מטרת פרוטוקול זה היא להראות טכניקה יעילה לבידוד ליבת הזגוגית וקליפת המוח השלמה והשלמה מעיני חזיר שעברו גרעין לאחר המוות.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
מטרת פרוטוקול זה היא להראות טכניקה יעילה לבידוד ליבת הזגוגית וקליפת המוח השלמה והשלמה מעיני חזיר שעברו גרעין לאחר המוות.
המחברים מציעים טכניקה יעילה לבידוד ליבת הזגוגית וקליפת המוח השלמה והשלמה מעיני חזיר עם גרעין לאחר המוות. בעוד שמחקרים קודמים הראו את התוצאות של נתיחות כאלה, השלבים המפורטים לא תוארו, מה שמנע מחוקרים מחוץ לתחום לשכפל את שיטותיהם. מחקרים אחרים קוצרים זגוגית באמצעות שאיפה, שאינה שומרת על אנטומיה של מבנה הזגוגית, או באמצעות דיסקציה חלקית, המבודדת רק את ליבת הזגוגית. השיטה המוצעת מבודדת את כל גוף הזגוגית, כאשר ליבת הזגוגית וקליפת המוח שלמות, תוך שמירה על אנטומיה ושלמות מבנית. בשיטה זו נוצר תחילה דש סקלרלי בעובי מלא בעין חזירית גרעינית ובאמצעותו ניתן להפריד את רקמת הכורואיד מהסקלרה. לאחר מכן מרחיב את הדש הסקלרלי והכורואיד מופרד לחלוטין מהסקלרה. לבסוף, רקמת הכורואיד-רשתית מתקלפת מהזגוגית כדי להשאיר גוף זגוגית מבודד שלם. ניתן להשתמש בטכניקת דיסקציה הזגוגית המוצעת כדי לחקור את התכונות הפיזיקליות של הומור הזגוגית. בפרט, לשיטה זו יש משמעות למחקרים ניסיוניים הכוללים מתן תרופות, הובלת חמצן זגוגית-רשתית והסעה תוך עינית.
מטרתה של שיטה זו היא פירוט טכניקה לבודד את הגוף כולו, בשלמותה זגוגי, עם הליבה והקליפה שלמה זגוגי, מעין גופה, למטרות ניתוח vitreodynamic. כמו בתחום הפיסיולוגיה זגוגית גדל, חוקרים רב-תחומיים, כגון חוקרי מכניקת נוזלים, חוקרים את התכונות הפיזיות וביו-מכאניות של 1 הזגוגית. לשם כך, חיוני לפרטים טכניקה לבודד את כולה, בשלמות גוף הזגוגי כדי לסייע לחוקרים רב-תחומיים.
סבג ואח '. 2 ואחרים 3 ביצעו ניתוחי זגוגית כל אלגנטיים בעיני גופת אדם והראו איורים של התוצאות. עם זאת, הטכניקה המשמשת לא תיארה בפירוט ולא מומחים לא יהיה מסוגל לשכפל את השיטה באופן עצמאי. מחקרים אחרים שנקטפו מזגוגית עיני גופה באמצעות שיטות פשוטות כגון שאיפה או נתיחה חלקית,שניהם לא לגרום לגוף כולו, בשלמות זגוגית. Gisladottis et al. 4 ושו et al. 5 לחקור חדירות בהומור זגוגית שנקטפו מעיני גווייה. עם זאת, מאחר שלא שיטה של מיצוי זגוגית תוארה, הונח כי הם להישאף הומור הזגוגית עם מזרק. ווטס et al. 6 הלך צעד אחד קדימה על ידי תיאור שיטה של בידוד הומור זגוגית ארנב עם טכניקה ניתוחית. עם זאת, שיטה זו גורמת לבידוד של רק ליבת הזגוגית ולא קליפת זגוגי. Skeie et al. 7 מאוחר יותר מאורגנים הזגוגית ל 4 אזורים ייחודיים ואלגנטיות תיארו שיטה לנתח את כל חלק לניתוח. טכניקה זו עם זאת, לא לגרום לזגוגית שלמה בכללותו.
הטכניקה הנוכחית פותחה כדי להקל על ניסויים ביו-פיסיקליים שכיום מבוצעים רק בעיני גווייה. שיטות קודמות, כפי שתוארובוב, מוגבל בגלל) אף אחד 1 לבודד את כל הגוף הזגוגי לחלוטין, ליבת זגוגית 2) שנקטפו וקליפה הן הומוגני, 3) המבנה האנטומי זגוגית לא נשמר, או 4) טכניקות לנתיחה אינן מפורטות במידה מספקת לשכפול על ידי חוקרים בתחומים אחרים . בנוסף, בשל האטימות של לובן העין ודמיתי עין, הדמיה של הגוף הזגוגי מוגבל בגלגל העין בשלמותה. זה מגביל את הדיוק והיתכנות של מדידות שניתן לעשות בתוך כל עין. בנוסף, המבנים אנטומיים המקיפים את הזגוגית יכולים לבלבל את המחקר של מאפיינים ביוכימיים ופיסיים של הזגוגית.
בשנים האחרונות, את גופתו של מדע הזגוגית גדלה מאוד ויש סיבה להאמין שיש לו את כל הגוף הזגוגי מאפיינים שונים מהחלקים הבודדים שלה. יש התעניינות גוברת בחוקרים את התכונות פיזיות, ביו-מכאניות, וכימיות של הזגוגית לresearc vitreodynamicsh, שבה יש יישומים ברפואה קלינית כגון משלוח סמים, חמצון זגוגית 8 וvitrectomy. vitreodynamics התרופתי, אשר עושה שימוש בסוכנים תרופתיים כדי לתפעל את הזגוגית, יכול לשמש כדי לשפר את תוצאות vitrectomy 9. מאפיינים ביו-מכאניים המשמשים למודל זרימת נוזל זגוגית, אשר יכול לשמש כדי לשפר את טכנולוגיות משלוח סמים זגוגית 10-12. תכונות פיסיקליות של מגזרים שונים של הזגוגית הן קריטיות להבנת תחבורת חמצן vitreo-רשתית 13. טכניקה לנתיחה זגוגית המוצעת יכולה לשמש כדי לחקור את המאפיינים שונים של הומור הזגוגית שלם. זה מאפשר ניסויי ספסל העליון להיעשות על גוף כולו, בשלמות זגוגית עם הדמיה טובה יותר.
לסיכום, שיטות הנוכחיות למחקר של הזגוגית הם או לא תיארו כראוי, או לגרום לבידוד שלם הליבה וקליפת זגוגי. לכן, יש צורך לבצע דוארxperiments במודל העין שקוף תוך שמירה על האנטומיה של הזגוגית שקיים בעין הגופה.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
התקבלו כל עיני enucleated מבית שחיטה וכל הניסויים בוצעו בהתאם לחוקי בטיחות ביולוגית מוסדיים.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
בעקבות הפרוטוקול יוביל לנתיחת זגוגית מוצלחת עם הליבה וקליפת המוח (איור 3) בשלמותה. הדבר ניכר מן חתיכות השייר של רשתית דבקו בקליפת זגוגי. הומור זגוגית כל פגע ניתן להשתמש במספר דרכים לניסויי vitreodynamic ספציפיים. במקרה שלנו, שיעור דיפוזיה של חמצן בהומור זגוגית שלם וזה קבוע זמן מקביל נחקר (איור 2). זגוגית שהיה גזור (ליבה וקליפה) בשיטה שלנו הוצבה בכוס זכוכית עם ידוע פני שטח חשוף. זה היה בהשוואה לזגוגית שנקטפה בשיטה שפורסמה בעבר שרק מבודדת את ליבת זג...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
ישנם שני שלבים קריטיים שחייבות להתבצע בזהירות במהלך נתיחת זגוגית. שלב 3, יצירת דש scleral עובי מלא, הוא חיוני לכל הניתוח. יש להקפיד לא לחתוך לתוך דמית העין בעת יצירת דש scleral בעובי מלא. השלב הקריטי האחר לנתח משם בלובן העין מדמה העין. צעד זה חייב להיעשות בזהירות כדי למנוע יצירת חורים מרובים בדמה העין שמן הזגוגית יכולה לשפוך החוצה. יש דרך לשנות את הפרוטוקול ועדיין לנתח הומור זגוגית כל פגע. שלב 6 יכול להתעכב עד ניתן להסיר צעד 8. דמית העין בסוף אחרי רקמת הזגוגית ממוקמת במיקום הרצו...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
למחברים אין מה לחשוף.
המחברים מכירים במקורות המימון הבאים: קרן וויטייר, קרן הרינגטון, המכונים הלאומיים לבריאות ומחקר למניעת עיוורון.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| 0.3 מלקחיים | Storz Opthalmics | E1793 | |
| Westcott מספריים טנוטומיה מעוקלת ימין | Storz אופטלמיקה | E3320 R | |
| ידית אזמל מס '3 | VWR | 25607-947 | |
| להב אזמל, #11, עבור ידית #3 | VWR | 470174-844 |
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.