Name: À Ovo Xénogreffe de cellules de leucémie aiguë lymphoblastique (LAL) dérivées de patients (PDX-LAL) (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-01T14:10:00.000+00:00
Duration: 6 min 48 s
Description: Découvrez la xénogreffe in ovo de cellules de leucémie aiguë lymphoblastique dérivées de patients pour la recherche en cancérologie. Cette méthode rapide permet le criblage préclinique de médicaments et l'étude de la progression tumorale.

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<ol><li>Folkman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+is+the+evidence+that+tumors+are+angiogenesis+dependent%5BTitle%5D)+AND+%22J+Natl+Cancer+Inst%22%5BJournal%5D)">What is the evidence that tumors are angiogenesis dependent.</a> J Natl Cancer Inst. 82 (1), 4-6 (1990).</li>
<li>Hagedorn, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accessing+key+steps+of+human+tumor+progression+in+vivo+by+using+an+avian+embryo+model%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Accessing key steps of human tumor progression in vivo by using an avian embryo model.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 102 (5), 1643-1648 (2005).</li>
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<li>Oriol, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Outcome+after+relapse+of+acute+lymphoblastic+leukemia+in+adult+patients+included+in+four+consecutive+risk-adapted+trials+by+the+PETHEMA+Study+Group%5BTitle%5D)+AND+%22Haematologica%22%5BJournal%5D)">Outcome after relapse of acute lymphoblastic leukemia in adult patients included in four consecutive risk-adapted trials by the PETHEMA Study Group.</a> Haematologica. 95 (4), 589-596 (2010).</li>
<li>Xin, Q., Chen, Z., Wei, W., Wu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+acute+lymphoblastic+leukemia%3A+Recapitulating+the+human+disease+to+evaluate+drug+efficacy+and+discover+therapeutic+targets%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Animal models of acute lymphoblastic leukemia: Recapitulating the human disease to evaluate drug efficacy and discover therapeutic targets.</a> Biochem Pharmacol. 198, 114970(2022).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>Aiguilles de 34 g</td><td>BD Perisafe</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cytomètre en flux Attune NxT</td><td>Thermo Fisher</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Seringue BD Perisafe (32 g)</td><td>BD Perisafe</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Albumine sérique bovine (BSA)</td><td>Millipore Sigma</td><td>N° A9647</td><td></td></tr><tr><td>Milieu de congélation cellulaire</td><td>Gibco, ThermoFisher Scientific</td><td>12648010</td><td></td></tr><tr><td>Centrifugeuse (centrifugeuse Allegra X-22R)</td><td>Beckman Coulter&nbsp ;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gants jetables</td><td>Royal Touch300 Gants d’examen en nitrile</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microscope de dissection</td><td>Leica MZ16FA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Gibco, ThermoFisher Scientific</td><td>11965092</td><td></td></tr><tr><td>DMSO</td><td>Invitrogen, ThermoFisher Scientific</td><td>D12345</td><td></td></tr><tr><td>Couveuse à œufs, Vevitts 120 Incubateur roulant</td><td>Vixest Trading Co.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Alcool éthylique (95 %)</td><td>VWR International</td><td>BDH1158-4LP</td><td></td></tr><tr><td>Sérum fœtal bovin (FBS)</td><td>Gibco, ThermoFisher Scientific</td><td>26140079</td><td></td></tr><tr><td>La solution Ficoll (Ficoll ?? Pâque Plus)</td><td>MilliporeSigma</td><td>Référence : GE17-1440-02</td><td></td></tr><tr><td>Anticorps FITC-CD10</td><td>Santa Cruz Biotech</td><td>sc-46656 FITC</td><td></td></tr><tr><td>Anticorps FITC-CD4</td><td>Santa Cruz Biotech</td><td>SC-19641 FITC</td><td></td></tr><tr><td>Microscope à fluorescence</td><td>Microsystèmes Leica</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Perceuse à main (Dremel3000)</td><td>Bosch</td><td></td><td></td></tr><tr><td>HEK293T&nbsp ;</td><td>ATCC, VA, ÉTATS-UNIS</td><td>CRL-3216</td><td></td></tr><tr><td>Hémocytomètre</td><td>VWR international, Hausser Scientific</td><td>15170-263</td><td></td></tr><tr><td>Sel d’héparine sodique de la muqueuse intestinale porcine</td><td>Millipore Sigma</td><td>N° H3149</td><td></td></tr><tr><td>Tubes à essai héparinés</td><td>BD Vacutainer&nbsp ;</td><td>BD 366480</td><td></td></tr><tr><td>Lipofectamine 3000</td><td>Invitrogen, ThermoFisher Scientific</td><td>L3000008</td><td></td></tr><tr><td>Kit de titrage de lentivirus multiplex (kit de titrage de lentivirus qPCR)</td><td>Abm</td><td>Le LV900</td><td></td></tr><tr><td>NH4Cl (chloride_ d’ammonium</td><td>Millipore Sigma</td><td>N° A9434</td><td></td></tr><tr><td>Microscope inversé Olympus IX71</td><td>Olympe</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anticorps PE-CD19</td><td>Santa Cruz Biotech</td><td>sc-19650 PE</td><td></td></tr><tr><td>Anticorps PE-CD8</td><td>Santa Cruz Biotech</td><td>sc-1177 PE</td><td></td></tr><tr><td>Pénicilline-streptomycine (10 000 U/mL)&nbsp ;</td><td>Gibco, ThermoFisher Scientific</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>Saline tamponnée au phosphate (PBS)</td><td>Sigma</td><td>Réf. P3813</td><td></td></tr><tr><td>Pipettes (volume réglable)</td><td>Eppendorf</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Puromycine</td><td>Gibco, ThermoFisher Scientific</td><td>A1113803</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640</td><td>Gibco, ThermoFisher Scientific</td><td>11875093</td><td></td></tr><tr><td>Ruban adhésif écossais</td><td>3M</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Plaques stériles à 6 puits</td><td>VWR international, Corning</td><td>22250-140</td><td></td></tr><tr><td>Tubes à centrifuger stériles</td><td>Axygen Inc., Corning</td><td>AXYMCT-150-C-S</td><td></td></tr><tr><td>Fioles de culture stériles (75T)</td><td>VWR International</td><td>10062-872</td><td></td></tr><tr><td>Tubes Falcon stériles (15 ml)</td><td>SARSTEDT</td><td>62.554.502</td><td></td></tr><tr><td>Tubes Falcon stériles (50 mL)</td><td>SARSTEDT</td><td>62.547.254</td><td></td></tr><tr><td>Filtre stérile (0,45 & micro ; filtre m)</td><td>VWR International</td><td>76778-974</td><td></td></tr><tr><td>Pinces stériles</td><td>VWR International</td><td>82027-404</td><td></td></tr><tr><td>Lames en verre stérile</td><td>VWR international</td><td>48300-031</td><td></td></tr><tr><td>Pointes de pipette stériles</td><td>VWR International</td><td>76322-136, 76322-134, 76322-154</td><td></td></tr><tr><td>Seringues stériles</td><td>Seringue BD</td><td>309628?</td><td></td></tr><tr><td>Bleu trypan</td><td>Invitrogen, ThermoFisher Scientific</td><td>Réf. T10282</td><td></td></tr></tbody></table>

À ovo xénogreffe de cellules de leucémie aiguë lymphoblastique (lal) dérivées de patients (pdx-lal)

In Ovo Xenografting of Patient-Derived Acute Lymphoblastic Leukemia (ALL) Cells (PDX-ALL)

Pour déterminer si la greffe de cellules LLA humaines dans des embryons de poulet en développement a été couronnée de succès, des lentivirus porteurs de mCherry incapables de réplicationde 2e génération ont été amplifiés et utilisés pour marquer les lignées cellulaires LLA, SEM et MOLT316,17, respectivement. Comme le montre la figure 1A, ~50 % des cellules ALL B- (deux panneaux en haut à gauche) et T- (deux panneaux en hau...

À Ovo Xénogreffe de cellules de leucémie aiguë lymphoblastique (LAL) dérivées de patients (PDX-LAL)

This study introduces a rapid, cost-effective, and efficient method for in ovo xenografting of patient-derived acute lymphoblastic leukemia (ALL) cells, ...

in-ovo-xenografting-patient-derived-acute-lymphoblastic-leukemia-all

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Recherche sur le cancer

Cette vidéo décrit la technique de création d’un modèle de xénogreffe dérivé d’un patient poisson-zèbre. Dans le protocole d’échantillon, nous évaluons l’efficacité des médicaments Gemcitabine et Navitoclax sur le modèle de xénogreffe de tumeur pancréatique.

Xénogreffe dérivée d’un patient de poisson-zèbre (zPDX) : un modèle de cancer

On décrit ici un procédé pour produire une cytokine exogène chez des souris de xénogreffe (PDX) dérivées du patient par injection intrapéritonéale hebdomadaire d'une lignée cellulaire stromale transduit par cytokine. Cette méthode élargit l'utilité de PDX et fournit l'option pour la distribution de cytokines exogènes transitoires ou prolongées dans une multitude de modèles PDX.

Expression de la cytokine exogène dans les xénogreffes dérivées par un patient par injection avec une lignée cellulaire Stromal transduites par une cytokine

Nous exposons un protocole visant à détecter l’expression simultanée des marqueurs de cellules souches de la leucémie sur les cellules de la leucémie myéloïde aiguë primaire par cytométrie en flux. Nous montrons comment quantifier les trois populations de souches et une population de LSC putative augmente le degré de maturation. Nous avons confirmé la présence de ces populations correspondantes patient-dérivés-xénogreffes.

Cytométrie en flux pour estimer la leucémie des cellules souches dans la leucémie myéloïde aiguë primaire et Patient-dérivés-xénogreffes, diagnostic et suivre vers le haut

Ici, nous présentons un protocole pour la préparation et l’administration stéréotaxique de lymphocytes humains allogéniques dans des souris immunodéficientes transportant des tumeurs primaires du cerveau humain orthotopique. Cette étude fournit une preuve de concept pour la faisabilité et l’efficacité antitumorale des immunothérapies cellulaires intrabrain-livré.

Stéréotaxique transfert adoptif de cellules immunitaires cytotoxiques dans des modèles murins de xénogreffes de glioblastome Multiforme Orthotopic homme

Ce protocole décrit des procédures d'optimisation dans un modèle de xénogreffe de tumeur à base de virus à double fluorescence utilisant le poisson zèbre larvaire comme hôtes. Ce modèle hétérogène de xénogreffe imite la composition tissulaire du microenvironnement pancréatique de cancer in vivo et sert d'outil plus précis pour évaluer des réponses de drogue dans les modèles personnalisés de zPDX (xénogreffe patient-dérivé de zèbre).

Modèle de xénogreffe hétérogène dérivé par le patient du cancer du pancréas à l'aide de larves de poisson zèbre comme hôtes pour l'évaluation comparative des médicaments

Nous décrivons une cellule mononucléaire périphérique humaine de sang (PBMC) — modèle humanisé basé de souris de xénogreffe pour la recherche translationnelle d'immuno-oncologie. Ce protocole pourrait servir de ligne directrice générale pour établir et caractériser des modèles similaires pour l'évaluation de la thérapie I-O.

A Human Peripheral Blood Mononuclear Cell (PBMC) Engrafted Humanized Xenograft Model for Translational Immuno-oncology (I-O) Research (A Human Peripheral Blood Mononuclear Cell (PBMC) Engrafted Humanized Xenograft Model for Translational Immuno-oncology (I-O) Research (A-O)

Ici, nous présentons un protocole pour tester l’efficacité des thérapies ciblées sélectionnées basées sur la composition génomique d’une tumeur. Le protocole décrit l’identification et la validation des réarrangements structurels d’ADN, l’engraftment des tumeurs des patients dans les souris et les réponses d’essai aux drogues correspondantes.

Test de thérapies ciblées dans le cancer à l’aide de l’analyse structurale de l’altération de l’ADN et des Xénogreffes dérivées du patient

Ici, nous décrivons un protocole dans lequel un modèle de xénogreffe dérivée d’un patient atteint de leucémie lymphoblastique aiguë est utilisé comme stratégie pour évaluer et surveiller les toxicités associées aux lymphocytes T du récepteur de l’antigène chimérique CD19.

Évaluation des toxicités associées aux lymphocytes T du récepteur de l’antigène chimérique à l’aide d’un modèle murin xénogreffé dérivé d’un patient atteint de leucémie lymphoblastique aiguë

Ce protocole fournit des instructions étape par étape pour la génération et le dépannage de xénogreffes de leucémie lymphoblastique aiguë (LAL) humaine à partir de lignées cellulaires et de matériel de patient frais dans des embryons de poisson-zèbre immunodéprimés transitoirement, ainsi que des directives pour l’évaluation de la réponse médicamenteuse à l’aide de la cytométrie en flux. Le pipeline expérimental peut également être adapté aux tumeurs solides.

Prédiction rapide de la réponse médicamenteuse in vivo à l’aide de greffes de cellules leucémiques dans des embryons de poisson-zèbre

Ce protocole décrit une méthode efficace et non chirurgicale pour l’implantation orthotopique de xénogreffes dérivées de patientes atteintes d’un cancer du sein chez la souris. La technique implique une dissociation enzymatique de la tumeur suivie d’une injection directe dans les coussinets adipeux mammaires, permettant une implantation à haut débit. Une validation complète garantit la fidélité du modèle, ce qui facilite des études rigoureuses sur divers sous-types de cancer du sein.

Dissociation à haut débit et implantation orthotopique de xénogreffes dérivées de patientes atteintes d’un cancer du sein

Ici, une méthode basée sur la cytométrie phosphoflow est décrite pour analyser la signalisation en aval des voies mTORC1, JAK/STAT5 et MAPK dans des cellules de leucémie myéloïde humaine aiguë xénogreffées chez la souris et obtenues à partir d’aspirations de moelle osseuse. Les niveaux de p-STAT5, p-4EBP1, p-RPS6 et p-ERK1/2 sont mesurés simultanément à l’aide d’un cytomètre en flux spectral de nouvelle génération à haute sensibilité.

Cytométrie phosphoflow intracellulaire des xénogreffes dérivées de patients atteints de leucémie myéloïde aiguë

Découvrez la xénogreffe in ovo de cellules de leucémie aiguë lymphoblastique dérivées de patients pour la recherche en cancérologie. Cette méthode rapide permet le criblage préclinique de médicaments et l'étude de la progression tumorale.

À Ovo Xénogreffe de cellules de leucémie aiguë lymphoblastique (LAL) dérivées de patients (PDX-LAL)

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