Contraste dynamique amélioré imagerie par résonance magnétique d'un modèle orthotopique cancer du pancréas de souris

L’objectif global de cette procédure est d’appliquer l’imagerie par résonance magnétique améliorée par contraste dynamique ou D-C-E-M-R-I aux xénogreffes de tumeurs pancréatiques orthotopiques chez la souris. Pour ce faire, il suffit d’abord de retirer le pancréas de l’abdomen, puis d’injecter lentement des cellules cancéreuses du pancréas humaines dans la queue du pancréas. Le pancréas est ensuite retourné à l’abdomen, et lorsque la tumeur a un diamètre de cinq à sept millimètres, une planche en plastique et une bobine de surface sont placées sur la masse tissulaire humas.

En fin de compte, le microvasculaire de la xénogreffe tumorale peut être visualisé par D-C-E-M-R-I. Le principal avantage de cette technique par rapport à la méthode conventionnelle comme D-C-M-R-I, de xénogreffe de tumeur sous-cutanée, est que les modèles de tumeurs pancréatiques orthotopiques permettent l’évaluation du microenvironnement tumoral primaire, y compris la néovascularisation, l’approvisionnement en sang et l’invasion des cellules tumorales. La procédure sera démontrée par Sharon Samuel, associée de recherche, et Marie Warren, une technicienne de recherche, toutes deux de notre laboratoire.

Commencez par placer une souris de mer à valve à dérapage féminine anesthésiée de huit semaines sur un coussin chauffant après avoir confirmé le niveau approprié de sédation par pincement des orteils. Ensuite, retirez les poils du quadrant supérieur gauche de l’abdomen de l’animal et administrez un médicament analgésique dans la peau à l’aide de ciseaux droits de l’iris. Faites une incision d’un centimètre dans la peau et le péritoine et soulevez doucement le pancréas à travers l’incision.

Ensuite, utilisez une seringue à insuline de 0,5 millilitre, équipée d’une aiguille de calibre 28 pour infuser lentement 2,5 millions de cellules cancéreuses du pancréas humain dans 30 microlitres de DMEM dans la queue du pancréas. Confirmez qu’une petite bulle est créée dans la tête du pancréas par la solution. Ensuite, replacez doucement le pancréas dans l’abdomen et fermez le péritoine de la peau en une seule couche avec deux sutures interrompues de cinq sutures de proline zéro.

Vérifiez quotidiennement la taille de la tumeur avec une palpation à deux doigts de la zone chirurgicale. Les tumeurs sont généralement plus denses et plus bosselées que les tissus et organes environnants. Surveillez également les animaux quotidiennement pour détecter tout signe de maladie.

Lorsque la tumeur atteint cinq à sept millimètres de diamètre, insérez une aiguille pointue de calibre 30 à une extrémité d’un tube en micro-polyéthylène et une pointe d’aiguille émoussée de calibre 30 dans l’autre. Connectez une seringue d’un millilitre contenant un agent de contraste IRM fraîchement préparé à la pointe de l’aiguille émoussée et appuyez lentement sur le piston pour remplir tout le tube. Ensuite, dilatez les veines de la queue de l’animal sous une lampe chauffante et utilisez une pince Kelly pour saisir la tige de l’aiguille pointue de calibre 30.

Insérez soigneusement l’aiguille dans l’une des veines dilatées de la queue et collez la queue et le tube sur un morceau de plastique de 10 x 100 millimètres pour maintenir la queue droite. Ensuite, placez la souris en décubitus dorsal dans un lit d’animal équipé d’eau chaude en circulation pour réguler la température corporelle de l’animal pendant l’imagerie. Insérez également une sonde de température rectale à ce moment-là.

Lorsque l’animal est en position, appliquez une planche en plastique pliée orthogonalement dans la région abdominale, en vous assurant que la tumeur est située derrière l’extrémité supérieure de la planche, puis tirez la planche vers le bas d’environ deux millimètres pour vous assurer que la tumeur est fermement attrapée. Ensuite, collez un transducteur de coussin respiratoire sur la région de la poitrine pour surveiller la respiration de l’animal pendant l’imagerie. Placez maintenant la bobine de surface sur le dessus de la région tumorale, en la collant solidement au lit de l’animal.

Poussez ensuite le lit d’animal dans le scanner IRM jusqu’à ce que la région tumorale soit au centre de la bobine de volume. Appliquez l’IRM pondérée T deux pour localiser la tumeur, suivie d’une IRM pondérée T un avec différents angles de retournement pour la cartographie T un. Ensuite, pour l’imagerie D-C-E-M-R-I, appliquez l’IRM pondérée T un avec un angle de retournement fixe en continu avant, pendant et après l’injection du contraste IRM à base de gadolinium.

Surveillez en permanence la respiration et la température corporelle de l’animal pendant l’imagerie à la fin de l’imagerie, retirez l’aiguille et les autres sondes et placez l’animal sous une lampe chauffante tout en massant doucement la partie inférieure de l’abdomen. Jusqu’à ce que l’animal se réveille quantitatif. D-C-E-M-R-I peut être appliqué avec succès pour les xénogreffes de tumeurs pancréatiques orthotopiques.

En utilisant le modèle de région de référence, par exemple, ces cartes de contraste montrent la région tumorale dans l’échelle de couleurs une minute avant l’injection de l’IRM. Agent de contraste. Et à cinq et 40 minutes après se superposait avec T deux images IRM de poids en échelle de gris. La souris de cette expérience portait une xénogreffe orthotopique de tumeur pancréatique humaine.

La moyenne de ces courbes d’amélioration du contraste a été calculée à partir de la région tumorale et de la région des muscles paravertébraux. Ces cartes kts et KEP pour la tumeur démontrent le taux de lavage et de lavage de l’agent Mr.Contrast Lors de la tentative de cette procédure TCMI, il est important de s’assurer que la tumeur est située derrière l’extrémité supérieure de la carte.