זה מסמכים וידאו בנפח גדול (L ≥ 20) סינון של ביומסה של חיידקים, הנעים בין 0.22μm 2.7μm ו בקוטר של עמודת המים.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
במאמר זה
סיכום
תקציר
עבודה מתחיל עם איסוף המים ימית החוף למען הקהילה חיידקים במורד הזרם, מנתח גז מזין עקבות. בשיטה זו, דגימות שנאספו סיפון ההפעלה ג'ון סטריקלנד HMS ב Inlet Saanich. זה מסמכים וידאו בנפח גדול (L ≥ 20) סינון של ביומסה של חיידקים, הנעים בין 0.22μm 2.7μm ו בקוטר של עמודת המים. שתי דוגמאות 20L ניתן לסנן בו זמנית באמצעות יחידת משאבה אחת מצויד עם ארבעה ראשים מסתובבים. הסינון מתבצע בתחום לטיולים המורחבת, או מיד עם שובו של טיולי יום. חשוב לרשום את כמות המים העוברים דרך יחידה sterivex הסינון. כדי למנוע היווצרות biofilm בין טיולים הדגימה, כל הציוד סינון חייב להיות שטוף עם HCl לדלל במים deionized ו autoclaved מיד לאחר השימוש. הליך זה ייקח בערך 5 שעות פלוס שעה נוספת עד נקיים.
פרוטוקול
- הגדרת מנגנון סינון
- כדי להגדיר את מנגנון סינון, להשתמש בפינצטה למקום כיתה GF / D לסנן לתוך יחידת דיור prefilter. Loosely להדק הדיור ביד. ככלל אצבע, לא להדק יתר או יחידת ידלפו פעם מתחיל שאיבה.
- החזר את מכסה בקבוק עם כובע autoclaved צינורות מחוברים בקפידה על ידי הכנסת צינור פנימי לתוך בקבוק, בלי לגעת בו. במידת הצורך, להשתמש בפינצטה כדי להנחות את צינורות לתוך בקבוק.
- עוברים את צינורות חיצוני....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
זה הכרחי כדי לנגב את ספסלי משאבות במגבת לחה לאחר השימוש כדי להסיר כל עקבות המתמשכת של מי מלח שאחרת לשיתוק ציוד. למרות ההליך הוא פשוט, הדרישה זמן יכול להיות נרחב תלוי בריכוז של ביומסה או פסולת במדגם להיות מסונן.
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
למחברים אין ניגודי עניינים להצהיר עליהם.
תודות
ברצוננו להודות לקרן קנדית עבור חדשנות, פיתוח קולומביה הבריטית קרן ידע מדעי הלאומי וההנדסה מועצת המחקר (NSERC) של קנדה לתמיכה מחקרים מתמשכים על אזורים חמצן נמוכה של מים חופי האוקיינוס הפתוח. דאו נתמכה על ידי מלגות של NSERC, Killam ויסוד טולה מרכז מימנה עבור גיוון התפתחות חיידקים.
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות | |
|---|---|---|---|---|
| משאבה פריסטלטית | Masterflex (Cole Palmer) | 77913-20, 77200-62, 77200-04 | ||
| צינור Tygon LFL | Masterflex (Cole Palmer) | 06429-24 | עבור מערכת סינון | |
| מהבקי הלחץ (קוולסות) | Cole-Parmer | 0683204 | עבור מערכת סינון | |
| 1/4” x 3/16” מתאמי צינורות | Cole-Parmer | 31702-20 | עבור מערך סינון | |
| בית מסנן קדם מפוליפרופילן | ADVANTEC | 501200 | עבור מכשיר סינון | |
| מחבר לור מתכתי (קצה צינור למחבר לור זכר עם נעילה) | Cole-Parmer | 31507-27 | עבור מערכת סינון | |
| 2“ מגנטים | עבור מערכת סינון | |||
| פקקי קרבוי בעלי 3 פתחים | עבור התקן סינון | |||
| GV 0.22 μמסנני STERIVIX | EMD Millipore | SVGV01R5 | ||
| קוטר 47 מ"מ 2.7 μמסנני GF/D | Whatman, GE Healthcare | 1823047 | ||
| בופר ליזיס | ריאגנט | 0.75 M סוכרוז, 40 mM EDTA, 50 mM Tris (pH 8.3) | ||
| 0.1% HCl | ריאגנט | לשטיפה לאחר הסינון | ||
| מים שעברו עיקור באוטוקלאב | ריאגנט | לשטיפה לאחר הסינון |
הדפסות חוזרות והרשאות
