ici pour agrandir la figure</a> .

Trois nouveaux tests comportementaux (membre antérieur étape alternance, test de l&#39;instabilité posturale, essai de manipulation de pâtes) pour évaluer la fonction des membres antérieurs après une blessure de la moelle épinière cervicale chez les rongeurs sont décrits.

Évaluation des membres antérieurs Fonction après unilatérale du col SCI utilisant de nouvelles tâches: Membre étape alternance, l&#39;instabilité posturale et pâtes manutention

Cervical spinal cord injury (cSCI) can cause devastating neurological deficits, including impairment or loss of upper limb and hand function. A majority ...

L'objectif général de cette procédure est d'évaluer les déficits fonctionnels et la récupération après une lésion médullaire cervicale. Cela est réalisé en formant d'abord les animaux à s'habituer à la manipulation et à l'environnement de test. Ensuite, on évalue chez les rats leur capacité à alterner les pas des membres.Ensuite, les animaux sont testés pour leur capacité à réagir aux changements du centre de gravité et à ajuster leur posture de manière appropriée. Enfin, la fonction des quatre pattes et des quatre membres est analysée lors d'une tâche de manipulation motrice fine, qui consiste pour les animaux à manger des pâtes. En définitive, des résultats peuvent être obtenus, mettant en évidence des différences de déficit après une lésion médullaire cervicale, ce qui permet de regrouper les animaux selon leurs déficits fonctionnels corrélés à leurs différences anatomiques.L'avantage principal des méthodes décrites ici par rapport aux autres méthodes existantes, telles que l'analyse de l'empreinte des pas, est qu'elles sont beaucoup plus simples à utiliser et ne nécessitent pas d'équipement ni de logiciel coûteux. Ces méthodes permettent d'évaluer la récupération fonctionnelle après une lésion de la moelle épinière, mais elles peuvent également être utilisées pour d'autres modèles de maladies, comme la maladie de Parkinson, l'accident vasculaire cérébral ou d'autres troubles neurologiques entraînant un déficit moteur. Les animaux utilisés dans cette étude auront subi une lésion latérale de la moelle épinière au niveau C3-C4 deux à trois semaines avant la chirurgie. Habituez les animaux à la manipulation ainsi qu'au milieu de test, recouvert de papier de verre afin d'éviter tout glissement, appui ou traînement des quatre membres.Le test d'alternance des quatre membres détermine si l'animal utilise ses membres antérieurs. Ce test peut être effectué quotidiennement avant de commencer. Assurez-vous que l'animal a cessé de se débattre et que ses muscles sont détendus. Ensuite, maintenez l'animal sur une table en position portant uniquement sur les membres antérieurs, ou en position de brouette, avec son corps presque à 90 degrés par rapport à la table. Une fois que l'animal semble détendu dans vos mains, poussez-le vers l'avant afin qu'il avance le long de la surface de la table.Déterminez et enregistrez si le rat alterne l'utilisation de ses membres antérieurs lorsqu'il se déplace sur la surface. Répétez ce test au moins deux fois en tenant l'animal d'une main, puis deux fois en le tenant de l'autre main.Si le rat démontre avec succès l'alternance des pas, effectuez à nouveau le test en introduisant une attente de cinq secondes après le premier pas afin de déterminer si le modèle d'alternance persiste après un délai. Notez les résultats et consignez-les sur la feuille de notation. Le test de l'instabilité posturale évalue la distance nécessaire pour que l'animal effectue un pas avec le membre antérieur afin de retrouver son équilibre.De façon similaire au test d'alternance, l'animal doit relâcher la tension dans ses muscles avant de commencer, sur une table recouverte de papier de verre. Placez l'animal en position de brouette, avec le corps formant un angle proche de 90 degrés par rapport à la table, maintenez légèrement un des quatre membres contre le tronc de l'animal et alignez son museau avec la ligne zéro, vue d'en haut. Ensuite, déplacez le rat vers l'avant. Cela déplacera le centre de gravité de l'animal et le stimulera à faire un pas pour retrouver son équilibre.Déterminez la nouvelle position du nez après que le rat a fait deux pas, puis utilisez la moyenne de ces deux pas comme distance nécessaire pour déclencher un pas. Enregistrez les résultats sur la feuille de notation du test d'instabilité posturale fournie dans le protocole écrit. Testez chaque membre cinq fois.Le test de manipulation des pâtes mesurera le temps nécessaire pour manger un morceau standard de pâtes ainsi que la préférence de patte durant chaque session. Une à deux semaines avant la chirurgie, donnez au rat cinq à six morceaux de spaghettis fins mesurant 4,0 centimètres chaque jour dans sa cage d'habitation afin de le préparer aux mesures de base. Ensuite, placez le rat dans une chambre de test et disposez des morceaux de pâtes à l'avant de la chambre, là où l'utilisation de ses membres antérieurs peut être facilement observée. Puis enregistrez le temps nécessaire pour manger chaque morceau de pâtes.Laissez l'animal manger au moins trois morceaux par séance. Si l'animal fait une pause pendant la prise alimentaire, interrompez le chronométrage. Recommencez le chronométrage lorsque l'animal reprend la consommation alimentaire.Une fois que le rat a montré un temps de consommation de pâtes constant pendant au moins trois jours durant l'entraînement, l'animal est prêt pour l'enregistrement de la ligne de base afin de recueillir des données : placez des morceaux de pâtes sur le sol près de l'avant de la chambre en utilisant la fiche d'évaluation de la manipulation des pâtes fournie dans le protocole écrit ; enregistrez le temps que met le rat à manger un morceau de pâtes, quels membres antérieurs ont été utilisés et les positions des membres antérieurs comme indiqué ici. En utilisant le test d'alternance des pas des membres antérieurs. Après une lésion médullaire chirurgicale, seulement 50 % des animaux ont été capables d'alterner l'utilisation de leurs membres antérieurs et 50 % des alternateurs réussis ont pu alterner l'utilisation de leurs membres après un délai de cinq secondes.La corrélation des résultats avec des études anatomiques a révélé que les alternateurs présentent une zone significativement plus importante de tractus corticospinal et de colonne dorsale préservée du côté controlésionnel, indiquant que le test d'alternance des pas des membres peut prédire la gravité de la lésion ainsi que son caractère unilatéral. L'utilisation de ce test permettra de séparer les groupes selon la gravité de la lésion. Par exemple, les mesures sur l'échelle de locomotion des quatre membres peuvent être différenciées selon la gravité de la lésion afin d'obtenir des résultats plus clairs.Ici, les données recueillies lors du test d'instabilité posturale montrent des modifications des membres homolatéraux, lésés et controlésés après une lésion de la moelle épinière. Des lésions unilatérales de la moelle épinière peuvent entraîner des changements non seulement au niveau du membre atteint ou déficient, mais également du membre non atteint. L'utilisation du test d'instabilité posturale après une lésion cervicale de la moelle épinière a révélé un effet significatif lié à l'état de la lésion.En outre, le déplacement du membre était significativement plus long du côté lésé ipsilatéral chez les animaux blessés par rapport aux animaux ayant subi une chirurgie factice. Alors que la distance de déplacement du membre controlésé était beaucoup plus courte comparée à celle des animaux témoins, comme le montre cette figure à des temps chroniques après la lésion, les animaux témoins et ceux du groupe lésé ont mis des durées similaires pour manger des pâtes. Cependant, bien que les animaux témoins et les animaux lésés qui alternaient utilisaient les deux pattes pour manger des pâtes pendant la période de test, un pourcentage moindre de non-alternateurs gravement blessés a pu utiliser leurs membres antérieurs ipsilatéraux lésés pour manger des pâtes.Ces tests peuvent être réalisés en moins de cinq minutes par rat s'ils sont effectués correctement. Les tests comportementaux décrits ici peuvent être utilisés en combinaison avec d'autres tests comportementaux existants, tels que les tests de préférence de patte dans un cylindre ou les tests d'échelle locomotrice des membres, afin d'évaluer complètement la fonction des membres ipsilésionnels ainsi que controlatéraux après une lésion médullaire cervicale.

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