ניצול של אולטרסאונד מודרכת מכוון רקמות השרשה הסלולר להקמתה של גידול גרורתי רלוונטי מבחינה ביולוגית Xenografts

Tina T. Thomas; Sahiti Chukkapalli; Raelene A. Van Noord; Melanie Krook; Mark J. Hoenerhoff; Jonathan R. Dillman; Elizabeth R. Lawlor; Valerie P. Opipari; Erika A. Newman

doi:10.3791/57558

הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

ניצול של אולטרסאונד מודרכת מכוון רקמות השרשה הסלולר להקמתה של גידול גרורתי רלוונטי מבחינה ביולוגית Xenografts

8K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/57558

⸱

25 במאי 2018

Tina T. Thomas¹ , Sahiti Chukkapalli¹ , Raelene A. Van Noord¹ , Melanie Krook² , Mark J. Hoenerhoff³ , Jonathan R. Dillman⁴ , Elizabeth R. Lawlor²^,⁵ , Valerie P. Opipari⁵ , Erika A. Newman¹

¹Departments of Surgery, C.S Mott Children's and Women's Hospital, The University of Michigan Medical School, ²Departments of Pathology, C.S Mott Children's and Women's Hospital, The University of Michigan Medical School, ³Unit for Laboratory Animal Medicine, The University of Michigan Medical School, ⁴Departments of Radiology, C.S Mott Children's and Women's Hospital, The University of Michigan Medical School, ⁵Departments of Pediatrics, C.S Mott Children's and Women's Hospital, The University of Michigan Medical School

במאמר זה

סיכום

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לנצל מונחה אולטרה סאונד הזרקה של נוירובלסטומה (NB) ותאים של יואינג סרקומה (ES) (שהוקמה שורות תאים ותאים סרטניים נגזר החולה) באתרים הרלוונטיים ביולוגית ליצירת במודלים פרה אמין עבור סרטן מחקר.

תקציר

בדיקה פרה של טיפולים נגד סרטן מסתמכת על מודלים xenograft רלוונטי המחקים את נטיות מולדת של סרטן. היתרונות של דגמים סטנדרטיים האגף תת עורית כוללות הקלות פרוצדוראליות ואת היכולת התקדמות הגידול צג, התגובה ללא פולשני הדמיה. מודלים כאלה לעיתים קרובות אינם עקביים בניסויים קליניים translational, יש מוגבל המאפיינים הרלוונטיים ביולוגית עם נטייה נמוכה כדי לייצר גרורות, כפי שיש מחסור microenvironment מקורי. לשם השוואה, orthotopic דגמים xenograft באתרי גידול יליד הראו לחקות את microenvironment הגידול ואף לשכפל את מאפייני המחלה חשוב כגון התפשטות גרורתית מרוחקת. מודלים אלה דורשות לעתים קרובות ניתוחים מייגע עם תקופות זמן ושחזור הרדמה ממושכות. כדי לטפל בבעיה זו, סרטן חוקרים נעזרו לאחרונה הזרקת מונחה אולטרה סאונד טכניקות כדי ליצור מודלים xenograft סרטן לניסויים פרה, המאפשר הקמת מודלים מאתר מכוון רקמות מהיר ואמין. הדמיית אולטרה סאונד מספק גם שיטה לא פולשנית להערכת האורך של engraftment גידול וצמיחה. כאן, נתאר את שיטת להזרקה מונחה אולטרה סאונד של תאים סרטניים, ניצול בלוטת יותרת הכליה עבור NB ו- sub כליות כמוסה עבור ES. בגישה פולשנית זו גוברת על ניתוח פתוח מייגע ההשתלה של תאים סרטניים במיקומים רקמות ספציפיות עבור הצמיחה, גרורות, abates ותקופות התאוששות חולנית. אנו מתארים את הניצול של שורות תאים הוקמה והן שורות תאים נגזר החולה להזרקה orthotopic. ערכות מוכנות מראש מסחריים זמינים עבור גידול דיסוציאציה ותיוג לוציפראז של תאים. הזרקה של הבולם התא באמצעות תמונה-ההדרכה מספק פלטפורמה מינימלית פולשנית, לשחזור להקמת במודלים פרה. שיטה זו מנוצל ליצירת במודלים פרה אמין עבור סוגי סרטן אחרים כגון שלפוחית השתן, המשמשים שלה פוטנציאל לא ממומש עבור מודלים רבים של סרטן הכבד והלבלב.

מבוא

מודלים xenograft בעלי חיים הם כלי חיוני עבור מחקרים פרה של טיפולים נגד סרטן. Xenografts מאתר סטנדרטי להסתמך על האגף תת עורית ההשתלה של תאים, מתן אתר נגיש ויעיל עבור ניטור הגידול. החיסרון של מודלים תת עורית הוא היעדרם של מאפייני וחיסונים גידול ספציפי, אשר עשוי להגביל את הפוטנציאל שלהן גרורות¹. הגבלות יש להתגבר על ידי שימוש xenografts orthotopic ב איזה גידול התאים הם engrafted באתרים רקמה מקורית, מתן של microenvironment רלוונטי עם פוטנציאל גרורתי². מודלים xenograft Orthotopic לשמור על תכונות ביולוגיות המקורי ולספק מודלים אמינים סמים פרה-גילוי-³^,-⁴. התאים הסרטניים מ....