Name: Progrès dans le profilage métabolique des sphéroïdes de tumeurs cérébrales tridimensionnelles pour le criblage de médicaments (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-09-05T13:40:00.000+00:00
Duration: 6 min 50 s
Description: Découvrez le profilage métabolique de sphéroïdes de gliome 3D utilisant la technologie Seahorse pour évaluer les réponses aux médicaments et les mécanismes de résistance tumorale.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Wu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glioblastoma+multiforme+%28GBM%29%3A+An+overview+of+current+therapies+and+mechanisms+of+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Res%22%5BJournal%5D)">Glioblastoma multiforme (GBM): An overview of current therapies and mechanisms of resistance.</a> Pharmacol Res. 171, 105780(2021).</li>
<li>Crowley, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((85th+annual+report+on+medical+education+in+the+United+States.+Executive+summary%5BTitle%5D)+AND+%22Jama%22%5BJournal%5D)">85th annual report on medical education in the United States. Executive summary.</a> Jama. 254 (12), 1553-1554 (1985).</li>
<li>Zhang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nutritionally+physiological+cell+culture+medium+and+3D+culture+influence+breast+tumor+proteomics+and+anticancer+drug+effectiveness%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Res%22%5BJournal%5D)">Nutritionally physiological cell culture medium and 3D culture influence breast tumor proteomics and anticancer drug effectiveness.</a> Pharmacol Res. 210, 107519(2024).</li>
<li>Edmondson, R., Broglie, J. J., Adcock, A. F., Yang, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+cell+culture+systems+and+their+applications+in+drug+discovery+and+cell-based+biosensors%5BTitle%5D)+AND+%22Assay+Drug+Dev+Technol%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional cell culture systems and their applications in drug discovery and cell-based biosensors.</a> Assay Drug Dev Technol. 12 (4), 207-218 (2014).</li>
<li>Bahl, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growing+desmoplastic+three-dimensional+pancreatic+cancer+spheroids+from+coculture%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Growing desmoplastic three-dimensional pancreatic cancer spheroids from coculture.</a> J Vis Exp. 211, e66625(2024).</li>
<li>Faubert, B., Solmonson, A., Deberardinis, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+reprogramming+and+cancer+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Metabolic reprogramming and cancer progression.</a> Science. 368 (6487), eaaw5473(2020).</li>
<li>Baksh, S. C., Finley, L. W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+diversity+drives+cancer+cell+invasion%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Metabolic diversity drives cancer cell invasion.</a> Nature. 605 (7911), 627-628 (2022).</li>
<li>Yoshida, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+reprogramming%3A+The+emerging+concept+and+associated+therapeutic+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Metabolic reprogramming: The emerging concept and associated therapeutic strategies.</a> J Exp Clin Cancer Res. 34, 111(2015).</li>
<li>Plitzko, B., Loesgen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+oxygen+consumption+rate+%28OCR%29+and+extracellular+acidification+rate+%28ECAR%29+in+culture+cells+for+assessment+of+the+energy+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Bio+Protoc%22%5BJournal%5D)">Measurement of oxygen consumption rate (OCR) and extracellular acidification rate (ECAR) in culture cells for assessment of the energy metabolism.</a> Bio Protoc. 8 (10), e2850(2018).</li>
<li>Hong, X., Muñoz-Cánoves, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+oxygen+consumption+rate+%28OCR%29+and+extracellular+acidification+rate+%28ECAR%29+in+muscle+stem+cells+using+a+Seahorse+analyzer%3A+Applicability+for+aging+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Measuring oxygen consumption rate (OCR) and extracellular acidification rate (ECAR) in muscle stem cells using a Seahorse analyzer: Applicability for aging studies.</a> Methods Mol Biol. 2640, 73-88 (2023).</li>
<li>Yoo, I., Ahn, I., Lee, J., Lee, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracellular+flux+assay+%28Seahorse+assay%29%3A+Diverse+applications+in+metabolic+research+across+biological+disciplines%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cells%22%5BJournal%5D)">Extracellular flux assay (Seahorse assay): Diverse applications in metabolic research across biological disciplines.</a> Mol Cells. 47 (8), 100095(2024).</li>
<li>Kapałczyńska, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((2D+and+3D+cell+cultures+-+a+comparison+of+different+types+of+cancer+cell+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">2D and 3D cell cultures - a comparison of different types of cancer cell cultures.</a> Arch Med Sci. 14 (4), 910-919 (2018).</li>
<li>Rybkowska, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+metabolic+changes+between+monolayer+%282D%29+and+three-dimensional+%283D%29+culture+conditions+in+human+mesenchymal+stem%2Fstromal+cells+derived+from+adipose+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">The metabolic changes between monolayer (2D) and three-dimensional (3D) culture conditions in human mesenchymal stem/stromal cells derived from adipose tissue.</a> Cells. 12 (1), 178(2023).</li>
<li>Białkowska, K., Komorowski, P., Bryszewska, M., Miłowska, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spheroids+as+a+type+of+three-dimensional+cell+cultures-examples+of+methods+of+preparation+and+the+most+important+application%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Spheroids as a type of three-dimensional cell cultures-examples of methods of preparation and the most important application.</a> Int J Mol Sci. 21 (17), 6225(2020).</li>
<li>Pinto, B., Henriques, A. C., Silva, P. M. A., Bousbaa, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+spheroids+as+in+vitro+preclinical+models+for+cancer+research%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional spheroids as in vitro preclinical models for cancer research.</a> Pharmaceutics. 12 (12), 1186(2020).</li>
<li>Juarez-Moreno, K., Chávez-García, D., Hirata, G., Vazquez-Duhalt, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monolayer+%282D%29+or+spheroids+%283D%29+cell+cultures+for+nanotoxicological+studies%3F+Comparison+of+cytotoxicity+and+cell+internalization+of+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+In+Vitro%22%5BJournal%5D)">Monolayer (2D) or spheroids (3D) cell cultures for nanotoxicological studies? Comparison of cytotoxicity and cell internalization of nanoparticles.</a> Toxicol In Vitro. 85, 105461(2022).</li>
<li>Renner, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+fully+automated+high-throughput+workflow+for+3D-based+chemical+screening+in+human+midbrain+organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">A fully automated high-throughput workflow for 3D-based chemical screening in human midbrain organoids.</a> Elife. 9, e52904(2020).</li>
<li>Beaufort, I. N., et al. Author commentary on Ilse N. Beaufort et al. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBeaufort%2C+IN+%22Endoscopy%22">Endoscopy</a>. 56 (5), v6(2024).</li>
<li>Liu, D., Chen, S., Win Naing, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+manufacturing+capabilities+of+cell+spheroid+generation+technologies+and+future+development%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnol+Bioeng%22%5BJournal%5D)">A review of manufacturing capabilities of cell spheroid generation technologies and future development.</a> Biotechnol Bioeng. 118 (2), 542-554 (2021).</li>
<li>Trettner, K. J., Hsieh, J., Xiao, W., Lee, J. S. H., Armani, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nondestructive%2C+quantitative+viability+analysis+of+3D+tissue+cultures+using+machine+learning+image+segmentation%5BTitle%5D)+AND+%22APL+Bioeng%22%5BJournal%5D)">Nondestructive, quantitative viability analysis of 3D tissue cultures using machine learning image segmentation.</a> APL Bioeng. 8 (1), 016121(2024).</li>
<li>Dominijanni, A. J., Devarasetty, M., Forsythe, S. D., Votanopoulos, K. I., Soker, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+viability+assays+in+three-dimensional+hydrogels%3A+A+comparative+study+of+accuracy%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng+Part+C+Methods%22%5BJournal%5D)">Cell viability assays in three-dimensional hydrogels: A comparative study of accuracy.</a> Tissue Eng Part C Methods. 27 (7), 401-410 (2021).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Plat de 10 cm</td><td>Corning</td><td>430167</td><td></td></tr><tr><td>Tube à centrifuger de 15 mL</td><td>Corning</td><td>430791</td><td></td></tr><tr><td>Tube à centrifuger de 50 mL</td><td>Corning</td><td>430828</td><td></td></tr><tr><td>Calcein, AM</td><td>Invitrogen</td><td>Réf. C1430</td><td></td></tr><tr><td>Comtesse 3</td><td>Thermo Fisher</td><td></td><td>Compteur automatique de cellules</td></tr><tr><td>Sérum fœtal bovin</td><td>Gibco</td><td>A5669701</td><td></td></tr><tr><td>Harmonie 5.2</td><td>PerkinElmer</td><td></td><td>Logiciel d’imagerie</td></tr><tr><td>Hoechst 33342</td><td>Solarbio</td><td>Réf. C0031</td><td></td></tr><tr><td>MEM EBSS Medium</td><td>HyClone</td><td>SH30024.01</td><td></td></tr><tr><td>Opérette CLS</td><td>PerkinElmer</td><td></td><td>Système d’analyse d’imagerie à haut contenu</td></tr><tr><td>PBS</td><td>HyClone</td><td>SH30256.01</td><td></td></tr><tr><td>Poly-D Bromhydrate de lysine</td><td>Sigma&nbsp ;</td><td>P7280</td><td></td></tr><tr><td>Plaques à fond rond à fixation ultra-basse à 96 puits</td><td>Corning</td><td>4515</td><td></td></tr><tr><td>Logiciel de bureau Seahorse Wave</td><td>Agilent</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hippocampe XFe96</td><td>Agilent</td><td></td><td>Machine d’essai métabolique extracorporel</td></tr><tr><td>Sorvall ST8R</td><td>Thermo Fisher</td><td></td><td>Centrifugeuse</td></tr><tr><td>TRYPSINE 0,25 % EDTA</td><td>Gibco</td><td>25200072</td><td></td></tr><tr><td>Lignée cellulaire U87MG</td><td>Infrastructure nationale des ressources cellulaires</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Solution de glucose XF 1,0 M, 50 mL</td><td>Agilent</td><td>103577-100</td><td></td></tr><tr><td>XF 100 mM de solution de pyruvate, 50 mL</td><td>Agilent</td><td>103578-100</td><td></td></tr><tr><td>XF 200 mM Solution de glutamine, 50 mL</td><td>Agilent</td><td>103579-100</td><td></td></tr><tr><td>Solution d’étalonnage XF 500 mL&nbsp ;</td><td>Agilent</td><td>100840-000</td><td></td></tr><tr><td>XF Cell Mito Stress Test Kit</td><td>Agilent</td><td>103015-100</td><td></td></tr><tr><td>Milieu DMEM XF, pH 7,4, 500 mL</td><td>Agilent</td><td>103575-100</td><td></td></tr><tr><td>Réseau de sondes de détection XFe96/XF Pro Fluxpak</td><td>Agilent</td><td>103792-100</td><td></td></tr><tr><td>XFe96/XF Pro Fluxpak-Plaques de dosage métaboliques</td><td>Agilent</td><td>103792-100</td><td></td></tr></tbody></table>

progrès dans le profilage métabolique des sphéroïdes de tumeurs cérébrales tridimensionnelles pour le criblage de médicaments

Advancements in the Metabolic Profiling of Three-Dimensional Brain Tumor Spheroids for Drug Screening

Les trois étapes les plus critiques du processus de détection du métabolisme énergétique des sphéroïdes cellulaires 3D sont la culture des sphéroïdes cellulaires 3D, le processus de transfert de sphéroïdes et l’imagerie et la quantification des sphéroïdes après détection (Figure 1). De plus, l’observation de l’état des sphéroïdes cellulaires est très importante. Lorsque les expériences ont été menées selon les procédures expérimentales mentionnées ci-dessus, les sphéroïdes ont été détectés l...

Progrès dans le profilage métabolique des sphéroïdes de tumeurs cérébrales tridimensionnelles pour le criblage de médicaments

Brain tumors, especially gliomas, are challenging to treat because of their aggressive nature, complex tumor microenvironment, and resistance to ...

advancements-metabolic-profiling-three-dimensional-brain-tumor

Research

Recherche

JoVE Journal

Cancer Research

Recherche sur le cancer

L’invasion des tissus normaux environnants est une caractéristique déterminante des tumeurs malignes. Nous fournissons ici un test simple et semi-automatisé sur microplaque d’invasion dans une biomatrice 3D naturelle qui a été illustré par un certain nombre de modèles de cancers humains avancés.

Tridimensionnelle (3D) Tumor Spheroid Invasion Assay

Les xénogreffes de glioblastome multiforme dérivées de patients peuvent être miniaturisées en microtumeurs vivantes à l’aide d’un système de culture de biogel humain 3D. Ce test tumoral 3D in vivo est adapté aux tests de réponse aux médicaments et au profilage moléculaire, y compris l’analyse kinomique.

Génération de microtumeurs Utilisation 3D Biogel humain Système de culture et les cellules de glioblastome patients dérivés pour Kinomic Profilage et Testing Réponse Drug

Ici, on décrit une méthode pour la préparation de 3 Dimensions (3D) sphéroïde co-culture de cellules de cancer du pancréas et des fibroblastes, suivies de la mesure des fonctions métaboliques à l’aide d’un analyseur de flux extracellulaire.

Préparation et test métabolique des co-cultures 3-dimensional sphéroïde de fibroblastes et de cellules de cancer du pancréas

Dans un grand éventail d’indications de la maladie, les modèles plus physiologiquement pertinents soient développés et mis en œuvre dans les programmes de recherche. Le nouveau système de modèle décrit ici montre comment tridimensionnelle tumeur sphéroïdes peuvent être cultivées et diffusés dans un système d’axée sur la plaque du haut débit 1536 puits pour chercher de nouveaux médicaments anticancéreux.

Génération des sphéroïdes High-Throughput tumeur en trois dimensions pour le dépistage des drogues

Tomographie par cohérence optique (OCT), une technologie d’imagerie en trois dimensions, a été utilisé pour surveiller et caractériser la cinétique de croissance des sphéroïdes multicellulaires de tumeur. Une quantification volumétrique précise des sphéroïdes de tumeur à l’aide d’un voxel comptage approche et la détection de tissu mort exempte d’étiquette dans les sphéroïdes basé sur contraste intrinsèque d’atténuation optique, ont été démontrées.

Longitudinale morphologiques et physiologiques surveillance des sphéroïdes de tumeur en trois dimensions à l’aide de la tomographie à cohérence optique

Les effets des inhibiteurs migrastatiques sur la migration de cellules cancéreuses de glioma dans les essais tridimensionnels (3D) d'invasion utilisant un inhibiteur de l'histone deacetylase (HDAC) sont caractérisés par la microscopie confocale à haute résolution.

Caractérisation des effets des inhibiteurs migrastatiques sur l'invasion sphéroïde de tumeur 3D par microscopie confocale de haute résolution

Ici, nous décrivons un essai d’invasion facile à utiliser pour le glioblastome. Cet essai convient aux cellules souches du glioblastome. Une macro fidjienne pour faciliter la quantification de l’invasion, de la migration et de la prolifération est également décrite.

Un modèle sphéroïde 3D pour le Glioblastome

Ces protocoles aideront les utilisateurs à sonder le métabolisme énergétique mitochondrial dans les sphéroïdes dérivés de lignées cellulaires cancéreuses 3D à l’aide de l’analyse du flux extracellulaire Seahorse.

Exploration du métabolisme énergétique mitochondrial des sphéroïdes de microtissu 3D uniques à l’aide de l’analyse du flux extracellulaire

Le présent protocole décrit la génération de modèles de culture tumorale 3D à partir de cellules cancéreuses primaires et l’évaluation de leur sensibilité aux médicaments à l’aide de tests de viabilité cellulaire et d’examens microscopiques.

Établissement de sphéroïdes en 3 dimensions à partir d’échantillons tumoraux dérivés de patients et évaluation de leur sensibilité aux médicaments

Cet article démontre une méthode standardisée pour construire des sphéroïdes tumoraux tridimensionnels. Une stratégie d’observation des sphéroïdes et d’analyse d’apprentissage profond basée sur l’image à l’aide d’un système d’imagerie automatisé est également décrite.

Génération de sphéroïdes tumoraux 3D pour des études d’évaluation de médicaments

Découvrez le profilage métabolique de sphéroïdes de gliome 3D utilisant la technologie Seahorse pour évaluer les réponses aux médicaments et les mécanismes de résistance tumorale.

Progrès dans le profilage métabolique des sphéroïdes de tumeurs cérébrales tridimensionnelles pour le criblage de médicaments

Explorer plus de vidéos