Un modèle murin unique pour l’évaluation quantitative de la formation de biofilm sur les implants chirurgicaux dans l’abcès sous-cutané

Nos recherches visent à développer un traitement innovant pour les infections liées aux implants. Pour évaluer de nouveaux biomatériaux ayant des propriétés antimicrobiennes potentielles, nous développons une approche de test in vivo plus précieuse. Les modèles animaux antérieurs se limitent généralement à produire une seule infection liée à l’implant par animal, ce qui peut entraîner une variabilité significative des résultats moyens obtenus à partir de plusieurs animaux.

Notre modèle murin permet une comparaison directe des deux empreintes, soumises à des conditions infectieuses identiques au sein d’un même animal, fournissant ainsi une évaluation précieuse de l’activité antibactérienne. Notre méthodologie expérimentale in vivo accélérera la recherche sur des biomatériaux potentiellement antimicrobiens, contribuant ainsi au développement d’un nouveau traitement pour les infections liées aux implants à l’avenir. Notre approche expérimentale est reproductible avec un équipement standard et des procédures simples dans un cadre de recherche conventionnel, améliorant ainsi la compréhension des mécanismes à l’origine de l’activité antibactérienne.

Pour commencer, positionnez la souris anesthésiée sur le lit chirurgical. Remplissez une seringue de 10 millilitres d’air stérile et fixez une aiguille de calibre 27 à la sortie. Maintenant, pincez et élevez doucement la base du cou de la souris pour créer un espace entre le tissu sous-cutané et le fascia.

Placez l’aiguille dans la ligne médiane entre les omoplates de la souris et injectez trois millilitres d’air stérile par voie sous-cutanée pour créer la poche d’air. Remettez ensuite la souris dans une cage chauffée avec un tampon thermique. Injectez trois millilitres d’air stérile tous les deux jours pour maintenir le gonflage de la cavité et créer une poche mature.

Après avoir anesthésié l’animal, injectez-lui de la bupivacaïne par voie sous-cutanée. Faites une incision longitudinale médiane de trois millimètres en haut du sac et insérez une aiguille de calibre 18 contenant les fils connectés dans le sac à travers le trou. Poussez les fils à l’aide d’une seringue intérieure d’une aiguille spinale de calibre 25.

En laissant la pointe de l’aiguille de calibre 18 à l’intérieur du sachet, retirez délicatement le cylindre intérieur et injectez soigneusement la culture Xen36 à l’aide de la seringue. Retirez toutes les aiguilles, fermez la peau à l’aide d’une pince à plaie et scellez-la avec un adhésif cutané topique. Enfin, remettez la souris dans une cage chauffée avec un tampon thermique pour la surveillance.

La coloration violette cristalline a montré une formation constante de biofilm sur les deux fils sans différences observables. Les mesures d’absorbance du dosage du violet à cristaux dissous n’ont montré aucune différence statistiquement significative dans la charge bactérienne entre les deux fils. Le comptage d’unités formant des colonies et l’analyse quantitative par PCR de l’ARN ribosomique 16s et des gènes LuxA n’ont montré aucune différence statistiquement significative dans la charge bactérienne entre les deux fils.