הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

דלדול המשאבים ואת הכינון מחדש של מקרופאגים בעכברים

39.6K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/4105

⸱

1 באוגוסט 2012

 ,  , 
1Department of Graduate Studies, University of British Columbia , 2Department of Molecular Biology, Vrije Universiteit Amsterdam, 3Department of Pediatrics, University of British Columbia

במאמר זה

סיכום

מקרופאגים לשחק תפקיד מרכזי הומאוסטזיס והפתולוגיה ברקמות רבות. הפרוטוקול המובא כאן מתאר שיטות ומכלה מקרופאגים In vivo, הנובעת מקרופאגים מקוטב aspirates מח עצם, adoptively העברת מקרופאגים לעכברים. טכניקות אלו מאפשרים קביעת התפקיד מקרופאגים מקוטב לשחק בריאות ומחלות.

תקציר

מקרופאגים הם שחקנים קריטיים בתגובה החיסון המולדת לאתגר פגיעה זיהומית או, שיזם את התגובה החיסונית המולדת ולכוון את התגובה החיסונית הנרכשת. מקרופאג תפקוד יכול להוביל לחוסר יכולת לעלות תגובה חיסונית מתאימה, וככזה, היה מעורב בתהליכים מחלות רבות, כולל מחלות מעי דלקתיות. מקרופאגים להציג פנוטיפים מקוטב כי המחולקים באופן כללי לשני סוגים. מקרופאגים מופעל קלאסי, מופעל על ידי גירוי עם IFNγ או LPS, לשחק תפקיד חיוני בתגובה לאתגר חיידקי בעוד מקרופאגים מופעל לחילופין, מופעלים על ידי IL-4 או IL-13, להשתתף פסולת הדחה שיפוץ רקמות היו מעורבים בהחלטה השלב של דלקת. במהלך התגובה הדלקתית in vivo, מקרופאגים נמצאים בתוך תערובת מורכבת של חדירת תאים חיסוניים ועשוי להשתתף ידי העצמת או resolvinגרם לדלקת. כדי להגדיר את התפקיד של מקרופאגים באתרו במודל חיה שלמה, יש צורך לבחון את ההשפעה של ומכלה מקרופאגים מהסביבה מורכב. לשאול שאלות על תפקידו של הפנוטיפ מקרופאג באתרו, מקרופאגים מקוטב מוגדרים phenotypically ניתן לגזור vivo לשעבר, החל aspirates מח עצם והוסיף בחזרה עכברים, עם או בלי דלדול מראש של מקרופאגים. בפרוטוקול שהוצג clodronate המכיל ליפוזומים, לעומת שולטת PBS מוזרק, שימשו כדי לרוקן מקרופאגים הגס במהלך נתרן גופרתי dextran (DSS) הנגרמת קוליטיס בעכברים. בנוסף, מקרופאגים מקוטב נגזרו vivo לשעבר והועבר עכברים על ידי הזרקה תוך ורידית. הערת אזהרה על גישה זו היא כי clodronate המכיל ליפוזומים לרוקן את כל phagocytes מקצועיים, כולל שני תאים דנדריטים ומקרופגים כך כדי להבטיח את האפקט שנצפה על ידי דלדול הוא מקרופאג ספציפי, הכינון מחדש Oפנוטיפ F על ידי העברת המאמצת של מקרופאגים הכרחי. דלדול מקרופאג מערכתית בעכברים יכול גם להיות מושגת על ידי עכברים backcrossing על רקע CD11b-DTR, שהיא גישה משלימה מצוינת. היתרון של clodronate המכיל דלדול liposome בתיווך הוא שהיא אינה דורשת את הזמן ואת חשבון מעורב עכברים backcrossing והוא ניתן להשתמש בעכברים ללא קשר לרקע של העכברים (C57BL / 6, BALB / c, או רקע מעורב ).

פרוטוקול

1. המקרופאגים באוזון באמצעות Clodronate המכיל ליפוזומים

  1. ליפוזומים מאוחסנים 4 ° C. שעתיים לפני ההזרקה, הסר clodronate המכיל ליפוזומים, PBS המכיל ליפוזומים או סטרילית PBS (בקרת הזרקה) מהמקרר כדי לאפשר להם להסתגל לטמפרטורת החדר (18 מעלות צלזיוס).
  2. להפוך את צינורות המכילים ליפוזומים 8-10 פעמים כדי להבטיח חלוקה עוד לפני טעינת 200 μl לתוך מזרק 1 מ"ל. צרף מחט מד 26 לחלק העליון של המזרק.
  3. שימוש, בעורפו ביד שמאל את העכבר ממש מתחת לאוזניים המחזיקים העור מספיק כדי לשתק את הראש והגפיים.
  4. להטות את העכבר כדי ראשו מעט כלפי מטה, כך האיברים הפנימיים להתרחק הזריקה, הנמצא ברביע הימני התחתון של הבטן.
  5. מרדדים את המזרק בין כפות הידיים שלך להפוך את זה 6 פעמים כדי לפזר את הפתרון liposome לפני באופן שווה כדי הזריקה.
  6. להכניס את המחט בצד הימני התחתון של הבטן העכבר בזווית של 30-40 מעלות. להזריק 200 μl של פתרון liposome או PBS.
  7. במהלך המודל דלקת הנגרמת, כמו קוליטיס DSS-Induced, עכברים להזריק 4 ימים לפני הופעת הדלקת ניסיוני על מנת להבטיח צמצום של מקרופאגים תושבים וכל 2 ימים במהלך פרוטוקול לכלות מקרופאגים שחדרו חדשים.
  8. בסוף הניסוי, יחד עם ניתוחים ניסיוניים המתוכננות, להסיר רקמות מהאתר של עניין ולתקן עם paraformaldehyde לאשר דלדול מקרופאג ידי immunohistochemical מכתים.

2. הגזירה של מקרופאגים מקוטב aspirates מוח עצמות

  1. מח העצם מעכברים בין 8 ל 12 שבועות של גיל מספק את התשואה הגבוהה ביותר של מוח עצם שמקורם מקרופאגים. להרדים את העכבר, ולהניח אותה על הגב שלה, להצמיד את רגליו, מותח את איבריו ככל האפשר.
  2. עבודה סטרילית הוד, להסיר עצמות הירך ושל tibias, חיתוך משם השריר עד כמה שניתן.
  3. מח פלאש מהעצמות באמצעות IMDM עם FCS 10% נטען לתוך מזרק 5 מ"ל מצויד במחט 26 מד.
  4. לדלל מח עצם aspirates ל 40 מ"ל ב IMDM עם FCS 10%, תאים במקום ב 75 2 בקבוק ס"מ רקמות תרבות, דגירה על 37 מעלות צלזיוס, 5% CO 2 למשך 4 שעות. צעד זה מסיר תאים mesenchymal חסיד או מאקרופאגים בוגרים מכל אבות היווצרות הדם.
  5. תרבות העברת supernatant המכיל שאינו חסיד אבות על צינור 50 מ"ל פלקון חרוטי ו צנטריפוגות במשך 5 דקות על סל"ד 1200.
  6. Resuspend תא גלולה של 5 מ"ל IMDM, FCS 10% ו לספור תאים גרעיני על ידי דילול ההשעיה תא 1 ב 20 בחומצה אצטית. הליך זה lyses כל התאים, כולל כדוריות דם אדומות וכן גרעינים הנותרים ניתן לסמוך על hemocytometer.
  7. תאים Resuspend בריכוז של 0.5 × 10 6 תאים / מ"ל במדיום מלאה; IMDM, FCS 10%, 150 מיקרומטר monothioglycerol (MTG), ו - 10 ננוגרם / מ"ל ​​או MCSF, GM-CSF, או IL-3. MCSF הנגזרות מקרופאגים מופעלים קלאסי מקרופאגים בעוד מקרופאגים GM-CSF או IL-3-הנגזרות מופעלים לסירוגין.
  8. החלף בינוני ביום 4, מסתובב כלפי מטה לא חסיד התאים ומחזיר אותם בבקבוק, ואת יום ב 7, משליכים לא חסיד תאים.
  9. בנוסף, IFNγ (10 ng / ml) או IL-4 (10 ng / ml) ניתן להוסיף שהכילו MCSF הנגזרות תאים ביום 7 כדי ליצור הטיה המקרופאגים כדי להפעיל קלאסי או הפנוטיפ מופעל לחילופין, בהתאמה. דגירה התאים למשך 3 ימים נוספים.
  10. ביום 10, להסיר תאים התקשורת ולהרים את הבקבוק של רקמת התרבות באמצעות סלולרי דיסוציאציה חוצץ (Gibco-BRL). מקום 5 מ"ל של המאגר על תאים של 5 דקות בטמפרטורת החדר (18 מעלות) ואז לדפוק את הצד של הבקבוק עם העקב של כף היד מספר פעמים בחוזקה. ודא כי התאים לא המריא של הבקבוק על ידי בחינת הבקבוק תחתמיקרוסקופ. Pipet resuspended התאים לתוך שפופרת 15 מ"ל פלקון חרוטי ולשטוף את הבקבוק עם 10 מ"ל נוספים של IMDM, 10% FBS. בריכת ומסובב את התאים דקות ב 300 × 5 גרם.
  11. ספירת תאים קיימא באמצעות hemocytometer ו resuspend בריכוז של 10 -7 תאים / מ"ל PBS סטרילית pH7.4. מקרופאגים מוכנים להזרקה לעכברים.
  12. שמורת 1.0 × 10 6 מקרופאגים להערכת פנוטיפ מקרופגים. מקרופאגים מופעל קלאסי מגורה עם מפרישים רמות גבוהות של lipopolysaccharide תחמוצת החנקן ורמות IL-12p70 נמוך של IL-10 לעומת מקרופאגים המופעלים לסירוגין. מקרופאגים מופעל לחילופין constitutively להביע YM1 ו arginase אני (ArgI), אשר ניתן לאתרם באמצעות Western immunoblotting.

3. Tranferring המקרופאגים לעכברים

  1. מקרופאגים Resuspend ב PBS סטרילית בריכוז של 10 7 תאים למ"ל. זה מאפשר בהזרקת travenous של 10 6 מקרופאגים בנפח כולל של 100 μl, שהוא נפח כי ניתן להזריק באופן שליו ובטוח לעכברים ידי וריד הזנב.
  2. עכברים חמים באמצעות כרית חימום או הברכיים חום למשך 5-10 דקות כדי להרחיב את הווריד הזנב. לפקח על העכבר בכל עת סימנים של היפרתרמיה.
  3. העברת העכבר על המכשיר הרחקה המאפשר גישה הוורידים הזנב.
  4. סובב את הזנב 90 ° כך הווריד פונה כלפי מעלה. ורידים רוחבית להפעיל את שני צידי הזנב ו או וריד ניתן להשתמש.
  5. לנקות את ההזרקה עם ספוגית אלכוהול לאט להזריק 100 μl (10 6 מקרופאגים) באמצעות מזרק 1 מ"ל עם מחט 26 או 28 מד. הכנס את המחט עם הצד שיפוע כלפי מעלה בזווית קלה, כמעט במקביל הוריד.
  6. אם המחט מוחדרת כראוי התנגדות צריך להיות לבד ברוח צריך להיות ברור לאחר ההזרקה. אם המחט אינהוריד, הזנב יהיה הבליטה. אם זה יקרה, להוציא את המחט ולנסות שוב הפרוקסימלי לניסיון האחרון או ברוח אחרת. מחט חדשה יש להשתמש עבור כל הזרקה כמו הזנב הוא קשוח המחטים להיות משעמם במהירות במהלך ההזרקה לווריד הזנב.
  7. בעקבות הזריקה, להוציא את המחט, להפעיל לחץ עדין על הזריקה עד שהדימום ייפסק, ולנטר את העכבר על 5min נוסף על מנת להבטיח כי הדימום הפסיק.
  8. חזור על זריקות מקרופאג כל 4 ימים על מנת להבטיח אספקה ​​רציפה של מקרופאגים מקוטב במהלך ההליך הניסויי.
  9. בסוף הניסוי, יחד עם ניתוחים ניסיוניים, להסיר רקמות מהאתר של עניין ולתקן עם paraformaldehyde או פורמלין כדי לאשר משלוח יעיל של מקרופאגים מקוטב על ידי immunohistochemical מכתים.

4. נציג תוצאות

מספר הפנוטיפ של macrop תושבhages ברקמות נתון תלוי הרקמה נבחנות ו ישתנה בזמן זיהום או דלקת. כמו כן, היכולת של clodronate המכיל ליפוזומים לכלות מקרופאגים מרקמות יהיה תלוי במסלול של ניהול ואספקה ​​יעילה לרקמת המטרה. הזרקת Intraperitoneal של clodronate המכילים תוצאות ליפוזומים לירידה F4/80 + מקרופאגים במעי הגס העכבר במהלך קוליטיס DSS-Induced ניכר ידי מכתים immunohistochemical לסמן מקרופאג, F4/80 (איור 1 א). צביעה היסטולוגית יכול לשמש גם כדי לקבוע הבדלים כמותיים במספר מקרופאג ו פנוטיפ בסעיפים רקמות. איור 1 ב מראה כי בממוצע 55% של מקרופאגים תיגמר ידי clodronate המכיל ליפוזומים לעומת דלדול לא זוהה נקודתיים העכבר כאשר העכברים מוזרקים עם PBS לבד כמו בקרת זריקה. כל ערך נקבע על פי ספירת F4/80 ו ArgI כתםאד תאים חיוביים בסעיפים רקמות סדרתי של 6 עכברים ב 3 נקודות, ב 3 חלקים לכל עכבר עם ספירת המבוצעת על ידי שני אנשים שהתעוורו למצב הניסוי. תוצאות אלו מראות כי זריקות intraperitoneal של ליפוזומים clodronate לרוקן מקרופאגים הגס בעכברים.

גזירת מקרופאגים ממח העצם בנוכחות גורמי גדילה שונים מקרופאגים תשואות המופעלים קלאסי (MCSF הנגזרות או MCSF הנגזרות ומטופל עם IFNγ) או לחלופין להפעיל (GM-CSF או IL-3-derived או MCSF הנגזרות ו מטופלים עם IL-4). שטיפה מח עצם מ -2 עצמות הירך ו -2 tibias של העכבר בן 8 שבועות בדרך כלל מניבה 6 × 10 7 התאים בעלי הגרעין לכל עכבר ותשואות 8 × 10 6 MCSF הנגזרות מקרופאגים, 10 × 10 6 GM-CSF הנגזרות מקרופאגים, או 12 × 10 6 IL-3-הנגזרות מקרופאגים. איור 2 א מראה הניטריט ויחס IL-12p70/IL-10 ב מקרופאג לסעודernatants שטופלו lipopolysaccharide במשך 24 שעות 2B איור מראה אופייני ניתוח כתם המערבי של 0.5 × 10 6 מקרופאגים MCSF + / -. IL-4 תנאי הגזירה נחקר עם נוגדנים סמנים מקרופאג מופעל לחילופין, ArgI, YM1, או עם GAPDH כמו טעינה מלאה. נתונים אלה מראים כי מוח עצם שמקורם מקרופאגים יכול להיות מוטה על הפנוטיפ מקוטב במהלך הגזירה.

העברה יעילה של מקרופאגים לשעבר ב vivo מקוטב הנגזרות לרקמות תלוי במסלול של ניהול גישה רקמות. במהלך קוליטיס DSS-Induced, מקרופאגים מוזרק לווריד לנסוע לאתר של דלקת מקרופאגים מופעל לחילופין להפחית את חומרת המחלה. 3A באיור ניתן לראות את המספר הכולל של מקרופאגים ומספר מקרופאגים ArgI + (מופעל לחילופין) שנמנו בסעיפים היסטולוגית של עכברים שהוזרק עם מקוטב מח עצםהנגזרות מקרופאגים. ההשפעה של העברת מקרופאגים מקוטב אל המעי הגס במהלך קוליטיס DSS-Induced מוצג במדד פעילות המחלה, ציון תוסף על בסיס ירידה במשקל, דימום רקטלי, ועקביות שרפרף קטן (איור 3 ב). תוצאות אלו מראות כי vivo לשעבר נגזרים, מקרופאגים שהועברו adoptively תנועה המעי הגס ודלקת הפגיעה הנגרמת יכול. מקרופאגים M1 לא להשפיע על דלקת ואילו מקרופאגים מסוג M2 להפחית באופן משמעותי את פעילות המחלה ראשי.

figure-protocol-1
באיור 1. Clodronate המכיל ליפוזומים ביעילות לרוקן F4/80 + ו-F480 + + ArgI התאים נקודתיים עכבר in vivo. בדור F2 של עכברים מסוג בר על C57BL מעורבת / 6 × רקע 129Sv קיבלו DSS 5% למשך 7 ימים ו-IP הזריקו PBS (בקרה) או clodronate המכיל ליפוזומים (Clodronate) 4 ימים לפני הטיפול DSSעל 0 ימים, 2, 4, ו -6 במהלך הטיפול DSS. (א) נקודתיים הוסרו קבועה, וחתכים הוכתמו על ידי אימונוהיסטוכימיה עבור מקרופאגים בוגרים (F4/80) וכן את הסמן מקרופאג M2, ArgI. (ב) לכמת את F4/80 + ו + ArgI מקרופאגים. תאים מוכתמים חיובי נספרו על ידי שני אנשים שהתעוורו למצב ניסיוני בהגדלה 40 × 6 שדות ב 3 חלקים / עכבר ומ 6 עכברים / קבוצה. * P <0.01.

figure-protocol-2
איור 2. MCSF הנגזרות מקרופאגים להביע פנוטיפ מופעל קלאסי ו MCSF הנגזרות מקרופאגים שטופלו IL-4 להביע את הפנוטיפ מקרופאג מופעל לחילופין. (א) בהתאם פנוטיפ מופעל קלאסי, MCSF הנגזרות מקרופאגים לייצר רמות גבוהות של תחמוצת החנקן בתגובה lipopolysaccharide והוא יכול להימדד על ידי assay Griess, אשר מזהה המטבוליט במורד הזרם שלו, הניטריט. הם ALSהו לייצר יחס IL-12p70/IL-10 גבוה, אשר ניתן למדוד ELISA. * P <0.01 עבור n = 3. (ב) בהתאם פנוטיפ מופעל לחילופין, MCSF הנגזרות מקרופאגים שטופלו IL-4 constitutively אקספרס YM1 ו ArgI, אשר ניתן לאתרם באמצעות immunoblotting המערבי. הנתונים מייצגים 3 ניסויים בלתי תלויים עם תוצאות דומות.

figure-protocol-3
איור 3. מוזרק תוך ורידי, לשעבר vivo הנגזרות מופעל לחילופין התנועה מקרופאגים המעי הגס ולהפחית דלקות מעיים. בדור F2 של עכברים מסוג בר על C57BL מעורבת / 6 × 129Sv רקע קיבלו 5% DSS במי השתייה שלהם במשך שישה ימים. מקרופאגים M1 ו-M2 הוזרקו IV על 0 ימים ו -4 במהלך הטיפול DSS. (א) נקודתיים הוסרו קבועה, וחתכים הוכתמו על ידי אימונוהיסטוכימיה עבור מקרופאגים בוגרים (F4/80) ו סמן מקרופאג M2 (ArgI).Quantitation של מקרופאגים של עכברים שליטה הזריק PBS (C), עכברים שהוזרק עם מקרופאגים M1 (M1 +) ועכברים הזריקו מקרופאגים M2 (+ M2) בוצעו על ידי ספירת התאים מוכתמים חיובי בהגדלה 40 × ב 6 שדות מ -3 חלקים / עכבר מ 6 עכברים / קבוצה. הספירה נערך על ידי שני אנשים שהתעוורו למצב ניסיוני. (ב) פעילות המחלה היה פיקוח והבקיע מדי יום במהלך הטיפול היא ציון תוסף על בסיס ירידה במשקל, דימום רקטלי, ועקביות שרפרף קטן. * P <0.05 עבור n = 6 עכברים ב -2 ניסויים בלתי תלויים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

מקרופאגים הם תאים phagocytic כי לשחק תפקיד חשוב במערכת החיסונית. הם אחראים ליזום את התגובה החיסונית המולדת ולכוון את התגובה החיסונית הנרכשת. בדרך כלל, מקרופאגים מופעל קלאסי מופעלים על ידי IFNγ או LPS ואחראים על סילוק פתוגנים גובר תגובה דלקתית 1. לעומת זאת, מקרופאגים מופעל לחילופין מופעלים על ידי IL-4 או IL-13 ו לשחק תפקיד פסולת הדחה שיפוץ רקמות במהלך ברזולוציה של דלקת 1. מקרופאגים מיוחדים במעי לשמור על פעילות bactericidal שלהם, אבל לא לעלות 2 Pro ד...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

אין ניגוד עניינים הצהיר.

תודות

עבודה זו נתמכה על ידי "מענק סיוע למחקר" מ קרוהן קוליטיס קרן של קנדה LMS, אשר נתמכת על ידי האגודה הקנדית לגסטרואנטרולוגיה / הקנדי איגוד הבריאות של מחקר / קרוהן ו קוליטיס קרן פרס החוקר חדש בקנדה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
שם מגיב חברה מספר קטלוגי
Clodronate המכיל ליפוזומים Clodronateliposomes.org
PBS המכיל ליפוזומים Clodronateliposomes.org
סטרילית PBS pH7.4 Invitrogen 14190
IMDM Invitrogen 12440
העובר עגל סרום (FCS) Invitrogen 12483
חומצה אצטית BDH Aristar BDH3092-500MLP
Monothioglycerol (MTG) סיגמא 96-275
Recombinant Murine MCSF Stemcell טכנולוגיות 02951
רקומביננטי Murine GM-CSF Stemcell טכנולוגיות 02935
רקומביננטי Murine IL-3 Stemcell טכנולוגיות 02903
רקומביננטי Murine IFNγ Stemcell טכנולוגיות 02746
רקומביננטי IL-4 Murine Stemcell טכנולוגיות 02714
תא דיסוציאציה מאגר Invitrogen 13150-016
להלשין anti-F4/80 נוגדן עבד Serotec MCA497GA
עכבר נגד ArgI נוגדן BD מעבדות התמרה 610708

טבלה 1. ריאגנטים המסוים של פרוטוקול זה.

מקורות

  1. Gordon, S. Alternative activation of macrophages. Nat. Rev. Immunol. 3, 23-35 (2003).
  2. Rescigno, M., Lopatin, U., Chieppa, M. Interactions among dendritic cells, macrophages, and epithelial cells in the gut: implications for immune tolerance. Curr. Opin. Immunol. 20, 669-675 (2008).
  3. Heinsbroek, S. E., Gordon, S. The role of macrophages in inflammatory bowel diseases. Expert Rev. Mol. Med. 11, e14(2009).
  4. Collins, S. M., Piche, T., Rampal, P. The putative role of inflammation in the irritable bowel syndrome. Gut. 49, 743-745 (2001).
  5. Maeda, S. Colon cancer-derived factors activate NF-kappaB in myeloid cells via TLR2 to link inflammation and tumorigenesis. Mol. Med. Report. 4, 1083-1088 (2011).
  6. van Rooijen, N., van Kesteren-Hendrikx, E. Clodronate liposomes: perspectives in research and therapeutics. J. Liposome Res. 12, 81-94 (2002).
  7. Hunter, M. M. In vitro-derived alternatively activated macrophages reduce colonic inflammation in mice. Gastroenterology. 138, 1395-1405 (2010).
  8. Weisser, S. B. SHIP-deficient, alternatively activated macrophages protect mice during DSS-induced colitis. J. Leukoc. Biol. 90, 483-492 (2011).
  9. Qualls, J. E., Kaplan, A. M., van Rooijen, N., Cohen, D. A. Suppression of experimental colitis by intestinal mononuclear phagocytes. J. Leukoc. Biol. 80, 802-815 (2006).
  10. Van Rooijen, N., Sanders, A. Liposome mediated depletion of macrophages: mechanism of action, preparation of liposomes and applications. J. Immunol. Methods. 174, 83-93 (1994).
  11. Smith, P. Infection with a helminth parasite prevents experimental colitis via a macrophage-mediated mechanism. J. Immunol. 178, 4557-4566 (2007).
  12. van Rooijen, N., Hendrikx, E. Liposomes for specific depletion of macrophages from organs and tissues. Methods Mol. Biol. 605, 189-203 (2010).
  13. Kataoka, K. The roles of vitreal macrophages and circulating leukocytes in retinal neovascularization. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 52, 1431-1438 (2011).
  14. Weisser, S. B. Alternative activation of macrophages by IL-4 requires SHIP degradation. Eur. J. Immunol. 41, 1742-1753 (2011).
  15. Cailhier, J. F. Conditional macrophage ablation demonstrates that resident macrophages initiate acute peritoneal inflammation. J. Immunol. 174, 2336-2342 (2005).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

גלה מאמרים נוספים

דילול מקרופגיםליפוזומים של קלודרונאטשחזור מקרופגיםמקרופגים מקוטביםשאיבות ממחוגה של מחולל השבביםהעברה אדופטיביתמודל קוליטיס DSSציטומטריית זרימהWestern Blotאימונוהיסטוכימיה
דלדול המשאבים ואת הכינון מחדש של מקרופאגים בעכברים
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.