הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

זיהוי של וירוסים Bioaerosols באמצעות אניון Exchange שרף

7.9K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/58111

⸱

22 באוגוסט 2018

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1High Plains Intermountain Center for Agricultural Health and Safety, Department of Environmental and Radiological Health Sciences, Colorado State University, 2National Wildlife Research Center, Wildlife Services, Animal and Plant Health Inspection Service, United States Department of Agriculture, 3Western Sydney University, 4Leprino Foods, Inc, 5Department of Food Science and Agricultural Chemistry, McGill University, 6Department of Mechanical Engineering, Colorado State University, 7Department of Animal Science, University of Wyoming

במאמר זה

סיכום

אניון להחליף שיטה מבוססת-שרף, הותאם לנוזל הוכח bioaerosol מבוסס-impingement דגימה של וירוסים. כאשר יחד עם זיהוי מולקולרי במורד הזרם, השיטה מאפשרת גילוי נתיישב ורגיש של וירוסים bioaerosols.

תקציר

פרוטוקול זה מדגים שיטת הדגימה bioaerosol מותאם אישית עבור וירוסים. במערכת זו, אניון exchange שרף הוא ביחד עם התקני הדגימה האוויר מבוסס-impingement נוזלי ריכוז אפקטיבי של אניון וירוסים bioaerosols. לפיכך, השרף מגישה כשלב נוסף ריכוז בזרימת העבודה bioaerosol הדגימה. חומצת גרעין החילוץ של חלקיקי נגיפי ואז מבוצעת ישירות מן השרף exchange אניון, עם הדגימה וכתוצאה מכך מתאים ניתוחים מולקולריים. יתרה מזאת, פרוטוקול זה מתאר תא bioaerosol לפי הזמנה מסוגל לייצר וירוס עמוסי bioaerosols תחת מגוון תנאים סביבתיים, המאפשר ניטור רציף של משתנים סביבתיים כגון טמפרטורה, לחות, מהירות הרוח, ריכוז מסה תרסיס. היתרון העיקרי של שימוש בפרוטוקול זה הוא רגישות מוגברת של איתור נגיפי, כפי העריך באמצעות השוואה ישירה impinger נוזלי קונבנציונאלי שלא שונתה. יתרונות נוספים כוללים את היכולת להתרכז מגוונים-אניון וירוסים, עלות נמוכה של אניון exchange שרף (~$0.14 עבור דגימה), וקלות השימוש. החסרונות כוללים חוסר היכולת של פרוטוקול זה כדי להעריך את infectivity של שרף-הספוחה נגיפים, שעשוי להיות לצורך אופטימיזציה של המאגר דגימה נוזלית שישמש impinger.

מבוא

מטרת שיטה זו היא לספק פלטפורמה דגימה רגישה מאוד bioaerosol כדי להקל על זיהוי מולקולרי של אניון וירוסים bioaerosols. מיקרואורגניזמים, כולל חלקיקים נגיפיים, יכול לשרוד bioaerosols לתקופות ממושכות של זמן1. Bioaerosols ניתן לנסוע על פני מרחקים ארוכים יחסית, לשמור על יכולת הקיום של infectivity, כפי שמעידים על התפרצות מחלת הליגיונרים כי מקורם התעשייה ממוקם במרחק של 6 ק מ אנשים מושפעים במגדלי הקירור ו כתוצאה 18 הרוגים2. שידור ישיר של וירוסים לבני מתווכת על-ידי bioaerosols יכול להתרחש במסגרות מרובות, הוכח עבור norovirus התפרצויות3,של בתי ספר, מסעדות-4. באופן דומה, bioaerosol שידור של וירוסים יכול להתרחש אצל חקלאי הגדרות כגון בחוות חזירים ועופות, עם המסלול לשידור להיחשב כגורם מרכזי בתנועה של וירוסים בין מתקני הייצור5, 6 , 7 , 8 , 9.

הדגימה האפקטיבי של bioaerosols עמוסי וירוס מאפשר שיפור איבחונים ומוכנות למניעת התפרצות, כפי שמוצג בהפגנות ב H5 אילו שפעת וירוסים התגלו מ bioaerosols ב החי משווקת בסין ו ארצות הברית10,11. טכנולוגיות הנוכחי של הדגימה bioaerosol לערב מספר עקרונות ללכוד חלקיקים שונים, ניתן לסווג בהרחבה לתוך impingers, הציקלונים, impactors, מסננים12. . זה מעבר הטווח של פרוטוקול זה לכסות ממצה את כל היתרונות והחסרונות של פלטפורמות אלה עבור דגימה של וירוסים מן bioaerosols; עם זאת, ניתן לקבוע כי הרוב המכריע של התקנים אלה דגימה שלא להיות ממוטבות עבור האוסף של וירוסים ותוכנות bacteriophages13. יתר על כן, infectivity של נגיפים לעיתים קרובות מושפעים לרעה, עם impingers נוזלי נחשב כדי לשמור על infectivity ויראלי בצורה יעילה יותר מאשר דגימה התקנים כגון impactors או מסננים מוצק14. אולם חיסרון אחד של impingement נוזלי הוא האפקט דילול המטרה, אשר מתרחשת מפני וירוסים הם שנאספו בכמויות גדולות יחסית (בדרך כלל ≥ 20 מ"ל) של נוזל בתוך הכלי אוסף. חיסרון חשוב נוסף כרוך יעילות שיוצרת impingers נוזלי להתרכז חלקיקים < 0.5 מיקרומטר גודל15. עם זאת, ניתן לשפר יעילות לכידה של התקנים אלה מאת הנייח על מטריצות מוצק, כפי הנייח יכול לשפר את שימור של חומצות גרעין נגיפיות,16,infectivity ויראלי17.

בעבר הראו כי אניון exchange שרף הוא כלי יעיל עבור לכידת וריכוז של וירוסים של מטריצות נוזלי, לרבות F-RNA bacteriophages, וירוס הפטיטיס A, אדנו אדם בנגיף18,19 ,20. כפי שהוגדרו על ידי היצרן, השרף exchange אניון מנוצל בעבודה זו הוא שרף macroreticular פוליסטירן אניון בסיס חזק exchange האטרקציה התחלקות של קבוצות functionalized אמין רבעוני, לכידתו של אניונים בינוני נוזלי21 . כתוצאה מכך, צפוי השרף exchange אניון ללכוד וירוסים עם חיובים השטח נטו שלילי, לרבות וירוסים המעית רבים, שפעת וירוסים, וירוסים אחרים הנוגעים לבריאות הציבור ובעלי חיים.

בפרוטוקול הנוכחי כולל התוספת של אניון exchange לשרף impinger נוזלי. במערכת זו, משמש השרף צעד ריכוז משניות עבור חלקיקים נגיפיים שנלכדו בתוך הנוזל impinger. חומצות גרעין יכול אז להיות ישירות eluted בכמויות קטנות, מתן דגימת מרוכז עבור ניתוחים מולקולריים. לפיכך, היתרון העיקרי של שיטה זו הוא לשיפור הרגישות לאיתור נגיפי, בעיקר באמצעות צמצום נפח דגימה. בנוסף, בשל התפיסה שאינם ספציפיים הטבועה של וירוסים אניון, השיטה זו סביר ישימה עבור זיהוי של מספר גדול של וירוסים עניין. כאן, השיטה הוא הפגין עבור חיסון זנים של סוג A, וירוסים שפעת מסוג B, את coliphage FRNA MS2 (MS2). וירוסים אלה מאותרים לאחר מכן באמצעות מבחני לרביעיית סטנדרטי-PCR כמו שתואר לעיל22. המשתמש מובילים לא צריך לצפות למפגש קשיים בביצוע שיטה זו, כי השינויים הקיימים כיום ציוד אינם מהווים מרכזי שיבושים לזרימה המקובלת של bioaerosol דיגום וניתוח.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

1. הגדרת החדר Bioaerosol (ראה איור 2)

  1. לטעון מראש את impingers נוזלי 20 מ של 0.01 M פוספט buffered מלוחים, pH 7.5 (PBS).
    1. להוסיף 0.5 g של אניון exchange שרף, השעיה בתוך מגניב של אחד impingers נוזלי, עם עוד impinger נוזלי הגשה פקד.
  2. מיקום impingers נוזלי במקביל בתוך החדר bioaerosol באמצעות מלחציים עומד עם תרסיס אינלטס מול של מפוחים.
    הערה: ראה איור 2 לפרטים נוספים.
  3. בשיתוף אתר צג תרסיס ישיר-קריאה ליד impingers נוזלי כדי למדוד ריכוז מסה (מ ג/ז3) של bioaerosol.
  4. אתר שיתוף ישיר-קריאה נוספים ומכשור (אוויר מקורה איכות צג ותרמית מד רוח) ליד impingers נוזלי לעקוב אחר משתני סביבה, כגון טמפרטורה, לחות יחסית רוח מהירות, בתוך תא bioaerosol.
  5. הפעל מאווררים ציריים בפינות החדר bioaerosol כדי להקל על ערבוב של תרסיס.
    הערה: מאווררים ציריים לרוץ במהירות קבועה והם אינם מתכווננת.

2. מודל Bioaerosolization ניסויים (ראה איור 3)

  1. לבצע יציאה טורית, 10-fold דילולים bacteriophage MS2 חיסון שפעת ריכוזי הרצוי בתוך תמיסת מלח באגירה פוספט (PBS).
    הערה: כדי להדגים את השיטה פה, 103.5 ffu ב/mL של סוג A ו- B שפעת וירוס חיסון זנים ו-105 PFU/mL של bacteriophage MS2 מנוצלים. כדי לקבוע titers עבור inocula, bacteriophages הופץ ב- HS Escherichia coli (pFamp) R, לספור כפי שתואר לעיל20. החיסון המסחרי מכיל כמויות ידוע של ארבעה זנים של וירוס שפעת הקלוש בשידור חי, שניים הקלד שפעת ווירוסים שני וירוסים שפעת מסוג B, שבאה לידי ביטוי המוקד פלורסנט יחידות או ffu.
  2. להכין inocula בתוך הכלי זכוכית של לתת לה משאף 6-סילון התנגשות על-ידי יצירת המתלים של ריכוזים הרצוי של נגיפים ב- 100 מ של PBS ולהתקין בתוך תא bioaerosol מותאם אישית.
  3. ליזום מכשור כדי למדוד את משתני בתוך תא bioaerosol, כגון טמפרטורה, לחות יחסית %, ריכוז פחמן דו-חמצני, ורוח מהירות (נוצר באמצעות של מפוח). השתמש צג תרסיס ישיר-קריאה כדי לעקוב אחר ריכוז מסה בתוך תא bioaerosol ולהקים עקביות בתוך ובין ניסויים.
  4. לאטום את התא bioaerosol ולטהר 10 דקות באוויר HEPA-מסוננים.
  5. לספק אוויר מסונן, מיובשים מפוחים פועלים ב 6.9 kPa.
  6. הפקת ריכוז היעד של bioaerosols ויראלי (באמצעות מפוחים) בכל אחד bioaerosol למשפט. לצורך ההדגמה, bioaerosols עם ריכוז של 5 מ"ג/m3 נוצרים.
  7. לאחר שהגעת היעד ריכוז מסה בתרסיס, עוצרים nebulization.
  8. פועלים משאבת אוויר דגימה עבור כל impinger נוזלי זה כוילה כדי קצב זרימה של 12.5 L לדקה כיול התנהגות באמצעות תקן הזרימה הראשי לפני ואחרי כל אירוע הדגימה כדי להבטיח עקביות דגימה נפח. דילול אספקת אוויר באמצעות שורת HEPA-מסוננים הממוקמים על יד מפוחים, לשמור על לחץ קבוע בבית הבליעה.
  9. פעיל לדגום את האווירה תא bioaerosol לתקופה של 40 דקות כדי להשיג נפח דגימה של 500 ליטר לכל דגימה.
    הערה: דגימה למשך 40 דקות ב- 12.5 L/דקה עם שתי משאבות במקביל מאפשר דגימה של 1,000 ליטר של bioaerosol. לכן, בתום הניסוי, הוא צפוי כי רוב האוויר נוכח בבית הבליעה bioaerosol שנדגמו, שוחרר לתוך הסביבה דרך מערכת סינון HEPA. עדות לכך היא על ידי הירידה בריכוז החלקיקים. שלאחר הניסוי, משטחים הם ושוקמו עם 10% אתנול ביתי מלבין ו- 70%. נעשה שימוש במחוונים בהפגנה זו; עם זאת, אם ידוע אורגניזמים פתוגניים משמשים במערכת זו, אמצעי אבטחה נוספים ניתן ליישם בהתאם לצורך.

3. חומצות גרעין חילוץ וזיהוי לרביעיית-PCR

  1. לבודד חומצות גרעין ישירות מאניון exchange שרף, למטרות השוואתי, מן הנוזל שישמש את impingers נוזלי. בדוגמה זו, מתואר הליך בידוד ה-RNA, אך פרוטוקול דומה יכול לשמש לייצור DNA וירוסים.
    1. חומצת גרעין בידוד מן השרף exchange אניון.
      1. העברת כל של אניון exchange המכילים שרף הנוזל של impinger נוזלי צינור חרוטי סטרילי 50 מ.
      2. לאפשר שרף להתיישב, לאט decant את דגימת נוזל מן השרף exchange אניון. השתמש טיפ פיפטה 1 מ"ל כדי להסיר את כל הנוזל הנותר מן השרף exchange אניון.
      3. ערכה בידוד RNA נגיפי, להוסיף µL 560 פירוק ויראלי מאגר המכיל נושא RNA ישירות כדי שרף exchange אניון, תקופת דגירה של 10 דקות בטמפרטורת החדר עם ערבוב תקופתיים.
      4. באמצעות טיפ פיפטה 1 מ"ל, להעביר את נגיפי lysate (המאגר פירוק ויראלי) סטרילי 1.5 מ ל חרוט צינור ולהמשיך עם RNA בידוד באמצעות בידוד RNA נגיפי של קיט (ראה טבלה של חומרים) בהתאם להוראות היצרן, למעט כי ה-RNA eluted, הנפח הכולל של µL 60 • תנאי המאגר.
    2. חומצת גרעין בידוד של impingers נוזלי.
      1. פיפטה µL 140 המדגם נוזלי לתוך צינור חרוטי mL 1.5 סטרילי ולבצע בידוד RNA באמצעות ערכת בידוד RNA נגיפי בהתאם להוראות היצרן, חוץ eluting רנ א ב הנפח הכולל של µL 60 • תנאי המאגר.
        הערה: 140 µL היא אמצעי האחסון מדגם מקסימלית ניתן לעבד עם ספציפי נגיפי RNA בידוד ערכת המועסקים כאן הכנה צעד אחר צעד.
  2. לבצע לרביעיית-PCR לזיהוי של MS2, שפעת A ו- B וירוסים כמו שתואר לעיל23,24. בהפגנה הזו, 5 µL של חומצות גרעין eluates משמשים לרביעיית-PCR.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

איור 1 מדגים את העיקרון שמאחורי מבוסס תשלום לכידתו של וירוסים מ- bioaerosols באמצעות הכללת שרף בנוזל impingers. איור 2 מציג את ההתקנה של תא bioaerosol לפי הזמנה. איור 3 מתאר את השלבים הכרוכים בהקמת חשוד ניסוי של אמצעים כדי להבטיח בקרת איכות. איור 4 מציגה עקומות הגברה עבור לרביעיית-PCR לזיהוי וירוסים אניון שנלכד bioaerosols. טבלה 1 מציגה את תחל הגששים המש...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

פרוטוקול זה מתאר שיטה עבור לכידת ויראלי רגיש bioaerosols משתמש ששונה impingers נוזלי. השיטה ממוטבת זיהוי, כימות המטען הנגיפי ב- bioaerosols. השינוי מסוימות המודגמות כאן כרוכה התוספת של אניון שרף exchange לנוזל הנכלל של impinger נוזלי נפוצות. שיטה זו פותחה עבור פשטותו בעיבוד מדגם במורד הזרם, ואילו דוגמת עיבוד טכניקות טיפול נוספות צנטריפוגה, סינון ושיטות מבוססות משקעים לא מציעים יתרון כזה. מיצוי של חומצות גרעין מתבצע ישירות מהשרף, obviating את הצורך בנפח גבוה elutions ו מרובי שלבים הכנת המדגם, בסופו של דבר לתרום רגישות זיה...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים אין לחשוף.

תודות

עבודה זו נתמכה על ידי מימון של ה-CDC/NIOSH גבוהה המישורים Intermountain המרכז החקלאי בריאות ובטיחות (5U54OH008085) ואת קולורדו Bioscience גילוי הערכה גרנט התוכנית (14BGF-16).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
Escherichia coli בקטריופאג' MS2 (ATCC 15597-B1)American Type Culture CollectionATCC 15597-B1
FluMist QuadrivalentAstraZenecaContact יצרן המרכיביםהוויראליים של חיסון זה כפופים לשינויים על בסיס שנתי
CFX96 Touch Real-Time PCR DetectionBio-Rad
פריימרים ובדיקותטכנולוגיות DNA משולבותNA
0.2 ומיקרו; מסנן סטריליM NANA
1 L בקבוקי פיירקס או שווה ערךNANA
1 מ"ל קצות פיפטNA
NA 50 מ"ל פיפט סרולוגיNANA
PCR צינורותNA
NA Pipet-aid או שווה ערךNANA
QIAamp RNA ויראלי מיני ערכתQiagen52904
QuantiTect Probe RT-PCR ערכתQiagen204443
Amberlite IRA-900 כלוריד בצורתSigma-Aldrich216585-500G
פוספט חוצץ מלחSigma-AldrichP5368-10PAK
מים (דרגת ביולוגיה מולקולרית)Sigma-AldrichW4502-1L
צינורות צנטריפוגה חרוטיים Eppendorf DNA LoBindThermoFisher13-698-791
צינורות צנטריפוגה חרוטיים פלקון 50 מ"ל ThermoFisher14-432-22
צינורות צנטריפוגה פוליפרופילן פלקוןThermoFisher05-538-62
SuperScript III פלטינה ערכת qRT-PCR שלב אחד עם ROXThermoFisher11745100
SKC Biosampler 20 מ"ל, סט זכוכית 3 חלקיםSKC Inc.225-9593
משאבות לדוגמא Vac-u-GoSKC Inc.228-9695
נבולייזר קוליסון (6 סילון)BGI Inc.
קפסולת NA HEPAPALL12144
Q-TRAK מוניטור איכות אוויר פנימי 8554TSI Inc.
רוח תרמי NA Alnor וולומטר AVM440-ATSI Inc.
NA SidePak AM510 מוניטור אירוסול אישיTSI Inc.
תא ביו-אירוסולNA
System 1855195 NA 1 מ"ל פיפטור NA NA מד NA

מקורות

  1. Pirtle, E. C., Beran, G. W. Virus survival in the environment. Revue scientifique et technique (International Office of Epizootics). 10 (3), 733-748 (1991).
  2. Nguyen, T. M., et al. A community-wide outbreak of legionnaires disease linked to industrial cooling towers--how far can contaminated aerosols spread? The Journal of Infectious Diseases. 193 (1), 102-111 (2006).
  3. Marks, P. J., et al. Evidence for airborne transmission of Norwalk-like virus (NLV) in a hotel restaurant. Epidemiology and Infection. 124 (3), 481-487 (2000).
  4. Marks, P. J., et al. A school outbreak of Norwalk-like virus: Evidence for airborne transmission. Epidemiology and Infection. 131 (1), 727-736 (2003).
  5. Corzo, C. A., Culhane, M., Dee, S., Morrison, R. B., Torremorell, M. Airborne detection and quantification of swine influenza a virus in air samples collected inside, outside and downwind from swine barns. PLoS One. 8 (8), e71444(2013).
  6. Anderson, B. D., et al. Bioaerosol sampling in modern agriculture: A novel approach for emerging pathogen surveillance. The Journal of Infectious Diseases. 214 (4), 537-545 (2016).
  7. Hietala, S. K., Hullinger, P. J., Crossley, B. M., Kinde, H., Ardans, A. A. Environmental air sampling to detect exotic Newcastle disease virus in two California commercial poultry flocks. Journal of Veterinary Diagnostic Investigation. 17 (2), 198-200 (2005).
  8. Jonges, M., et al. Wind-mediated spread of low-pathogenic avian influenza virus into the environment during outbreaks at commercial poultry farms. PLoS One. 10 (5), e0125401(2015).
  9. Otake, S., Dee, S. A., Jacobson, L., Torremorell, M., Pijoan, C. Evaluation of aerosol transmission of porcine reproductive and respiratory syndrome virus under controlled field conditions. The Veterinary Record. 150 (26), 804-808 (2002).
  10. Wu, Y., et al. Aerosolized avian influenza A (H5N6) virus isolated from a live poultry market, China. The Journal of Infection. 74 (1), 89-91 (2017).
  11. Choi, M. J., et al. Live animal markets in Minnesota: A potential source for emergence of novel influenza A viruses and interspecies transmission. Clinical Infectious Diseases. 61 (9), 1355-1362 (2015).
  12. Haig, C. W., Mackay, W. G., Walker, J. T., Williams, C. Bioaerosol sampling: Sampling mechanisms, bioefficiency and field studies. The Journal of Hospical Infection. 93 (3), 242-255 (2016).
  13. Anderson, B. D., Lednicky, J. A., Torremorell, M., Gray, G. C. The use of bioaerosol aampling for airborne virus surveillance in swine production facilities: A mini review. Frontiers in Veterinary Science. 4, 121(2017).
  14. Verreault, D., Moineau, S., Duchaine, C. Methods for sampling of airborne viruses. Microbiology and Molecular Biology Reviews. 72 (3), 413-444 (2008).
  15. Hogan, C. J. Jr Sampling methodologies and dosage assessment techniques for submicrometre and ultrafine virus aerosol particles. Journal of Applied Microbiology. 99 (6), 1422-1434 (2005).
  16. Yu, K. -P., Chen, Y. -P., Gong, J. -Y., Chen, Y. -C., Cheng, C. -C. Improving the collection efficiency of the liquid impinger for ultrafine particles and viral aerosols by applying granular bed filtration. Journal of Aerosol Science. 101, 133-143 (2016).
  17. Perez-Mendez, A., et al. Evaluation of a simple and cost effective filter paper-based shipping and storage medium for environmental sampling of F-RNA coliphages. J Virol Methods. 194 (1-2), 60-66 (2013).
  18. Chandler, J. C., et al. Field-based evaluation of a male-specific (F+) RNA coliphage concentration method. Journal of Virological Methods. 239, 9-16 (2017).
  19. Perez-Mendez, A., Chandler, J. C., Bisha, B., Goodridge, L. D. Concentration of enteric viruses from tap water using an anion exchange resin-based method. Journal of Virological Methods. 206, 95-98 (2014).
  20. Perez-Mendez, A., Chandler, J. C., Bisha, B., Goodridge, L. D. Evaluation of an anion exchange resin-based method for concentration of F-RNA coliphages (enteric virus indicators) from water samples. Journal of Virological Methods. 204, 109-115 (2014).
  21. Kammerer, J., Carle, R., Kammerer, D. R. Adsorption and ion exchange: Basic principles and their application in food processing. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 59 (1), 22-42 (2011).
  22. Chandler, J. C., et al. A method for the improved detection of aerosolized influenza viruses and the male-specific (F+) RNA coliphage MS2. Journal of Virological Methods. 246, 38-41 (2017).
  23. Friedman, S. D., Cooper, E. M., Calci, K. R., Genthner, F. J. Design and assessment of a real time reverse transcription-PCR method to genotype single-stranded RNA male-specific coliphages (Family Leviviridae). Journal of Virological Methods. 173 (2), 196-202 (2011).
  24. Selvaraju, S. B., Selvarangan, R. Evaluation of three influenza A and B real-time reverse transcription-PCR assays and a new 2009 H1N1 assay for detection of influenza viruses. Journal of Clinical Microbiology. 48 (11), 3870-3875 (2010).
  25. Cademartiri, R., et al. Immobilization of bacteriophages on modified silica particles. Biomaterials. 31 (7), 1904-1910 (2010).
  26. Michen, B., Graule, T. Isoelectric points of viruses. Journal of Appled Microbiology. 109 (2), 388-397 (2010).
  27. Turgeon, N., Toulouse, M. J., Martel, B., Moineau, S., Duchaine, C. Comparison of five bacteriophages as models for viral aerosol studies. Applied and Environmental Microbiology. 80 (14), 4242-4250 (2014).
  28. Vergara, G. G., et al. Evaluation of FRNA coliphages as indicators of human enteric viruses in a tropical urban freshwater catchment. Water Research. 79, 39-47 (2015).
  29. Tung-Thompson, G., Libera, D. A., Koch, K. L., de Los Reyes, F. L. 3rd, Jaykus, L. A. Aerosolization of a human norovirus surrogate, bacteriophage MS2, during simulated vomiting. PLoS One. 10 (8), e0134277(2015).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

דגימת ביוארוסולזיהוי נגיפיםאימפנג'ר נוזלימיצוי חומצות גרעיןזיהוי באמצעות qRT-PCRתא ביוארוסולניטור סביבתיריכוז נגיפיבקטריופאג MS2
זיהוי של וירוסים Bioaerosols באמצעות אניון Exchange שרף
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.