מאמר שיטה

עיצוב וניתוח של התנהגות העדפת טמפרטורה והשעון הביולוגי שלה בדרוסופילה

DOI:

10.3791/51097

⸱

13 בינואר 2014

 ,  , 
1The Visual Systems Group, Division of Pediatric Ophthalmology, Cincinnati Childrens Hospital Medical Center, 2PRESTO, JST

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

לאחרונה זיהינו תפוקה צירקדית Drosophila הרומן, קצב העדפת טמפרטורה (TPR), שבו הטמפרטורה המועדפת זבובים עולה במהלך היום ויורד במהלך הלילה. TPR מוסדר באופן עצמאי מתפוקה צירקדית אחרת, פעילות לוקומוטורית. כאן אנו מתארים את העיצוב והניתוח של TPR בדרוסופילה.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

השעון הביולוגי מווסת היבטים רבים של החיים, כולל שינה, פעילות לוקומוטורית וטמפרטורת גוף (BTR) מקצבים1,2. לאחרונה זיהינו תפוקה צירקדית Drosophila הרומן, שנקרא קצב העדפת הטמפרטורה (TPR), שבו הטמפרטורה המועדפת זבובים עולה במהלך היום ויורד במהלך הלילה 3. באופן מפתיע, פעילות TPR ו לוקומוטור נשלטים באמצעות נוירונים צירקדיים מובהקים3. פעילות לוקומוטור Drosophila היא תפוקה התנהגותית צירקדית ידועה וסיפקה תרומות חזקות לגילוי גנים ומנגנוני שעון ביולוגיים שמורים רבים של יונקים4. לכן, הבנת TPR תוביל לזיהוי מנגנונים ביולוגיים מולקולריים ותאיים לא ידועים עד כה. כאן, אנו מתארים כיצד לבצע ולנתח את מבחני TPR. טכניקה זו לא רק מאפשרת לנתח את המנגנונים המולקולריים והנוירונים של TPR, אלא גם מספקת תובנות חדשות על המנגנונים הבסיסיים של תפקודי המוח המשלבים אותות סביבתיים שונים ומווסתים התנהגויות של בעלי חיים. יתר על כן, הנתונים שפורסמו לאחרונה שלנו מראים כי TPR לטוס מניות תכונות עם יונק BTR3. Drosophila הם ectotherms, שבו טמפרטורת הגוף מוסדר בדרך כלל התנהגותית. לכן, TPR היא אסטרטגיה המשמשת ליצירת טמפרטורת גוף קצבית בזבובים אלה5-8. אנו מאמינים כי חקירה נוספת של Drosophila TPR יקל על אפיון המנגנונים שבבסיס בקרת טמפרטורת הגוף בבעלי חיים.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

טמפרטורה היא רמז סביבתי בכל מקום. בעלי חיים מפגינים מגוון התנהגויות על מנת למנוע טמפרטורות מזיקות ולחפש טמפרטורות נוחות. Drosophila להפגין התנהגות העדפת טמפרטורה חזקה6,7. כאשר זבובים משתחררים לתוך שיפוע טמפרטורה מ 18-32 מעלות צלזיוס, הזבובים להימנע הן טמפרטורות חמות וקרות ולבסוף לבחור טמפרטורה מועדפת של 25 מעלות צלזיוס בבוקר3. חיישני הטמפרטורה החמים הם קבוצה של נוירונים תרמוסנסוריים, נוירונים AC, אשר מבטאים Drosophila פוטנציאל קולטן ארעי (TPR) ערוץ, TRPA16,9. חיישני הטמפרטורה הקרה ממוקמים בקטעי האנטנה השלישית, שכן בלימת מקטעי האנטנה השלישית גורמת לחוסר הימנעות טמפרטורה קרה6. לאחרונה, חלבון TRPP Brivido (Brv) זוהה10. מכיוון ש-Brv מתבטא בקטעי האנטנה השלישית ומתווך בזיהוי קר, Brv היא מולקולת חישה קרה אפשרית, שהיא קריטית להתנהגות העדפת הטמפרטורה. לסיכום, הזבובים משתמשים בשני חיישני טמפרטורה אלה כדי למנוע את הטמפרטורות החמות והקרות ולמצוא טמפרטורה מועדפת.

בעוד יונקים ליצור חום כדי לווסת את טמפרטורת הגוף שלהם, ectotherms בדרך כלל להתאים את טמפרטורות הגוף שלהם לטמפרטורתהסביבה 11. כמה ectotherms ידועים להפגין התנהגות TPR יומי אשר הוא האמין להיות אסטרטגיה עבור ectotherms לווסת BTR שלהם12. כדי לקבוע אם הזבובים הציגו TPR, חזרנו על ניתוח התנהגותי העדפת הטמפרטורה בנקודות שונות במהלך טווח של 24 שעות. מצאנו כי Drosophila התערוכה TPR יומי, אשר נמוך בבוקר וגבוה בערב ועוקב אחר דפוס דומה לזה של BTR בבני אדם13.

ב Drosophila, ישנם ~ 150 נוירונים שעון במוח. נוירוני השעון המווסתים את פעילות הלוקומוטור נקראים מתנדים M ו- E. עם זאת, מעניין, מתנדים M ו- E אינם מווסתים TPR, במקום זאת, הראינו כי נוירונים שעון DN2 במוח לווסת TPR אבל לא פעילות לוקומוטור. נתונים אלה מצביעים על כך ש- TPR מוסדר באופן עצמאי מפעילות לוקומוטור. יש לציין, BTR יונקים מוסדר גם באופן עצמאי מפעילות לוקומוטור. מחקרי אבלציה בחולדות מראים כי BTR נשלטת באמצעות נוירונים SCN ספציפיים כי היעד קבוצה שונה של נוירונים באזור subparaventricular מאלה השולטים פעילות לוקומוטור14. לכן, הנתונים שלנו בוחנים את האפשרות כי BTR יונקים TPR לטוס נשמרים מבחינה אבולוציונית3, שכן הן לטוס TPR ו BTR יונקים התערוכה ביולוגית שעונים תלויי טמפרטורה, אשר מוסדר באופן עצמאי מפעילות לוקומוטור.

כאן, אנו מתארים את הפרטים של איך לנתח את TPR מבחני התנהגות ב Drosophila. שיטה זו מאפשרת חקירה של לא רק המנגנון המולקולרי והמעגלים העצביים של TPR, אלא גם כיצד המוח משלב רמזים סביבתיים שונים ושעונים ביולוגיים פנימיים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. הכנת זבובים

  1. ניסויים בחושך בהיר (LD)
    1. העלה זבובים באינקובטורים (25 °C/40-60% לחות יחסית (RH)) תחת אור 12 שעות / כהה 12 שעות (LD) מחזורים. עוצמת האור של האינקובטורים היא ~ 500-1,000 לוקס.
    2. שתי אינקובטורים נחוצים כדי להשלים את מבחני ההתנהגות על פני תקופה של 24 שעות. שתי האינקובטורים צריכים להיות אור לתכנות עם פונקציות ON OFF. הם צריכים גם דלתות מוצקות שאינן חדירות לאור(כלומר אין זכוכית או פרספקס).
      הערה: חממה אחת צריכה להיות מוגדרת חממה "יום" ולהגדיר מחזור LD של 12 שעות אור 12 שעות כהה. החממה השנייה צריכה להיות מוגדרת חממה "לילה" ולהגדיר את ההופכי של הראשון עם 12 שעות כהה ואחריו אור 12 שעות. חממת הלילה חייבת להיות ממוקמת בחדר הנגיש בחושך, באופן כזה זבובים חווים תנאי לילה ניתן לגשת בקלות לניסויים.
    3. מניחים את בקבוקוני הזבוב באינקובטורים ביום או בלילה. לאסוף זבובים שזה עתה בקעו בקבוקון טרי, 20-30 לכל מבחנה ולשמור באותה אינקובטור במשך 2-3 ימים.
    4. לאחר 2-3 ימים, יש להשתמש בזבובים לבדיקה התנהגותית של העדפת הטמפרטורה.
      1. לניסויי יום (זמן צייטגבר (ZT) 0-12), יש לאסוף זבובים מהחממה היומית.
      2. ממש לפני הניסויים ההתנהגותיים, הוציאו את בקבוקוני הזבוב שנאספו מהחממה היומית.
      3. לניסויים ליליים (ZT 13-24), יש לאסוף זבובים מהחממה הלילית.
      4. ממש לפני הניסויים ההתנהגותיים, מוציאים את בקבוקוני הזבוב שנאספו מהחממה הלילית, עוטפים בנייר אלומיניום ומניחים בקופסה בחדר החשוך מתחת למנורה אדומה.
        הערה: מכיוון שבדיקה התנהגותית של העדפת הטמפרטורה מתבצעת בחשיכה לניסויי הלילה, יש למנוע חשיפה לאור לזבובים עד לסיום הניסויים ההתנהגותיים.
        הערה: הזבובים לא צריכים להיחשף לפחמן דו חמצני ביום הניסויים הם להתקיים.
  2. ניסויי חושך מתמיד (DD)
    1. יום DD
      1. חממה נוספת נחוצה לניסויי יום DD, שאנו מכנים חממת "מעבר" לשאר כתב היד. חממת המעבר חייבת להיות ממוקמת בחדר הנגיש בחושך, באופן כזה זבובים חווים תנאי DD ניתן לגשת בקלות לניסויים. לוח זמנים קל לדוגמה עבור חממת מעבר ידליק את האור בין השעות 13:00-19:00 ואת האור כבוי בשעה 19:00-13:00(איור 1).
      2. לאסוף את הזבובים אשר גדלו באינקובטור היום. מניחים את בקבוקוני הזבוב באינקובטור המעבר בין 13:00-19:00, כאשר האור דולק. בדרך זו, הזבובים חשופים כראוי לאור עד השעה 19:00, אז האור נכבה.
      3. למחרת, לפני השעה 13:00, בתנאים כהים, מוציאים את בקבוקוני הזבוב מהחממה, עוטפים אותם בנייר אלומיניום ומניחים אותם בקופסה. שמור את הקופסה בכל אינקובטור לעוד יום אחד.
    2. לילה DD
      1. לאסוף את הזבובים אשר גדלו באינקובטור הלילה בחושך תחת מנורה אדומה. או בנוסף לאסוף את הזבובים כאשר אור החממה של הלילה דולק.
      2. לעטוף בקבוקונים שנאספו עם רדיד אלומיניום בחושך בכל פעם שהאורות כבויים ומניחים את הבקבוקונים בקופסה. שמור את התיבה בכל חממה למשך יומיים נוספים(איור 1B).
        הערה: מכיוון שבדיקה התנהגותית של העדפת הטמפרטורה מתבצעת בחשיכה לניסויי הלילה, יש למנוע חשיפה לאור לזבובים עד לסיום הניסויים ההתנהגותיים.
  3. ניסויי אור קבוע (LL)
    1. יום LL
      1. אינקובטור נוסף נחוץ לניסויי יום LL. חממה זו שומרת על מצב LL (25 °C (70 °F, 800 לוקס), עם האור על ברציפות.
      2. לאסוף זבובים אשר גדלו באינקובטור היום. מניחים את בקבוקוני הזבוב באינקובטור LL בכל עת במהלך "היום" שלהם.
    2. לילה LL
      1. לאסוף זבובים אשר גדלו באינקובטור הלילה. מעבירים את בקבוקוני הזבובים מהחממה הלילית לחממה LL בזמן שהאור באינקובטור הלילה דולק.
        הערה: לדוגמה, האור נכבה בשעה 7 בבוקר באינקובטור הלילה. מעבירים את בקבוקוני הזבובים מהחממה הלילית לחממה LL לפני השעה 07:00 ושומרים את הבקבוקונים באינקובטור LL למשך 4 ימים נוספים.
        הערה: ביום 4 בתנאי LL, התנודות של פעילות לוקומוטור מבוטלת15,16, בעוד TPR הוא עדיין מתמשך 3.

2. המנגנון לבדיקה התנהגותית העדפת טמפרטורה

  1. הניחו כיסוי פרספקס (29 ס"מ על 19.2 ס"מ) (איור 4)על לוח אלומיניום.
  2. לפקח על טמפרטורת האוויר בין הצלחת לבין הכיסוי. שש בדיקות טמפרטורה מחוברות בתנוחות שונות בחלק הפנימי של המכסה בתוך אחד הנתיבים(איור 2).
    הערה: ודא שהבדיקות אינן נוגעות בצלחת האלומיניום או בכיסוי הפלקסיגלס. טמפרטורת האוויר צריכה להיות מוגדרת שיפוע מ 18-32 מעלות צלזיוס.
  3. הנח את המנגנון בחדר סביבתי המתוחזק ב 25 °C (65 °F) - 75% RH. צריך לאטום את החדר הזה מכל אור חיצוני. חדר סביבתי מצויד בדרך כלל במאווררים כדי לשמור על טמפרטורה ולחות מסוימות.
    הערה: סביר להניח שהאוויר מהמאוורר מפריע לשיפוע טמפרטורה יציב במנגנון. כדי למנוע זאת, אנו משתמשים בגיליון שקוף המכסה את האזור המקיף את המנגנון.
  4. הכינו מדחום ומד לחות לבדיקת הטמפרטורה והלחות בחדר הסביבתי.
    הערה: אור משפיע על העדפת הטמפרטורה של Drosophila3. אותה עוצמת אור צריכה להיות מסופקת על המנגנון באופן אחיד. עוצמת אורות החדר הסביבתי שלנו היא ~ 800 לוקס.
    הערה: כאשר הניסויים ההתנהגותיים נעשים, למקם צינור מחובר ממיכל CO2 או לספק ליד החור של החלק העליון של המנגנון על מנת להרדים להיפטר הזבובים.

3. הכנת מנגנון לשימוש

  1. הפעל את המנגנון למשך 30 דקות לפחות כדי לקבוע את שיפוע הטמפרטורה כראוי על פני הצלחת (איור 3).
  2. מעיל את הכיסוי של מנגנון ההתנהגות עם דוחה מים כדי למנוע זבובים לטפס על הקירות או התקרה של הכיסוי. לנגב את עודף המים דוחה ולהשאיר את הכיסוי במשך 25-30 דקות לייבוש.
  3. הסר כל עיבוי על צלחת האלומיניום. מניחים את כיסוי הפלקסיגלס על לוח האלומיניום ומאובטחים בשישה מהדקי C(איור 2).
    הערה: חשוב מאוד שהכיסוי יהיה אטום היטב, במידת הצורך ניתן להשתמש בסרט הדבקה כפול.
  4. השאירו את הכיסוי לפחות 15 דקות. שיפוע טמפרטורת האוויר בין צלחת האלומיניום לכיסוי נוצר מ 18-32 מעלות צלזיוס.

4. בדיקת התנהגות העדפת טמפרטורה

  1. העמיסו את הזבובים לחלל שבין לוח האלומיניום לכיסוי הפלקסיגלס של המנגנון דרך חורים קטנים במרכז כל נתיב של העטיפה(איורים 2 ו-4). לכסות את החורים עם תלושי כיסוי כדי למנוע את הזבובים לברוח.
  2. לתנאים האפלים, כבו את כל האורות בחדר הסביבתי. מנורה אדומה יכולה לשמש כאשר הזבובים ממוקמים לתוך המנגנון. ודאו שהזבובים אינם חשופים לאורות מלבד מנורה אדומה עד לסיום הניסויים ההתנהגותיים.
  3. עבור כל ניסיון, השתמש 20-25 זבובים מבוגרים, אשר אין לעשות בהם שימוש חוזר בניסויים הבאים. ההסתעפות ההתנהגותית מבוצעת במשך 30 דקות. צלם כמה תמונות עם או בלי הבזק. היזהר לא לעשות הרבה רעש או כל תנועות פתאומיות במהלך הניסויים.
  4. רשום את הטמפרטורה של כל ששת הבדיקות במנגנון. שימו לב לטמפרטורת החדר, כמו גם ללחות.
  5. הרדמה את הזבובים במנגנון עם גז פחמן דו חמצני, לשחרר את המהדקים, להסיר את כיסוי plexiglass, ולהסיר את הזבובים מהצלחת. לאחר כל ניסוי, הזבובים מושלכים. לנגב כל עיבוי או לחות מהצלחת. החלף את הכיסוי על הצלחת והדק עם המהדקים כהכנה לניסוי הבא.
  6. על מנת לקבל ייצוג של העדפת הטמפרטורה לאורך כל היום, פרק הזמן של 24 שעות מחולק לשמונה אזורי זמן, ארבעה במהלך היום וארבעה בלילה. לדוגמה, אנו משתמשים ב- ZT או CT 1-3, 4-6, 7-9, 10-12, 13-15, 16-18, 19-21 ו- 22-24.
    הערה: מאחר ווריאציות פנוטיפ הנגרמות על-ידי אפקטי מיסוך צפויות מיד לאחר הפעלת האור (ZT0) או כבוי (ZT12), איננו בוחנים את התנהגות העדפת הטמפרטורה בזמנים אלה (ZT או CT 0-1, 11.5-13 ו- 23.5-24). לפחות חמישה ניסויים חייבים להיעשות בכל אזור זמן כדי שהתוצאות יהיו מבוססות סטטיסטית.

5. ניתוח נתונים

  1. חישוב מעבר הטמפרטורה באופן הבא: קבע היכן ממוקמות בדיקות הטמפרטורה בהתבסס על שני הסרגלים הממוקמים בצד העליון והתחתון של כיסוי הפלקסיגלס לאורך הקצוות (איור 2A).
  2. שיפוע הטמפרטורה בין בדיקות הטמפרטורה מוערך להיות ליניארי. בהתבסס על המיקומים של בדיקות הטמפרטורה, כמו גם הטמפרטורות המתועדות המתאימות שלהם, לצייר קווים המייצגים כל דרגה של טמפרטורה במיקום המתאים על התמונות. ספור את מספר הזבובים הממוקמים בכל מרווח מעלות. אל תכלול זבובים על הקירות או על תקרת המכסה.
  3. חשב את אחוז הזבובים בכל טווח טמפרטורות של כל נתיב. טמפרטורה מועדפת ממוצעת מחושבת על-ידי סיכום המוצרים של אחוז הזבובים והטמפרטורה של כל מרווח, כפי שמוצג להלן:
    % של זבובים x 18°C + % זבובים x 19°C + % של זבובים x 20 °C (70 °F) ....+ % של זבובים x 31 °C (69 °F + % של זבובים x 32 °C (69 °F).
  4. חישוב הטמפרטורה המועדפת הממוצעת בכל אזור זמן: התנהגות העדפת טמפרטורה מתבצעת >5 פעמים בכל אזור זמן (ZT 1-3, 4-6, 7-9, 10-12, 13-15, 16-18, 19-21 ו- 22-24). כדי לחשב את הטמפרטורה המועדפת הממוצעת בכל אזור זמן, הטמפרטורה המועדפת הממוצעת של כל ניסיון ממוצעת יחד. קווי השגיאה של s.e.m. שווים לשגיאה בין הניסיונות.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

דוגמה לקצב העדפת הטמפרטורה מוצגת באיור 5. אם הליך ההתנהגות נעשה בהצלחה, הזבובים צריכים להפגין TPR שבו הם מעדיפים טמפרטורה נמוכה בבוקר וטמפרטורה גבוהה יותר בערב. ~ 1-1.5 מעלות צלזיוס עלייה בשעות היום בהעדפת הטמפרטורה יש לצפות במהלך היום, ללא קשר לרקע הגנטי, שכן הראינו כי w1118, yw ו קנטון S זבובים להפגין העדפת טמפרטורה דומה בשעות היום3.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כאן, אנו ממחישים את הפרטים של מנגנון התנהגות העדפת הטמפרטורה וניתוח של התנהגות TPR. דרוזופילה מציגה את המאפיינים הבולטים, החזקים והניתנים לשחזור של TPR הנשלט על ידי השעון. עם זאת, הנתונים שלנו מראים כי לפחות שני גורמים, אור הסביבה וגיל, להפריע באופן משמעותי פנוטיפים התנהגותיים TPR.

אנו מבחינים כי אור משפיע באופן משמעותי על העדפת הטמפרטורה ב Drosophila. זה עולה בקנה אחד עם העובדה כי w1118 זבובים כל הזמן LD מעדיפים טמפרטורות גבוהות יותר בשעות היום מאלה נשמר...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אין מה לחשוף.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אנו מודים לד"ר ארווינתן סמואל ומארק גרשו שעזרו לפתח את הגרסה הראשונית של המנגנון ההתנהגותי ומתיו באטי ששינה את המנגנון ההתנהגותי. מחקר זה נתמך על ידי נאמן גרנט מבית החולים לילדים בסינסינטי, JST / PRESTO, מרץ של דימס ו NIH R01 GM107582 כדי F.N.H.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
Bright Lab Jr. SafelightAmazon#B00013J8UYאור אדום לחדרים חשוכים
Rain Xמוצרידוחה מים: החל את כיסוי הפרספקס
C-Clampהום דיפו
טמפרטורה/מד לחותפישר15-077-963
מכשירי פלטיירTE Technology, Inc.HP-127-1.4-1.15-71P
מדחוםFlukeFluke 52II
ספסל בקר עליוןתעשיות תנור תעשיות5R6-570-15R ו- 5R6-570-24R
בדיקת חיישן טמפרטורהתעשיות תנור תעשיותTR67-32
גנרי 480 וואט ATX ספקמערכת קירור מחשב
MCR220-QP-RES רדיאטור כפול 120 מ"מ עם מאגר מערכת קירורSwiftech
MCP350 משאבת DC 12V בשורהמערכת קירורSwiftech
מצנן נוזלי כרטיס גרפי MCW50מערכת קירור מחשבScythe
Kaze-Jyuni מאוורר SY1225SL12SHמערכת קירורמחשב Crazy PC
SOPUS כוח מחשב מחשב

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Krauchi, K. The thermophysiological cascade leading to sleep initiation in relation to phase of entrainment. Sleep Med. Rev. 11, 439-451 (2007).
  2. Krauchi, K. The human sleep-wake cycle reconsidered from a thermoregulatory point of view. Physiol. Behav. 90, 236-245 (2007).
  3. Kaneko, H., et al. Circadian Rhythm of Temperature Preference and Its Neural Control in Drosophila. Curr. Biol. 22, 1851-1857 (2012).
  4. Allada, R., Chung, B. Y. Circadian organization of behavior and physiology in Drosophila. Annu. Rev. Physiol. 72, 605-624 (2010).
  5. Garrity, P. A., Goodman, M. B., Samuel, A. D., Sengupta, P. Running hot and cold: behavioral strategies, neural circuits, and the molecular machinery for thermotaxis in C. elegans and Drosophila. Genes Dev. 24, 2365-2382 (2010).
  6. Hamada, F. N., et al. An internal thermal sensor controlling temperature preference in Drosophila. Nature. 454, 217-220 (2008).
  7. Hong, S. T., et al. cAMP signalling in mushroom bodies modulates temperature preference behaviour in Drosophila. Nature. 454, 771-775 (2008).
  8. Dillon, M. E., Wang, G., Garrity, P. A., Huey, R. B. Review: Thermal preference in Drosophila. J. Therm. Biol. 34, 109-119 (2009).
  9. Viswanath, V., et al. Opposite thermosensor in fruitfly and. Nature. 423, 822-823 (2003).
  10. Gallio, M., Ofstad, T. A., Macpherson, L. J., Wang, J. W., Zuker, C. S. The coding of temperature in the Drosophila brain. Cell. 144, 614-624 (2011).
  11. Stevenson, R. D. The relative importance of behavioral and physiological adjustments controlling body temperature in terrestrial ectotherms. Am. Nat. 126 (3), (1985).
  12. Refinetti, R., Menaker, M. The circadian rhythm of body temperature. Physiol. Behav. 51, 613-637 (1992).
  13. Duffy, J. F., Dijk, D. J., Klerman, E. B., Czeisler, C. A. Later endogenous circadian temperature nadir relative to an earlier wake time in older people. Am. J. Physiol. 275, 1478-1487 (1998).
  14. Saper, C. B., Lu, J., Chou, T. C., Gooley, J. The hypothalamic integrator for circadian rhythms. Trends Neurosci. 28, 152-157 (2005).
  15. Konopka, R. J., Pittendrigh, C., Orr, D. Reciprocal behaviour associated with altered homeostasis and photosensitivity of Drosophila clock mutants. J. Neurogenet. 6, 1-10 (1989).
  16. Qiu, J., Hardin, P. E. per mRNA cycling is locked to lights-off under photoperiodic conditions that support circadian feedback loop function. Mol. Cell Biol. 16, 4182-4188 (1996).
  17. Crocker, A., Sehgal, A. Genetic analysis of sleep. Genes Dev. 24, 1220-1235 (1220).
  18. Hendricks, J. C., et al. Rest in Drosophila is a sleep-like state. Neuron. 25, 129-138 (2000).
  19. Shaw, P. J., Cirelli, C., Greenspan, R. J., Tononi, G. Correlates of sleep and waking in Drosophila melanogaster. Science. 287, 1834-1837 (2000).
  20. Parisky, K. M., et al. PDF cells are a GABA-responsive wake-promoting component of the Drosophila sleep circuit. Neuron. 60, 672-682 (2008).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

DrosophilaPeltier

מאמרים קשורים