סרט זה מדגים שלושה סוגים של ניתוחים morphometric של הרשתית, אשר כוללים מדידת עובי השכבה הפנימית גרעינית, לכימות את מספר התאים הגנגליון ברשתית (RGCs) ומדידה של גדלים של RGCs. הטכניקה יכולה להציע פלטפורמה פשוטה אך מדעי ניתוחים morphometric.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
במאמר זה
הודעת תיקון
Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice
סיכום
תקציר
ניתוחים Morphometric סעיפים רשתית שימשו לבדיקת מחלות רשתית. לדוגמאות, תאים עצביים אבדו באופן משמעותי את שכבת התאים ברשתית גנגליון (RGCL) במודלים של עכברים עם N-methyl-D-aspartate (NMDA) הנגרמת excitotoxicity 1, פגיעה ברשתית איסכמיה reperfusion 2 ו 3 גלאוקומה. צמצום שכבת plexiform INL ופנימיים (IPL) עובי התהפכו עם טיפול citicoline בעיניים של חולדות נתון excitotoxicity חומצה בתיווך kainic גלוטמט 4. שינוי של צפיפות RGC וגדלים סומה נצפו עם טיפולים תרופתיים שונים בעיניים עם לחץ תוך עיני גבוה 3,5,6. לכן, לאחר שיטות אובייקטיביות של ניתוח ברשתית morphometries עשוי להיות בעל חשיבות רבה בהערכת מחלות רשתית ואת האפקטיביות של אסטרטגיות טיפוליות.
מבנה הרשתית היא מרובת שכבות סוגים שונים של נוירונים exiרחוב ברשתית. הפרמטרים morphometric של הרשתית כגון מספר תאים, גודל התא ועובי השכבות השונות הם מורכבים יותר מאשר מערכת תרבית תאים. מוקדם יותר, פרמטרים אלה ניתן לאתר באמצעות הדמיה אחרות תוכנה מסחרית. הערכים הם בדרך כלל בעל ערך יחסית, ושינוי הערך המדויק ייתכן שיהיה צורך בחישוב מדויק יותר. כמו כן, מעקב של גודל התא ומורפולוגיה לא יכול להיות מדויק ורגיש מספיק לניתוח סטטיסטי, במיוחד במודל גלאוקומה כרונית. המדידות בשימוש בפרוטוקול זה בתנאי דרך מדויקת יותר וקלה. אורך מוחלט של הקו ואת גודל התא ניתן לדווח ישירות קל להעתיק את הקבצים האחרים. לדוגמה, אנו לייחס את השוליים של גרעינים ביותר פנימית וחיצונית של INL ויצרו קו ואז באמצעות התוכנה לצייר זווית של 90 מעלות כדי למדוד את עובי. אמנם ללא עזרה של תוכנות, קו אלכסוני אולי ואת המשתנה של עובי הרשתית רשאילא יהיה הדיר בקרב צופים בודדים. בנוסף, מספר וצפיפות RGCs ניתן לכמת. פרוטוקול זה בהצלחה מקטין משונות quantitating התכונות של הרשתית, מעלה את הרגישות באיתור שינויים מינימליים.
סרט זה יהיה להדגים שלושה סוגים של ניתוחים morphometric של חלקים ברשתית. הם כוללים מדידת עובי INL, לכמת את מספר RGCs ומדידה של גדלים של RGCs בערך מוחלט. שלושת הניתוחים מבוצעים עם החוקר סטריאו (MBF Bioscience - MicroBrightField, Inc). הטכניקה יכולה להציע פלטפורמה פשוטה אך מדעי ניתוחים morphometric.
פרוטוקול
1. כלים
, מיקרוסקופ Nikon
החוקר סטריאו, MBF Bioscience - MicroBrightField, Inc
2. הכנה
- לפני העבודה על ניתוח כל morphometric, כל דגימה הרשתית מחולק על עובי 4 מיקרון ו עובר מכתים H & E.
- סעיף הרשתית מחולקת ל -4 אזורים - האזור היקפי העליון, אזור המרכז העליון, באזור הפריפריה נמוך יותר, באזור ה....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
1. כיצד לקבל מדידה מדויקת יותר עובי?
ניתן להגדיל את התמונה על ידי לחיצה על "קרב" על והשאיר לחץ בחלון העקיבה. הגבול INL ניתן לראות בבירור. אם קצה של הקו לא על הגבול החיצוני של INL, אנו יכולים להתאים את קו תחת מצב עריכה. לאחר בחירת קו הנוגעים בדבר, קליק ימני בחלון באיתור לבחור "הוספת טעם קונטור נבחר". נקודת ניתן להוסיף בגבול החיצוני בעוד נקודת הוסיף צריך להיות יחד באותה שורה. לאחר מכן, אתה צריך למחוק את הנקודה המקורי .......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
החוקרים אין לי מה לחשוף.
תודות
העבודה על המחקר עין במעבדה זו נתמכת על ידי הקרן האמריקאית לבריאות עוזר, אזליה (1972) קרן צמיתה, קרן HKU פרוייקט קטן (20097176185).
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| שם מגיב | סוג | חברה | מספר קטלוגי |
| סטריאו החוקר | MBF תוכנות ניתוח Bioscience | MicroBright שדה | |
| מיקרוסקופ | אולימפוס BX51 | חברת אולימפוס | BX51 |
מקורות
- Lam, T. T., Abler, A. S., Tso, M. O. N-Methyl-D-Aspartate (NMDA)–Induced Apoptosis in Rat Retina. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 40, 2391-2397 (1999).
- Lam, T. T., Abler, A. S., Tso, M. O. Apopto....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
תיקון
Formal Correction: Erratum: Morphometric Analyses of Retinal Sections
Posted by JoVE Editors on 1/01/1970. Citeable Link.
null
