הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

טיפול במומי Osteochondral במפרק הברך של הארנב על ידי השתלה של תאי גזע mesenchymal אלוגנאית בקרישי הפיברין

17.2K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/4423

⸱

21 במאי 2013

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Orthopaedic Sports Medicine, Klinikum rechts der Isar der Technischen Universität München, 2Department of Radiology, Klinikum rechts der Isar der Technischen Universität München, 3Institute of Experimental Oncology and Therapy Research, Klinikum rechts der Isar der Technischen Universität München, 4Department of Radiology, Uniklinik Köln

* These authors contributed equally

במאמר זה

סיכום

טכניקה ניסויית לטיפול בפגמי osteochondral במפרק הברך של הארנב מתוארת. ההשתלה של תאי גזע מזנכימיים אלוגניות לפגמי osteochondral מספקת פיתוח מבטיח בתחום הנדסת רקמות. הכנת הפיברין-תא קרישים במבחנה מציע שיטה סטנדרטית להשתלה.

תקציר

הטיפול בפגמים אוסטאו-כונדראליים במפרקים מהווה אתגר עבור רופאים כבר שנים רבות. הבנה טובה יותר של האינטראקציות בין הסחוס המפרקי לעצם הסוב-כונדרלית בשנים האחרונות הובילה להגברת תשומת הלב לשיקום של היחידה האוסטאו-כונדרלית כולה. בהשוואה לנגעים כונדרליים, רגנרציה של פגמים אוסטאו-כונדרליים היא מורכבת הרבה יותר ומהווה אתגר כירורגי וטיפולי גדול בהרבה. הרקמה הפגועה כוללת לא רק את שכבת הסחוס השטחית אלא גם את העצם הסוב-כונדרלית. עבור נזק אוסטאו-כונדרלי עמוק, כפי שקורה למשל ב-osteochondrosis dissecans, יש להחליף את מלוא עובי הפגם כדי לשקם את שטח הפנים של המפרק 1. הליכים טיפוליים מתאימים חייבים להתחשב בשני רקמות שונות אלו ובפוטנציאל הריפוי הפנימי השונה שלהן 2. בעשורים האחרונים הופיעו מספר אפשרויות טיפול כירורגי שכבר הוכחו קלינית 3-6.

שתלים אוסטאו-כונדראליים (osteochondral) אוטולוגיים או אלוגנאיים מורכבים מסחוס מפרקי ומעצם סוב-כונדרלית, ומאפשרים את החלפתו של היחידה האוסטאו-כונדרלית כולה. הפגמים ממולאים בשתלים אוסטאו-כונדראליים גליליים, שמטרתם לספק משטח מכוסה בסחוס היאליני תואם 3,7,8. החסרונות כוללים כמות מוגבלת של שתלים זמינים, תחלואה באתר התרומה (בשתלים אוטולוגיים) וחוסר התאמה של המשטח; לפיכך, יישומה של שיטה זו מוגבל במיוחד עבור פגמים גדולים.

גישות חדשות בתחום הנדסת הרקמות פתחו אפשרויות מבטיחות לטיפול רגנרטיבי אוסטוכונדרלי. השתלת כונדרוציטים אוטולוגיים סימנה את הגישה הביולוגית הראשונה המבוססת על תאים לטיפול בנגעי סחוס בעובי מלא, וכיום היא מבוססת ברחבי העולם עם תוצאות קליניות טובות גם 10 עד 20 שנים לאחר ההשתלה 9,10. עם זאת, נכון להיום, טכניקה זו אינה מתאימה לטיפול בכל סוגי הנגעים, כגון פגמים עמוקים המערבים את העצם הסוב-כונדרלית 11.

טכניקת ה-sandwich משלבת השתלת עצם עם גישות עכשוויות בהנדסת רקמות 5,6. נראה כי שילוב זה מסוגל להתגבר על המגבלות הנראות בהשתלות אוסטוכונדרליות לבדן. לאחר השתלת עצם אוטולוגית לאזור הפגם סובכונדרלי, תפרו מעליו ממברנה הזורעת כונדרוציטים אוטולוגיים, אשר מסייעת להתאמה של טופולוגיית השתל לאתר הפגיעה. כמובן, שחזור העצם המקדים דורש זמן ניתוחי נוסף ולעתים אף ניתוח נוסף. יתרה מכך, נכון להיום, חסרים נתונים ארוכי טווח 12.

הנדסת רקמות ללא השתלת עצם נוספת שואפת לשחזר את המבנה והתכונות המורכבים של סחוס מפרקי טבעי באמצעות הפוטנציאל הכונדרוגני והאוסטאוגני של התאים המושתלים. עם זאת, שוב, בדרך כלל רק רקמת הסחוס היא זו המשתקמת במידה זו או אחרת. נזק אוסטאוכונדרלי נוסף דורש טיפול משלים ספציפי. על מנת להשיג רגנרציה של המבנה רב-השכבתי של פגמים אוסטאוכונדרליים, מוצרי הנדסת רקמות תלת-ממדיים המוזרעים בתאים אוטולוגיים/אלוגנאיים עשויים לספק יכולת רגנרציה טובה 11.

בנוסף לכונדרוציטים אוטולוגיים, תאי גזע מזנכימליים (MSC) נראים כחלופה אטרקטיבית לפיתוח רקמת סחוס בעובי מלא. במספר רב של מחקרים פרה-קליניים in vitro ו-in vivo, תאי גזע מזנכימליים הפגינו פוטנציאל רגנרטיבי מצוין לרקמות 13,14. היתרון המשמעותי של תאי גזע מזנכימליים, במיוחד עבור טיפול בפגמים אוסטאוכונדרליים, הוא יכולתם להבדיל לאוסטאוציטים כמו גם לקונדרוציטים. לפיכך, הם מאפשרים פוטנציאלית רגנרציה רב-שכבתית של הפגם.

בשנים האחרונות פותחו והוערכו מספר פיגומים בעלי פוטנציאל לרגנרציה אוסטוכונדרלית, עם תוצאות ראשוניות מבטיחות 1,15-18. יתרה מכך, דבק פיברין כנשא תאים הפך לאחת הטכניקות המועדפות בתיקון סחוס ניסיוני, וכבר נעשה בו שימוש מוצלח במספר מחקרי בעלי חיים 19-21 ואפילו בניסויים ראשונים בבני אדם 22.

הפרוטוקול הבא ידגים טכניקה ניסויית לבידוד תאי גזע מזנכימליים ממוח העצם של ארנב, לצורך השכחה (proliferation) ע후ונה בתרבית תאים ולהכנת מודל in vitro סטנדרטי של קרישי פיברין-תאים. לבסוף, תתואר טכניקה להשתלה של קרישי פיברין-תאים שהוכנו מראש לתוך פגמים אוסטוכונדרליים מלאכותיים במפרק הברך של הארנב.

פרוטוקול

הכנת א ארנב תורם לבידוד של תאי גזע mesenchymal (חדר ניתוח)

  1. תאים מבודדים מזכר לבן (NZW) ארנבי ניו זילנד בגיל 4 חודשים וכ 3 ק"ג משקל גוף.
  2. לגרום הרדמה פרופופול על ידי (10 מ"ג / ק"ג משקל הגוף ד) ותקריב עם נתרן pentobarbital (משקל גוף מ"ג / ק"ג 100 ד).
  3. לגלח את הפרווה מגפיים אחוריות, גב ובטן עם גוזז חשמלי ולשאוב את הפרווה.
  4. לחטא את האזור המגולח ביסודיות עם אתנול 70%.
  5. השתמש במלקחיים בוטים, מספריים חדים (או סכין מנתחים) וחותכים לרקמת עצם ורצועות.
  6. עושה חתך לאורך משטח הגולגולת של הרגל והעגל.
  7. משקף עור ורקמה התת עורית או על ידי נתיחה חדה או קהה.
  8. שרירים ורצועות נפרדים מעצם השוק וירך. שמור על קיצוצים כקרובים לעצם ככל האפשר כדי להפוך את חיתוך נקי. אל תפריד בין עצם ירך מעצם השוק בשלב זה.
  9. חותכים through מפרק הירך להפריד את ראש עצם הירך ממרחשת.
  10. לרומם מורכב השוקה-הירך.
  11. השתמש בלהב סכין המנתחים כדי לגרד את כל רקמות רכות שנותרו מהעצמות או לשפשף את העצמות עם רקמות בד סטריליים. בשלב זה, עצם הירך ועצם השוק עדיין מחוברות.
  12. הסר את פיקת הברך על ידי חיתוך, ואז לחתוך רצועות מפרק הברך לעצמות נפרדות סוף סוף.
  13. ספריי הופרדו עצמות עם 70% אתנול, לתת אוויר יבש ולמקם כל עצם לתוך צינור צנטריפוגה 50 מ"ל עם תרבית תאים בינוניות (DMEM + 1% פניצילין סטרפטומיצין / (עט / סטרפטוקוקוס)) כדי לשמור עליהם לח.
  14. לעבור עכשיו מתחת למכסת מנוע מינרית סטרילי תרבית תאי זרימה.

ב 'פלאשינג של MSC ארנב מעצמות והרחבה (הוד תרבות תאים)

  1. לאסוף עצמות מצינורות ולמקם אותם לתוך 150 מנות מ"מ באמצעות מלקחיים סטריליים.
  2. להסיר גם עצם מסתיים עם מסור סטרילי וחתיכות לעבור למנות חדשות 150 מ"מ.
  3. ממלאי מזרק 10 מ"ל עם Mediאום (DMEM), לצרף מחט מד 18 ולהכניס לתוך הפתח של מח העצם.
  4. לאחר מכן, יש לשטוף את חלל מח עם מדיום כדי לשטוף את מח העצם לתוך הצלחת. לאחר מכן, יש לשטוף מהקצה השני, אם אפשר. במידת צורך, ראה את יותר מהקצוות. אם צריכה לשבור עצמות, פשוט לשטוף את החלק הפנימי של העצם.
  5. לשאוב השעיה מדיום סלולרי לתוך המזרק ולשטוף את מח העצם שוב ושוב עד שההשעיה היא צף חופשי דרך חלל מח העצם ולא עצם נוסף מח קרישים יופיעו.
  6. ברגע שמוח עצם שנאסף מכל העצמות, לשבש את גושי מח על ידי עובר דרך מחט מד 18: למלא מזרק עם המחט מחוברת ולאלץ החוצה לתוך מדיום.
  7. לאחר מכן, לסנן את ההשעיה דרך פילטר תא לתוך צינור 50 מ"ל. על מנת למנוע אובדן תא, לשטוף 2x צלחת התרבות עם מדיום 10 מ"ל ולסנן גם כן.
  8. צנטריפוגה השעיה על XG 500 במשך 5 דקות ב RT.
  9. הסר supernatant ו resuspend התא פלet במדיום 10 מ"ל (עט% + 1 / סטרפטוקוקוס DMEM).
  10. תאי דם נפרדים מתאי דם היקפיים (mononuclear PBMC) ותאי גזע mesenchymal (MSC) באמצעות פתרון הפרדת Biocoll.
  11. מלא 5 מ"ל של Biocoll הפרדת פתרון לתוך שפופרת 15 מ"ל ולהוסיף 5 מ"ל של השעיה תא בזהירות על גבי וצנטריפוגות ב XG 800 עבור 20 דקות ב RT (ללא בלמים).
  12. תוצאות אפשריות ראו איור 1: צפוף יותר מאשר להיות Biocoll, דם משקע תאים אדום בתחתית ואילו תאי גזע PBMC וmesenchymal להישאר בממשק.
  13. בזהירות להסיר את הממשק לתוך צינור 15 מ"ל ולשטוף עם 5 מ"ל PBS.
  14. צנטריפוגה כמתואר בשלב 22, resuspend ב 5 מ"ל PBS ולחזור על 2-3x.
  15. ואז, שוב בצנטריפוגה XG 350 עבור 10 דקות ב RT (עם בלמים).
  16. Resuspend במדיום 10 מ"ל ולספור תאים בhemocytometer.
  17. פלייט תאים בצפיפות זריעה ראשונית של כ 5 x 10 6 מנות ב -150 מ"מ.
  18. לאחר 2-3 ימים, מחדשלהעביר תאים שאינם חסיד. ייתכן שתצטרך לשטוף עם PBS הראשון על מנת להסיר תא פסולת. הוסף בינונית מלא טרי (DMEM + עגל עוברי 10% בסרום (FCS) + 1% עט / סטרפטוקוקוס) לאחר מכן.
  19. להאכיל את תאים כל 3-4 ימים (איור 2).
  20. לאחר 5-10 ימים, מעבר התאים בפעם הראשונה.

הכנת ג קרישי הפיברין במבחנה

  1. ביום של השתלה, לשחרר תאים חסיד מצלוחיות / מנות על ידי חשיפת 3 דקות-0.25% טריפסין-EDTA. תפסיק trypsinization ידי הוספה בינונית מלאה.
  2. הפץ תאים בצינור פלקון 50 מ"ל ולשטוף אותם פעמיים עם PBS.
  3. לקבוע כדאיות תא ומספרים על ידי צביעת trypan הכחולה.
  4. הוסף 50,000 תאים / צינור microcentrifuge ולאסוף כדורים על ידי צנטריפוגה בXG 500 במשך 5 דקות ב RT. הכן mastermix לקריש אחד לפחות יותר במידת צורך.
  5. Resuspend התא גלולה ב 17 PBS μl ולערבב 25 μl של הרכיב של פיברינוגן TissuCOL-קיט עם ההשעיה MSC μl זה 17.
  6. קח צלחת סטרילית עם חורים שנקדחו מראש (3x3.6 מ"מ) בהתאם לחורי מקדח in vivo (איור 3).
  7. ראשית, לחסן 4 פתרון תרומבין μl (500 IU / מ"ל) לתוך חור אחד, ואחריו תוספת מיידית של 42 שוב 4 פתרון תרומבין μl על גבי תאי פיברינוגן השעיה וμl. אין לערבב את ההשעיה, כדי למנוע קרישה בקצה פיפטה. ראשית, נפח μl 50 של פיברינוגן-תא ההשעיה pipetted יבלוט שפה של החורים שנקדחו מראש ללא מסה בשל מתח הפנים. עם זאת, לאחר קרישה מלאה (לאחר 60 דקות) הקריש הוא מתכווץ ונכנס לתוך החור שנקדח מראש.
  8. הסר את הקריש באמצעות מלקחיים בזהירות ומקום קהים לתוך צינור microcentrifuge עם PBS. להכין 2 קרישים / בעלי חיים.
  9. קח את קרישים לחדר הניתוח.

ההשרשה ד תאי גזע mesenchymal אלוגנאית בקרישי הפיברין

  1. לגרום הרדמה לארנב (NZW, זכר, 3.5-4.0 ק"ג משקל גוף, ישן 5-6 חודשים) על ידי הזרקה של IV פרופופול (10 משקל גוף מ"ג / ק"ג).
  2. לגלח את הברך להיות מופעלת על עם גוזז חשמלי וואקום הפרווה. כל ההליכים בשם לפני שמבוצעים בחדר ניתוח בהכנה, כדי למנוע זיהום של סביבת סטרילית של חדר הניתוח.
  3. לאחר אינטובציה, לשמור על הרדמה עם 1.5 מ"ג / ק"ג / דקה propofol ו0.05 מ"ג / ק"ג / פנטניל דקות לוריד. לפקח הרדמה באמצעות capnography, oximetry דופק ודופק.
  4. לחטא את הברך מגולח ביסודיות ולכסות את שאר ארנב עם רוטב סטרילי.
  5. למשש את פיקת הברך ולבצע חתך בעור המדיאלי לפיקת הברך.
  6. פתח את מפרק הברך על ידי arthrotomy parapatellar המדיאלי בתנאים סטריליים. נסו להימנע מחיתוך כל כלי דם שטחיים קטנים.
  7. לעקור את פיקת הברך רוחבית (איור 4).
  8. לאחר inspection של מפרק הברך לכל נגעי סחוס נלווים או סטיות משותפות, ליצור שני פגמי osteochondral (3 מ"מ עמוק, דמות בצורת שמונה) בחריץ trochlear עם מקדחת הפעלה אוויר סטרילי (3.6 מ"מ קוטר) עם עצירה-מכשיר (איור 5).
  9. נקה את הפגמים ולשטוף אותם עם תמיסת מלח סטרילית.
  10. לפני ההשתלה, למלא 20 μl של דבק הפיברין לפגמים ולהפיץ אותם באופן שווה על החלק התחתון של הפגם.
  11. ואז להשתיל את קרישי עיתונות מצויד לתוך הפגם בצורת שמונה הדמות.
  12. לאחר קרישה, מיקום מחדש של הפיקה בתוך חריץ trochlear ולכופף ולמתוח את הברך כמה פעמים.
  13. לעקור את פיקת הברך רוחבית שוב ולבדוק אם פיברינוגן לתא, לקרישים עדיין נמצאים במקום.
  14. החלף את פיקת הברך שוב ולסיים את המבצע עם סגירת פצע בשכבות עם תפרי כפתור אחת (Vicryl 4-0) ותפר עורית רציף (Monocryl 4-0) (שניהם עם תפר נספגחומר).
  15. לבסוף, לאטום את הפצע עם תרסיס הלבשה חדירה לאדי מים.
  16. לטיפול שלאחר ניתוח, הפצע הוא בדק ביום למשך 7 ימים. הארנבונים מקבלים לשיכוך כאבים שלאחר ניתוח Carprofen 4 מ"ג / ק"ג SC כל 24 שעות (במשך 4 ימים) וBuprenorphin 0.03 מ"ג / ק"ג SC כל 12 שעות (עבור 2.5 ימים). ייצוב של הברך (רוטב למשל) הוא לא הכרחי.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

הטכניקה כירורגית תאר מאפשרת בידוד מוצלח והשתלה של תאי גזע מזנכימיים אלוגניות לפגם osteochondral מלאכותי. ההתקנה הניסיונית הביאה לשילוב מוצלח של השתל לתוך הסחוס שמסביב.

הפגם היה מלא על ידי רקמת תיקון עם מאפיינים דומים biomechanical ועמידות דומה בהשוואה לסחוס שמסביב. הפיברין-תא הקריש הוכן במבחנה על צלחת סטרילית עם חורים שנקדחו מראש, אשר היו באותו גודל כמו פגם osteochondral (איור 3). כתוצאה...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

בשנים האחרונות, את האפשרות של טיפול במומים מורכבים מפרק osteochondral - כגון אלה הנובעים מdissecans osteochondritis, נמק וטראומה - עם הנדסת רקמות גישות הפכה ליותר ויותר אטרקטיבי. בגופים פתולוגיים שהוזכרו קודם לכן, נזק לרקמות משתרעת על עצם subchondral וכוללת שתי רקמות המתאפיינות ביכולות ריפוי פנימיות שונות 1. יש עניין גובר בתפקידה של עצם subchondral לתהליכים פתוגניים של נזק במפרק osteochondral 11,23. התנאים התפקודיים של סחוס במפרק והעצם התומך אותה מחוברים בחוז...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים אין לחשוף.

תודות

פרויקט זה מומן על ידי אגודת המחקר הגרמני (מענק HE 4578/3-1) וחלקו על ידי האיחוד האירופי FP7-הפרויקט "גמבה" NMP3-SL-2010-245,993.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
DMEMBiochrom AGF 0415
FCSPAN Biotech GmbH0401
פרופופול (Propofol)Fresenius Kabi
פניצילין/סטרפטומייציןBiochrom AGA 22101,000 units/10 μg/μl ב-0.9% NaCl
PBS Dulbecco (1X)Biochrom AGL1815
אתנול (70%)Merck KGaA410230
תמיסת טריפאן כחול (0.4%)Sigma-AldrichT8154
תמיסת הפרדה BiocollBiochrom AGL6115תמיסה איזוטונית צפיפות: 1,077 g/ml
Trypsin-EDTA 0.05%Invitrogen GmbH25300-054
פנטניל (Fentanyl)DeltaSelectGmBH1819340
תמיסת NaCl (0.9%)BBraun8333A193
מזרקים (Injekt)BBraun4606108V
מחטים (Sterican)BBraun4657519
פינצטות (קהה/חדה)Aesculap
מספרייםAesculap
סכיני ניתוחFeather Safety Razor Co02.001.30.022
פיפטות למחקרEppendorf
קוצץ עצםAesculap
צלוחיות לתרבית רקמות 100 mm/150 mmTPP AG93100/93150שטח גידול 60.1 mm2/147.8 mm2
בקבוקי תרבית רקמות 25/75 mm2TPP AG90025/9007525 mm2, 75 mm2
מבחנות צנטריפוגה (50 ml)TPP AG91050סטריליזציה בגמא
אינקובטור CO2Forma Scientific Inc.
מנדף זרימה למינרית לתרבית תאים Hera SafeHeraeus Instruments
מסור סטריליAesculap
צנטריפוגה Megafuge 2.0 RHeraeus Instruments
המציטומטרBrand GmbH+Co KG717810Neubauer
מקדחה פנאומטיתAesculap
ערכה TISSUCOL-Kit 1.0 ml ImmunoBaxter2546648
חוטי תפירה (4-0 Monocryl, 4-0 Vicryl)Ethicon
חבישת ספריי (OpSite)Smith&Nephew66004978חדירה לאדי מים

מקורות

  1. Kon, E., et al. Novel nano-composite multilayered biomaterial for osteochondral regeneration: a pilot clinical trial. The American Journal of Sports Medicine. 39, 1180-1190 (2011).
  2. Kon, E., et al. Orderly osteochondral regeneration in a sheep model using a novel nano-composite multilayered biomaterial. Journal of Orthopaedic Research: Official Publication of the Orthopaedic Research Society. 28, 116-124 (2010).
  3. Hangody, L., et al. Autologous osteochondral grafting--technique and long-term results. Injury. 39, 32-39 (2008).
  4. Marcacci, M., et al. Arthroscopic autologous osteochondral grafting for cartilage defects of the knee: prospective study results at a minimum 7-year follow-up. The American Journal of Sports Medicine. 35, 2014-2021 (2007).
  5. Ochs, B. G., et al. Remodeling of articular cartilage and subchondral bone after bone grafting and matrix-associated autologous chondrocyte implantation for osteochondritis dissecans of the knee. The American Journal of Sports Medicine. 39, 764-773 (2011).
  6. Aurich, M., et al. Autologous chondrocyte transplantation by the sandwich technique. A salvage procedure for osteochondritis dissecans of the knee. Unfallchirurg. 110, 176-179 (2007).
  7. Williams, R. J. 3rd, Ranawat, A. S., Potter, H. G., Carter, T., Warren, R. F. Fresh stored allografts for the treatment of osteochondral defects of the knee. The Journal of Bone and Joint Surgery. American Volume. 89, 718-726 (2007).
  8. Szerb, I., Hangody, L., Duska, Z., Kaposi, N. P. Mosaicplasty: long-term follow-up. Bull. Hosp. Jt. Dis. 63, 54-62 (2005).
  9. Brittberg, M., et al. Treatment of deep cartilage defects in the knee with autologous chondrocyte transplantation. N. Engl. J. Med. 331, 889-895 (1994).
  10. Peterson, L., Vasiliadis, H. S., Brittberg, M., Lindahl, A. Autologous chondrocyte implantation: a long-term follow-up. Am. J. Sports Med. 38, 1117-1124 (2010).
  11. Gomoll, A. H., et al. The subchondral bone in articular cartilage repair: current problems in the surgical management. Knee Surg. Sports Traumatol. Arthrosc. 18, 434-447 (2010).
  12. Steinhagen, J., et al. Treatment of osteochondritis dissecans of the femoral condyle with autologous bone grafts and matrix-supported autologous chondrocytes. Int. Orthop. 34, 819-825 (2010).
  13. Guo, X., et al. Repair of large articular cartilage defects with implants of autologous mesenchymal stem cells seeded into beta-tricalcium phosphate in a sheep model. Tissue Eng. 10, 1818-1829 (2004).
  14. Centeno, C. J., et al. Increased knee cartilage volume in degenerative joint disease using percutaneously implanted, autologous mesenchymal stem cells. Pain Physician. 11, 343-353 (2008).
  15. Niederauer, G. G., et al. Evaluation of multiphase implants for repair of focal osteochondral defects in goats. Biomaterials. 21, 2561-2574 (2000).
  16. Nagura, I., et al. Repair of osteochondral defects with a new porous synthetic polymer scaffold. J. Bone. Joint Surg. Br. 89, 258-264 (2007).
  17. Schlichting, K., et al. Influence of scaffold stiffness on subchondral bone and subsequent cartilage regeneration in an ovine model of osteochondral defect healing. The American Journal of Sports Medicine. 36, 2379-2391 (2008).
  18. Schagemann, J. C., et al. Cell-laden and cell-free biopolymer hydrogel for the treatment of osteochondral defects in a sheep model. Tissue Engineering. Part A. 15, 75-82 (2009).
  19. Vogt, S., et al. The influence of the stable expression of BMP2 in fibrin clots on the remodelling and repair of osteochondral defects. Biomaterials. 30, 2385-2392 (2009).
  20. Schillinger, U., et al. A fibrin glue composition as carrier for nucleic acid vectors. Pharm. Res. 25, 2946-2962 (2008).
  21. Ahmed, T. A., Giulivi, A., Griffith, M., Hincke, M. Fibrin glues in combination with mesenchymal stem cells to develop a tissue-engineered cartilage substitute. Tissue Engineering. Part A. 17, 323-335 (2011).
  22. Haleem, A. M., et al. The Clinical Use of Human Culture-Expanded Autologous Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells Transplanted on Platelet-Rich Fibrin Glue in the Treatment of Articular Cartilage Defects: A Pilot Study and Preliminary Results. Cartilage. 1, 253-261 (2010).
  23. Pape, D., Filardo, G., Kon, E., van Dijk, C. N., Madry, H. Disease-specific clinical problems associated with the subchondral bone. Knee Surg Sports Traumatol. Arthrosc. 18, 448-462 (2010).
  24. Shirazi, R., Shirazi-Adl, A. Computational biomechanics of articular cartilage of human knee joint: effect of osteochondral defects. Journal of Biomechanics. 42, 2458-2465 (2009).
  25. Jorgensen, C., Gordeladze, J., Noel, D. Tissue Engineering through autologous mesenchymal stem cells. Curr. Opin. Biotechnol. 15, 406-410 (2004).
  26. Chen, F. H., Tuan, R. S. Mesenchymal stem cells in arthritic diseases. Arthritis Res. Ther. 10, 223(2008).
  27. Le Blanc, K., Tammik, C., Rosendahl, K., Zetterberg, E., Ringden, O. HLA expression and immunologic properties of differentiated and undifferentiated mesenchymal stem cells. Exp. Hematol. 31, 890-896 (2003).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

טיפול במומי Osteochondral במפרק הברך של הארנב על ידי השתלה של תאי גזע mesenchymal אלוגנאית בקרישי הפיברין
צור קשר
המלצה לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

2026 © זכויות יוצרים MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.