Imagerie en temps réel de l'unité d'ingénierie des ARN transcrits dans des cellules vivantes utilisant Ratiométrique bimoléculaires Beacons

L’objectif global de cette procédure est d’imager en temps réel des transcrits d’ARN uniques dans des cellules vivantes. Ceci est accompli en hybridant d’abord deux oligonucléotides qui ont été conçus pour former une sonde formant une épingle à cheveux connue sous le nom de métrique de rapport par balise moléculaire. La deuxième étape consiste à purifier le rapport métrique par des balises moléculaires par chromatographie d’exclusion stérique.

Ensuite, la métrique de rapport par des balises moléculaires est introduite dans des cellules exprimant la cible d’ARN modifiée via micro porion. La dernière étape consiste à voir les cellules dans une plaque à micropuits adaptée à la microscopie à cellules vivantes. En fin de compte, la microscopie à fluorescence est utilisée pour surveiller les mouvements des transcrits d’ARN individuels visualisés sous forme de points fluorescents brillants dans des cellules uniques.