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DOI: 10.3791/50955-v
Zin Z. Khaing*1, Sydney A. Geissler*1, Timothy Schallert2, Christine E. Schmidt1,3
1Department of Biomedical Engineering,The University of Texas at Austin, 2Department of Psychology,The University of Texas at Austin, 3The J. Crayton Pruitt Family Department of Biomedical Engineering,University of Florida
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Trois nouveaux tests comportementaux (membre antérieur étape alternance, test de l'instabilité posturale, essai de manipulation de pâtes) pour évaluer la fonction des membres antérieurs après une blessure de la moelle épinière cervicale chez les rongeurs sont décrits.
L’objectif global de cette procédure est d’évaluer les déficits fonctionnels et la récupération après une lésion de la moelle épinière cervicale. Pour ce faire, les animaux doivent d’abord être entraînés à se sentir à l’aise pendant la manipulation et dans l’environnement d’essai. Ensuite, les rats sont évalués pour leur capacité à alterner pour le pas des membres.
Ensuite, les animaux sont testés pour leur capacité à réagir aux changements de centre de gravité et à ajuster leur posture en conséquence. Enfin, la fonction des quatre pattes et des quatre membres est analysée lors d’une tâche de manipulation de la motricité fine, qui oblige les animaux à manger des pâtes. En fin de compte, on peut obtenir des résultats qui montrent des différences de déficit après une lésion de la moelle épinière cervicale, ce qui permet de regrouper les animaux en fonction de leurs déficits fonctionnels en corrélation avec leurs différences anatomiques.
Le principal avantage des méthodes décrites ici par rapport aux autres méthodes existantes, telles que l’analyse des portes d’empreinte, est qu’elles sont beaucoup plus simples à utiliser et qu’elles ne nécessitent pas d’équipement ou de logiciel coûteux. Ces méthodes fournissent des informations sur la récupération fonctionnelle après une lésion de la moelle épinière, mais elles peuvent également être utilisées pour d’autres modèles de maladies tels que la maladie de Parkinson, les accidents vasculaires cérébraux ou d’autres troubles neurologiques qui provoquent un déficit moteur. Les animaux utilisés dans cette étude auront une lésion latérale de la moelle épinière C3 C quatre deux à trois semaines avant la chirurgie. Acclimatez les animaux à la manipulation et à l’environnement d’essai recouvert de papier de verre pour éviter de glisser, de s’appuyer ou de traîner les quatre membres.
Le test d’alternance en quatre membres détermine si l’animal donne tous l’usage de ses membres antérieurs, et ce test peut être effectué quotidiennement avant de commencer, s’assurer que l’animal cesse de se débattre et que ses muscles sont détendus. Ensuite, tenez l’animal sur une table en position de mise en charge des membres antérieurs uniquement ou en position de brouette avec son corps à près de 90 degrés par rapport à la table. Une fois que l’animal semble détendu dans vos mains, poussez-le vers l’avant pour qu’il se déplace le long de la surface de la table.
Déterminez et notez si le rat alterne l’utilisation des membres antérieurs lorsqu’il se déplace sur la surface. Répétez ce test au moins deux fois en tenant l’animal d’une main, puis deux fois en le tenant. De l’autre.
Si le rat a réussi à démontrer l’alternance de pas, effectuez de nouveau le test en introduisant une attente de cinq secondes après le premier pas pour déterminer si le schéma d’alternance persiste après un délai. Notez les résultats et notez-les dans la feuille de score. Le test d’instabilité posturale examine la distance qu’il faut à l’animal pour faire un pas avec le membre antérieur afin de retrouver son équilibre.
Comme pour le test d’alternance, l’animal doit relâcher la tension dans ses muscles avant de commencer à l’aide d’une table recouverte de papier de verre, permettre à l’animal d’adopter la position de la brouette avec son corps à un angle de près de 90 degrés par rapport à la table, retenir légèrement un de ses quatre membres contre le torse de l’animal et aligner son nez avec la ligne zéro vue d’en haut. Ensuite, déplacez le rat vers l’avant. Cela déplacera le centre de gravité de l’animal et le stimulera à marcher pour retrouver son équilibre.
Déterminez deux fois la nouvelle position du nez après les pas du rat et utilisez la moyenne de ces deux pas comme distance nécessaire pour déclencher un pas. Enregistrez les résultats sur la feuille de score du test d’instabilité posturale fournie dans le protocole textuel. Testez chaque membre cinq fois.
Le test de manipulation des pâtes mesurera le temps nécessaire pour manger un morceau de pâtes standard et la préférence de la patte au cours de chaque séance, une à deux semaines avant l’opération, donnez au rat cinq à six morceaux de 4,0 brins de spaghettis minces chaque jour dans sa cage domestique pour le préparer aux mesures de base. Ensuite, placez le rat dans une chambre d’essai et placez des morceaux de pâtes près de l’avant de la chambre où l’utilisation de ses membres peut être facilement observée. Notez ensuite le temps qu’il faut pour manger chaque morceau de pâte.
Laissez l’animal manger au moins trois morceaux par séance. Si l’animal s’arrête pendant qu’il mange, interrompez le chronométrage. Redémarrez également le chronométrage lorsque l’animal recommence à manger.
Une fois que le rat a montré un temps de consommation de pâtes constant pendant au moins trois jours pendant l’entraînement, l’animal est prêt pour l’enregistrement de base afin de recueillir des données, placez des morceaux de pâtes sur le sol près de l’avant de la chambre à l’aide de la feuille de pointage de manipulation des pâtes fournie dans le protocole textuel enregistrer le temps que le rat met à manger un morceau de pâtes, qui pour les membres ont été utilisés et les positions des membres comme indiqué ici. Utilisation du test d’alternance de pas des membres antérieurs. Après une lésion chirurgicale de la moelle épinière, seulement 50 % des animaux ont été capables d’alterner l’utilisation de leurs membres antérieurs et 50 % des alternateurs réussis ont pu alterner l’utilisation de leurs membres après un délai de cinq secondes.
En corrélant les résultats avec les études anatomiques, les alternateurs ont une surface significativement plus élevée de tractus rachidien cortical épargné et de colonne dorsale du côté lésionnel contr, ce qui indique que le test d’alternance de pas de membre peut prédire la gravité de la lésion ainsi que l’unilatéralité des lésions. L’utilisation de ce test permettra de séparer les groupes en fonction de la gravité de la lésion. Par exemple, quatre mesures de l’échelle locomotrice des membres peuvent être séparées en fonction de la gravité des lésions pour des résultats plus clairs.
Ici, les données recueillies à partir du test d’instabilité posturale montrent des changements dans les membres ips, lésionnels et contralésionnels après une lésion de la moelle épinière. Les lésions unilatérales de la moelle épinière peuvent provoquer des changements non seulement chez le membre atteint et/ou affecté, mais aussi chez le membre non atteint. L’utilisation du test d’instabilité posturale après une lésion de la moelle épinière cervicale a démontré qu’il y avait un effet significatif de l’état de la lésion.
De plus, le déplacement des membres était significativement plus long du côté lésionnel IPS des animaux blessés par rapport aux animaux ayant subi une chirurgie simulée. Bien que la distance de déplacement sur la lésion contralière pour le membre était beaucoup plus courte que celle des animaux fictifs, comme le montre cette figure, à des moments chroniques après une blessure, les animaux simulés et ceux du groupe lésé ont pris le même temps pour manger des pâtes. Cependant, alors que les animaux factices, et les alternants lésés ont mangé des pâtes en utilisant leurs deux pattes pendant la période d’essai, un pourcentage plus faible de non-alternateurs gravement blessés ont pu utiliser leurs membres antérieurs lésionnels pour manger des pâtes.
Ces tests peuvent être effectués en moins de cinq minutes par rat s’ils sont effectués correctement. Les tests comportementaux décrits ici peuvent être utilisés en combinaison avec d’autres tests comportementaux existants, tels que les tests de préférence de patte de défaut de pied, et pour les tests d’échelle de locomotive de membre afin d’évaluer pleinement la lésion Ipsy de l’animal, ainsi que la lésion contralière pour la fonction des membres après une lésion de la moelle épinière cervicale.
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