מאמר שיטה

תסיסנית הזחל Dissection NMJ

DOI:

10.3791/1107

⸱

4 בפברואר 2009

 ,  , 
1Department of Physiology and Cellular Biophysics, Columbia University College of Physicians and Surgeons

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פרוטוקול זה מדגים כיצד לנתח תסיסנית הזחלים לקראת אימונוהיסטוכימיה ו / או הדמיה של צומת neuromuscular.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

לפני שתתחיל

  1. תרבויות כל צריך להיות גדל ב 25 ° C.
  2. HL3.1 חיץ לנתיחה עשוי להיות מוכן מראש. קחו aliquot 50 מ"ל של HL3.1 ולשמור על הקרח.
  3. הכן 15 מ"ל של 3.5% פורמלדהיד טרי HL3.1. שמור את זה על הקרח.

הזחל Dissection

  1. שים טיפת HL3.1 קר בצלחת לנתיחה. זה ימשיך את החיה מן ייבוש להמם את החיה ....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

הטכניקה לנתיחה הפגינו וידאו זה יכול לשמש כדי להכין את הזחלים תסיסנית עבור מגוון רחב של טכניקות ניסוי. אם תגי חלבון פלואורסצנטי נוכחים, הזחלים יכול להיות מותקן הדמיה מיד. אחרת, immunostaining יכול להתבצע על מנת לסמן תאים סינפטי ספציפי. בנוסף, electrophysiology יכול בקלות להתבצע על הזחלים גזור כדי להעריך את התפקוד של עצבית.

NMJ של תסיסנית צברה פופולריות רבה מאז מחקרים מוקדמים שהאיר המבנה הבסיסי של.......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

HL3 הצפת Dissection: (מ"מ) 70 NaCl, KCl 5, 0.2 CaCl2, 20 MgCl2, 10 NaHCO3, 5 trehalose, 115 סוכרוז, ו 5 HEPES, pH 7.3.
Sylgard פלייט הביתור: מערבבים בעדינות (כדי למנוע בועות) 10:01 ב מבחנה. יוצקים את התערובת לתוך צלחת פטרי (בכל גודל). אפשר SylGard לרפא לילה 37C חממה.

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Jan, L. Y., Jan, Y. N. Properties of the larval neuromuscular junction in Drosophila Melanogaster. J. Physiol. 262, 189-214 (1976).
  2. Johansen, J., Halpern, M. E., Johansen, K. M., Keshishian, H. Stereotypic morphology of glutamatergic synapses on ident....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

HL 3 1

מאמרים קשורים