מאמר שיטה

Murine ניסיוני דגם של התפתחות גידולים מקורית גרור הצפק דרך Orthotopic הרכבה עם קרצינומה של תאי השחלות

DOI:

10.3791/54353

⸱

9 בדצמבר 2016

 ,  ,  ,  ,  , 
1Bell Research Center for Reproductive Health and Cancer, 2Department of Obstetrics and Gynecology, Nagoya University Graduate School of Medicine, 3Department of Cancer Biology, Nagoya University Graduate School of Medicine

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כדי להבהיר את תהליך רב שלבי של הפצת הצפק של קרצינומה השחלות, המחקר הנוכחי מציג מודל ניסיוני בעכברים של התפתחות גידולים המקורי וגרורות הצפק באמצעות חיסון orthotopic עם תאים סרטניים אלה.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

קרצינומה השחלות אפיתל (EOC) קשורה עם פרוגנוזה גרועה כי זה מראה הפצת הצפק. כדי לשפר את סיכויי ההחלמה, חשוב לשלוט בהפצת הצפק. עם זאת, עדיין לא ברור כיצד תאים סרטניים להתנתק נגעים ראשוניים לצרף mesothelium. הקמת מודל חיה מתאים נדרשה כדי להשיג הבנה של המנגנון של הפצת הצפק in vivo. במחקר הנוכחי, אנחנו מציגים את התהליך מן הזריקה המקומית של תאי EOC לתוך שטח שחלות murine להתפתחות גרורה, כולל הצפק לאיברים מרוחקים. עכברים עירום נשי (BALB / c נו / נו) אחרי 8 שבועות של גיל היו בשימוש. תחת שדה מיקרוסקופי מבט, תאי EOC (1 x 10 5 תאים / μl של מטריקס הבינוני-תאי (ECM) מבוסס הידרוג'ל / השחלה חד-צדדית / עכבר) הוזרקה השחלות בעכברים באמצעות גישת retroperitoneal מסיר המאגף הגבה. השיטה המוצעת זהו leהליך ss פולשני העכבר ממזער נזקים השחלה. כאן אנו מתארים את השלבים מתודולוגיים בפיתוח של היווצרות הגידול המקורי גרורתי של EOC.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

קרצינומה שחלות אפיתל (EOC) מסבירה את השיעור הגבוה ביותר של תמותה מסרטן בקרב ממאירויות גינקולוגיות 1. EOC מזוהה עם פרוגנוזה גרועה, בעיקר בשל הסימפטומים שלה מאוחר, והיא קשורה לעיתים קרובות עם disseminations intraperitoneal מרובים גרורות מרוחקות 2-4. הפצת הצפק היא תהליך רב שלבים. ראשית, תאים סרטניים להתנתק גוש הראשוני, ולהעביר לתוך חלל הבטן. כאשר התאים הסרטניים לצרף mesothelium הצפק, הם מתחילים לפלוש לרקמות דרך 5,6 mesothelium. על מנת להבין טוב יותר את הביולוגיה של הגידול (למשל, התקדמות סרטן תגובה לטיפול), במודלים של עכברים מספקים שפע של מידע. Xenograft עם תאים סרטניים אנושיים נעשה שימוש נ....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פרוטוקול הטיפול פועל בהתאם להנחיות לניסויים בבעלי חיים שאימצה נאגויה האוניברסיטה.

1. הכנת השעיות תא

  1. שורת תאים ברורה תא קרצינומה שחלות אדם.
    1. שמור על תאים ES-2 12 במדיום RPMI-1640 עם 10% בסרום שור עוברית (FBS) ו פניצילין / סטרפטומיצין (פניצילין: 100 יחידות / מ"ל, סטרפטומיצין: 0.1 מ"ג / מ"ל). התרבות תאים על 37 מעלות צלזיוס חממה humidified 5% CO 2.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

שישה עכברים בעירום חסנו השחלות שלהם עם תאי תאי קרצינומה הקו ברור הגזע עוברי-2, כמתואר בפרוטוקול זה. כפי שניתן לראות בתרשים 1 א ', לאחר 2 שבועות, 5 מתוך 6 העכברים היה גידול בשחלה מחוסן עם ES-2 תאים, אבל לא היה גידול בשחלה הנגדי ללא חיסון (ששימשו כביקורת). יתר על כן, 2 מתוך 5 העכברים הראו disseminations הצפק המרובה עם מיימת. תאים גרורות בכבד (איור 1B). השחלות, הוא עם מסת הגידול באתר החיסון ובצד השליטה, נותחו, מחולקות.......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

במודלים של בעלי חיים חיוניים כדי לנתח את מנגנוני התפתחות גידולים, התקדמות, גרורות, וכן יעילות התרופה כנגד תאים סרטניים. בעכברים נושאי בתאי סרטן שחלות אדם גם שמשו במודל חיה. כאן אנו מתארים הליך פולשני פחות עבור הממשל של תאים סרטניים בשחלות ב אתר orthotopic. באמצעות הליך זה, חיסון לתוך השחלה דרך גישה retroperitoneal מסירה מאגף הגבי מציע יתרונות משמעותיים על פני שיטות אחרות נפוץ. ראשית, חיסון orthotopic יכול לספק יותר תוצאות יעילות ומדויקות המשקפים סביבת הגידול באדם 13,21........

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

החוקרים אין לי מה לחשוף.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים מודים לחברי מחלקת נשים ויולדות וביולוגיה סרטן לדיונים שלהם מסייע סיוע טכני. מחקר זה נתמך על ידי האגודה יפן לקידום המדע (JSPs) גרנט ב- Aid למחקר מדעי (15K15604; לה 'Kajiyama).

....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
מטריצת מטריגל מזרקאינסולין הידרוג'ל מבוסס BD 354234 ECM
TERUMOSS-05M29131/2 סמ"ק, 29 גרם x 1/2 אינץ'
מחט תפירה עם תפר11 מ"מ, 3/8, Nylon6-0
רפלקס 7 מ"מ קליפ פצע Applier CellPointScientific204-1000
  מהדקי פצע רפלקס 7 מ"מCellPoint Scientific203-1000

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Jemal, A., et al. Global cancer statistics. CA Cancer J Clin. 61 (2), 69-90 (2011).
  2. Kajiyama, H., et al. Long-term clinical outcome of patients with recurrent epithelial ovarian carcinoma: is it the same for each histological type. ....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

Trypsin EDTA

מאמרים קשורים