מאמר שיטה

בקנה מידה גדול הקלטה של ​​הנוירונים על ידי בדיקות מטלטלין סיליקון מתנהג מכרסמים

DOI:

10.3791/3568

⸱

4 במרץ 2012

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Center for Molecular and Behavioral Neuroscience, University of New Jersey, 2Center for Interdisciplinary Research in Biology, Collège de France, 3Janelia Farm Research Campus, Howards Hughes Medical Institute, 4Deptartment of Psychology, University of Wisconsin at Milwaukee

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אנו מתארים שיטות הקלטה בקנה מידה גדול של יחידות בודדות מרובות פוטנציאל בתחום המקומית מתנהג מכרסמים עם בדיקות סיליקון. כונן ייצור, מצורף בדיקה לכונן ואת ההשתלה תהליכי בדיקה באים לידי ביטוי מספיק פרטים עבור שכפול קל.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אתגר גדול במדעי המוח מקשרת התנהגות לפעילות הקולקטיבית של מכלולים עצביים. הבנה של קלט פלט יחסים של נוירונים ומעגלים דורש שיטות עם סלקטיביות מרחבי ברזולוציה הזמני המתאים לניתוח מכניסטית של הרכבים עצביים בעלי חיים מתנהגים, כלומר הקלטה של ​​דגימות גדולות representatively של נוירונים בודדים. אנסמבל ניטור של הפעילות העצבית התקדמה במידה ניכרת אצל בעלי חיים קטנים וגדולים כאחד בעל המוח, כולל בבני אדם 1-11 בעשור האחרון. מרובת אתרים עם הקלטה מבוססי סיליקון מכשירים יעילים במיוחד הודות ליכולת ההרחבה שלהם, נפח קטן עיצוב גיאומטרי.

כאן, נתאר שיטות הקלטה נוירונים בודדים מרובים פוטנציאליים בתחום המקומית מתנהג מכרסמים, תוך שימוש זמינים מסחרית מיקרו מכונות בדיקות סיליקון עם מחוייט רכיבים אביזר. יש 2 אפשרויות בסיסיות ואו התממשקות בדיקות סיליקון preamplifiers: מעגלים מודפסים, כבלים גמישים. חברות המספקות בדיקה ( http://www.neuronexustech.com/ ; http://www.sbmicrosystems.com/ ; http://www.acreo.se/ ) בדרך כלל לספק את השירות מליטה לספק בדיקות מלוכדות מעגלים מודפסים או כבלים גמישים. כאן, אנו מתארים את ההשתלה של החללית 4-32-שוק באתר, מצורף כבל polyimide גמיש, רכוב על Microdrive מטלטלין. כל שלב בהכנת בדיקה, בנייה Microdrive ניתוח מתוארת כך משתמש הקצה יכול בקלות לשכפל את התהליך.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. בניית Microdrive

כל הכוננים עשויים אלמנטים בסיסיים: החלק המרגש, אשר נושא את האלקטרודה וחלק קבוע, המעוגן אל הגולגולת. Microdrive האידיאלי מאפשר נסיעה די חלקה אבל ארוכה של האלקטרודה בצעדים קטנים מרובים, הוא יציב מספיק כדי למנוע תנועה מקרית של האלקטרודה, קל לתמרן על ידי הנסיין בלי להפריע את התנהגותו של בעל חיים קטן בגודל קלים במשקל. בעקבות דרישות אלה מתחרות, חבילת כוננים שונים ליישומים שונים.

רק 4 חלקים יש צורך לבנות כונן הבסיסית שלנו: בורג שטוח פליז ראש, אגוז התאמה, גשר פלסטיק מוכנים מן הכותרת....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

סרט זה ממחיש את ההליך השתלת סיליקון עבור בדיקות בקנה מידה גדול הקלטות כרוניות בחולדה מתנהג. שלבים קריטיים כדי להבטיח הקלטות באיכות של הפעילות העצבית נובעים השבריריות של שניהם ביולוגי (רקמת המוח) ו טכניים (סיליקון בדיקה) חומרים. זהירות יש לנקוט בזמן הטיפול בדיקה כדי למנוע כל מגע של שאנקס עם כל משטח מרחוק "קשה" (לדוגמה, שאנקס את יישבר אם ניסה להשתיל אותם במוח מבלי להסיר את דורה). בדומה לכך, כל פציעה של רקמת המוח (בעת הכנת השטח המוח להשתלה, או להיתקל בדיקה או כונן פעם אחת ה.......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אין ניגוד עניינים הצהיר.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מארי קירי International Fellowship יוצא (FP/2007-2013 של האיחוד האירופי הסכמי גרנט # 221834 ו - 254780), JD קרן מקדונל, NSF גרנט SBE 0542013, המכונים הלאומיים לבריאות גרנט NS034994, המכון הלאומי לבריאות הנפש MH5467 גרנט לבין הווארד יוז רפואי במכון (Janelia חוות מחקר קמפוס המענק).

....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
שם סוג חברה מספר קטלוגי תגובות
הסיליקון בדיקה Buzsaki32, 4 ובמוטות מושחזים x 8 אתרים. אריזה: כבל גמיש פוליאמיד חומר NeuroNexus בדיקה: buzsaki32
אריזה: HC32 		הקלטה בדיקה
בורג נחושת עגול, 00-90 x 1/2 ברגי פליז עגול חומר JIMorris R0090B500 כונן חלק
הקס אגוזים פליז, 00-90 חומר JIMorris N0090B כונן חלק
פליז C260 עזה, ASTM-B36
עובי: 0.025 ", אורך: 12", רוחב: 1/2 " 		חומר חלקים קטנים B000FMYU72 כונן חלק
מחבר כותרת, גובה 2 מ"מ, מ 'אייל, שורה אחת, straigt, 36 עמדות חומר Digikey 2163S-36-ND כונן חלק
2 חלקים Sylgard אלסטומר סיליקון חומר Precision של מכשירים בעולם SYLG184 כדי לבודד במיוחד בדיקה
Decon Contrad 70 בנוזל כביסה מגיב פישר סיינטיפיק 04-355
Decon מעבדות
מספר: 1002 		כדי לנקות את האתרים הקלטה
מיזוג עכבה מודול ציוד Fhc בע"מ 55-70-0 עכבה מטר
niPOD - 32 ערוצים ציוד Neuronexus niPOD -32 עכבה מטר
מלט גריפ תעשייתי כיתה חומר קולק Dentsply 675,571 (אבקה)
675,572 (ממס) 		גריפ לספירהment
1,1 ", dioctadecyl-3, 3,3", 3'-tetramethylindocarbocyanine פרכלורט ("DiI '; DiIC18 (3)) מגיב Invitrogen D282 להכתים את המסלול בדיקה במוח
מכונת נירוסטה בורג פלדה, ראש איגוד, כונן מחוררת, # 00-90, 1/8 " חומר חלקים קטנים MX-0090-02B הקרקע ברגים התייחסות
חוט מגנט, 20 גר ', ניילון, פוליאוריטן ציפוי, MW80 חומר חלקים קטנים B000IJYRP2 הקרקע חוט התייחסות
מכונת נירוסטה בורג פלדה, ראש איגוד מחוררת דרייב, # 000-120, 1/16 " חומר חלקים קטנים MX-000120-01B עוגן ברגים
N-3 כל נוזלי שטף מטרה מגיב La-Co (Markal) 23512 מאפשר לרתך נירוסטה
MicroGrid Precision מורחב נחושת חומר Dexmet 3 CU6 FA-050 נחושת רשת עבור על ראש כלוב פאראדיי
C & B-METABOND מהר! מלט מערכת - דנטין Activator חומר Parkell S380
C & B-METABOND מהר! מערכת מלט - צמנט שיניים חומר Parkell S380
נקודה חדה טונגסטן המחט בעל כלי Roboz מכשירי ניתוח RS-6064 ו-RS-6061 כדי להפוך את הקרס להרים את דורה
קרביד Bur HP 1/4 כלי הנרי שיין 9990013
פרפין (גרגרי) חומר פישר סיינטיפיק P31-500
שמן מינרלי, אור (NF / FCC) חומר פישר סיינטיפיק O121-1
GC אלקטרוניקה 10-114 2 חלקים דבק אפוקסי חומר ניוארק 00Z416
1 סוג LITZ 21 AWG 40/36 אדומה אחת פוליאוריתן, ניילון (MW80-C) .041 "+ / -0.002" OD חומר ניו אינגלנד Wire Technologies Corporation N28-36E-400-2 כדי להפוך את הכבל בין headstage ו מגבר
32 ערוצים הגדול מאוד שילוב headstage קנה מידה, 20x רווח ציוד Plexon HST/32V-G20 Headstage

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Buzsáki, G. High-frequency network oscillation in the hippocampus. Science. 256, 1025-1027 (1992).
  2. Wilson, M. A., McNaughton, B. L. Dynamics of the hippocampal ensemble code for space. Science. 261, 1055-1058 (1993).
  3. Buzsáki, G.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

מאמרים קשורים