הזרקת intramyocardial מלעורית מונחה אקו מייצגת שיטה יעילה, אמינה, וניתן למקד עבור המשלוח של סוכני העברת גנים או תאים לתוך הלב העכברי. בעקבות הצעדים המפורטים בפרוטוקול זה, המפעיל יכול להיות מוכשר במהירות בטכניקה תכליתית, פולשנית זו.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
הזרקת Transthoracic Intramyocardial אולטרסאונד מונחה בעכברים
במאמר זה
סיכום
תקציר
מודלים עכבריים למחלת לב וכלי דם הם חשובים לחקר מנגנוני pathophysiological ולחקור טיפולי התחדשות פוטנציאליים. ניסויים הכוללים הזרקה בשריר הלב מבוצעים כיום על ידי גישה כירורגית ישירה באמצעות פתיחת בית החזה. בעוד נוח כאשר היא מבוצעת בזמן אחר מניפולציה ניסויית כגון קשירת עורקים כלילית, את הצורך בפרוצדורה פולשנית למסירת intramyocardial מגביל עיצובים ניסיוניים פוטנציאל. עם אי פעם שיפור הרזולוציה אולטרסאונד ושיטות הדמיה לא פולשנית מתקדמות, עכשיו זה אפשרי לביצוע, הזרקת intramyocardial מלעורית מונחה אולטרסאונד באופן שיגרתי. טיפול זה יעיל ומהימן מספק סוכנים לאזור מיקוד של שריר לב. יתרונות של שיטה זו כוללים הימנעות מתחלואה ניתוחית, מתקן למקד אזורים של שריר לב באופן סלקטיבי בהנחיית אולטרסאונד, ואת ההזדמנות כדי לספק injectate לmyocardiuמ 'במרווחי זמן מרובים, שנקבע מראש זמן. בעזרת טכניקה התאמנה, סיבוכים מהזרקת intramyocardial הם נדירים, ועכברים לחזור במהירות לפעילות רגילה בהתאוששות מהרדמה. בעקבות הצעדים המפורטים בפרוטוקול זה, המפעיל עם ניסיון אקו בסיסי יכול להיות מוכשר במהירות בטכניקה תכליתית, פולשנית זו.
מבוא
מחלות לב היא סיבת מוות המובילה לגברים ולנשים בארצות הברית, והיוו 600,000 מקרי מוות בשנה 1. מודלים עכבריים למחלת לב וכלי דם הם חשובים ביותר לחקר מנגנוני pathophysiological ולחקר טיפולים פוטנציאליים. משלוח בשריר הלב של וקטורי ריפוי גנטיים, תאי גזע, RNAs שונה, וחקירת היתרי סוכנים טיפוליים אחרת של הפוטנציאל הטיפולי שלהם למחלות לב 2-7. נכון לעכשיו, יש אפשרויות מוגבלות למסירה בשריר הלב של סוכנים טיפוליים בעכברי מודל 6. הזרקת Intramyocardial תחת הדמיה ישירה היא נפוצה, אבל דורשת sternotomy או פתיחת בית החזה, והוא מוגבל לאזור החשוף של הלב. בעוד נוח כאשר היא מבוצעת בזמן אחר מניפולציה ניסויית כגון קשירת LA....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
כל השלבים המתוארים בוצעו תחת פרוטוקולים שאושרו על ידי ועדת הטיפול ושימוש בבעלי חיים המוסדיים של בית החולים לילדים בבוסטון.
.1 הכנה
- לבצע הערכה אנטומית ותפקודית של הלב בסיסית על ידי בדיקת אקו לפני תחילת פרוטוקול ההזרקה, כעמדה רגשי קבועים האופטימלית להזרקת intramyocardial לא עשויה להניב תצוגות סטנדרטי אופטימליות להתוויית האנטומיה והערכה של תפקוד.
- התקנת ההזרקה מוצגת איורים 1A-1C. מניחים מזרק ריק עם מחט נדן, כ....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
הזרקת Intramyocardial עכברית עם צבע הכחול או Microspheres פלורסנט
הזרקה של הצבע הכחול של אוון היא שימושית למטרות אימונים. זמן קצר לאחר הזרקה, להרדים את העכבר ולהסיר את הלב לדמיין את מיקומו של הצבע הכחול המוזרק. איור 5 מראה דוגמא של זריקה מוצלחת, עם צבע כחול חדירת שריר הלב ברמת שריר אמצע פפילרי (איור 5A, האזור סגור בקו מקווקו). צבע הכחול אוונס יהיה לשטוף החוצה של הרקמה בתוך כמה שעות........
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
ביולוגיים יכול להיות מועבר לשריר הלב על ידי הזרקה ישירה intramyocardial, הזרקת intrapericardial, או ממשל עקיף באמצעות זרם הדם. ניסויי טיפול אחרונים תא מבוסס במודלי אוטם שריר לב שתיארו גישת פתיחת בית החזה פתוחה למסירת injectate 12-14. גורם חשוב בהצלחה של התערבות טיפולית בשריר הלב תלוי בבחירה של מסלול משלוח. המנה המקומית הגבוהה ביותר של ביולוגי מושגת על ידי 15,16 משלוח intramyocardial. הזרקת Intramyocardial תחת הדמיה ישירה היא השיטה הפשוטה ביותר ומאפשרת לממשל מ.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
למחברים אין מה לחשוף.
תודות
TWP מומן על ידי מלגת בריאן מקגוורן לאיגוד הלב האירי. WTP מומן על ידי R01 HL095712 ופרס החוקר המבוסס של AHA.
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| מערכת הדמיית אולטרסאונד Vevo 2100 | Visualsonics | ||
| Vevo Integrated Rail System III | Visualsonics | ||
| Microscan MS400 מתמר | Visualsonics | ||
| Microscan MS550D מתמר | Visualsonics | ||
| PrecisionGlide מחטים | BD | 305128 | 30 G x 1 אינץ' / 2.5 ס"מ |
| 1 סמ"ק מזרק קצה החלקה | Exel International | 26048 | או שווה ערך |
| Gastight 50 μ l מזרקי זכוכית | המילטון | 1705 | |
| כתם כחול טריפן (0.4%) | Gibco | 15250 | או שווה ערך |
| Isoflurane | Baxter | AHN3640 | או שווה ערך |
| Aquasonic 100 | Parker Laboratories | (01-08) | או שווה ערך |
| למיקרוספירות פוליסטירן (פלואורסצנט אדום) | Life Technologies | F-8842 | או שווה ערך |
מקורות
- Kochanek, K. D., et al. Deaths: final data for 2009. Natl Vital Stat Rep. 60 (3), 1-117 Forthcoming.
- Strauer, B. E., Steinhoff, G. 10 years of intracoronary and intramyocardial bone marrow stem cell therapy of the heart: fro....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
