נשימה תאית

מושגיםהכנת מדריךפרוטוקול סטודנט
0 צפיות05:00 דק'
Print Procedure Steps
Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Quantifying Respiration using Microrespirometers
    • הערה: בניסוי זה תמדוד את קצב הנשימה התאית של נביטת זרעים על-ידי מדידת קצב החליפין של חמצן. כאשר חמצן נצרך כדי לספק אנרגיה, זרעים נובטים משחררים פחמן דו חמצני. פחמן דו חמצני זה נספג על ידי אשלגן פחמתי וכך הלחץ הגזי הכולל של הספירומטר יופחת. השערות: השערת הניסוי היא שזרעים נובטים יראו קצב נשימה גבוה יותר מאשר חרוזי זכוכית ביקורת. בנוסף, שבטמפרטורות גבוהות יותר, קצב הנשימה התאית בזרעים יגדל. השערות האפס הן שגם חרוזי זכוכית וגם זרעים נובטים יציגו קצב דומה של נשימה תאית וכי לטמפרטורה אין השפעה על הנשימה.
    • כדי להגדיר את הפקד, תחילה הסר את הבוכנה ממיקרו-רספירומטר מוכן ותייג אותה עם "CR" או "CH" בהתאמה, תלוי אם מדובר בטמפרטורת חדר הבקרה או בטיפול מחומם.
    • הוסף את מיקרו-חרוזי הזכוכית לכל אחד מהמיקרו-רספירומטרים עד לסימן 0.5 מ"ל, ודחוף את הבוכנה במזרק לסימן 1 מ"ל.
    • מניחים 3 - 4 מכונות כביסה על הקצה המתלקח של כל מיקרו-רספירומטר כדי להכביד עליהם בזמן אמבט המים. הערה: המיקרו-רספירומטר יישב בצינור נימי בסופו של דבר.
    • הגדר את התקני הבקרה בצד.
    • כדי להגדיר את הרספירומטרים היושבים הניסיוניים, הסר את הבוכנה ממיקרו-רספירומטר מוכן ותייג אותה עם "ER" או "EH" בהתאמה, תלוי אם מדובר בטמפרטורת חדר הניסוי או בטיפול מחומם.
    • למדוד 0.5 מ"ל של זרעים נובטים לתוך מזרק השחפת של microrespirometer.
    • לאחר מכן, דחפו את המזרק לסימן 1 מ"ל.
    • הניחו 3 - 4 מכונות כביסה על הקצה המתלקח של כל מיקרו-רספירומטר כדי להכביד עליהן בזמן אמבט המים.
    • כדי להשתמש במיקרו-רספירומטרים, לחץ בזהירות על המיקרו-רספירומטרים "CR" ו- "ER" לתוך אמבט המים בטמפרטורת החדר. המזרק כולו צריך להיות שקוע, אבל צינורות נימים צריך להיות חשוף לחלוטין. מוציאים מים מהאמבטיה עד להשגת תנוחה זו. ודא שהחלק העליון של צינור הנימים פתוח.
    • בצע את אותו הליך (שלב 9) עבור מיקרו-רספירומטרים "CH" ו- "EH" כדי להגדיר את קבוצת הניסוי בטמפרטורה גבוהה יותר.
    • המתן 5 דקות לפני שתמשיך הלאה כדי לאפשר לטמפרטורה במיקרו-רספירומטרים להשתוות לאמבט המים.
    • הוסף טיפה אחת של נוזל מנומטר לחלק העליון של כל אחד מארבעת צינורות הנימים אשר אוטם את תאי המיקרו-רספירומטר. הערה: אם התאים פועלים כראוי, נוזל המנומטר יישאב לתוך תא הנימים.
    • השתמש בבוכנה שנקבעה באמבטיה כדי למצוץ את נוזל המנומטר לתוך הנימים. עצור כאשר הנוזל נמצא בערך באמצע הדרך במורד צינור הנימים. חשוב: אין להפריע למיקרו-רספירומטרים לאחר הוספתם לאמבטיה. אין להקפיץ את השולחן או להכניס או להסיר דבר אל אמבט המים או ממנו לאחר שהתאים נאטמו והושוו.
    • סמן את הקצה התחתון של נוזל המנומטר הקרוב יותר לתא. זה מייצג נקודת זמן אפס.
    • הגדר טיימר לצליל תוך 5 דקות.
    • לאחר 5 דקות, צור סימן חדש שבו נוזל המנומטר נמצא על כל מיקרו-רספירומטר. חזור על הפעולה כל 5 דקות עד שיחלפו 25 דקות או עד שנוזל המנומטר עבר את כל אורכו של צינור הנימים.
    • לאחר מכן, הסר את הספירומטרים מאמבטיות המים.
    • מדוד את המרחק בין כל אחד מהסימנים ורשום אותם בטבלה 1 לצד נקודת הזמן הנכונה. לחץ כאן להורדת טבלה 1
    • במהלך הניקוי, יש לפרק מנומטרים לשימוש חוזר או להשליך אותם לפח.
  2. Results
    • כדי לנתח את הנתונים שאספת, תחילה התווה את נקודות הנתונים עם ציר ה-x כזמן וציר ה-y כמרחק שהמנומטר זז, מה שמייצג את צריכת החמצן.
    • חשב את השיפוע של כל שורה באמצעות משוואה זו.
    • רשום ערכים אלה עבור כל מיקרו-רספירומטר בטבלה 2. הערה: ערך זה מייצג את כמות הנשימה התאית שהתרחשה במהלך הניסוי. לחץ כאן להורדת טבלה 2
    • התווה את קצבי הנשימה כגרף עמודות.
    • בחנו את שני הגרפים. שקול כיצד התוצאות שלך מתיישבות עם ההשערות. שימו לב להבדלים שנצפו בקצב הנשימה בין חרוזי הבקרה לבין הזרעים הנובטים. לקבוע אם הגדלת הטמפרטורה היתה השפעה כלשהי על קצב הנשימה.

Browse More Videos

Cellular Respiration