מאמר שיטה

ההתרחבות של דו-מימד Electrospun Nanofiber מחצלות שלוש-מימד פיגומים

6.4K צפיות

DOI:

10.3791/58918

7 בינואר 2019

במאמר זה

סיכום

מאמר זה מדגים את הטכניקה של הרחבת שטיחון nanofiber המסורתי, נמצא תחת ניהול דו-מימד (2D) electrospun לתוך גרדום (3D) 3-מימד דרך ירידת נוזלים2 CO subcritical. פיגומים אלו רבודה תלת-ממד, רמזים nanotopographic הסלולר מחקים מקרוב, לשמר את הפונקציות של מולקולות וחיסונים אנקפסולציה בתוך nanofibers.

תקציר

Electrospinning כבר הטכנולוגיה המועדפת בהפקת לפיגום סינתטי, פונקציונלי בשל ביומימטיקה מטריצה חוץ-תאית, הפקד נוחות של הרכב, מבנה בקוטר של סיבים. עם זאת, למרות היתרונות הללו, nanofiber electrospun מסורתיים פיגומים באים עם מגבלות כולל מאורגן nanofiber התמצאות, נקבוביות נמוכה, גודל הנקבוביות קטן ו מחצלות בעיקר דו מימדי. בתור שכזה, יש צורך גדול לפיתוח תהליך חדש עבור בדיית פיגומים nanofiber electrospun זה יכול להתגבר על המגבלות הנ. במסמך זה, התווה שיטה פשוטה הרומן. מזרן nanofiber דו-ממדית מסורתית הופכת לפיגום 3D עם עובי הרצוי, המרחק, נקבוביות nanotopographic רמזים כדי לאפשר תא זריעה והתפשטות דרך ירידת נוזלים2 CO subcritical. בנוסף עשו איתו התחדשות רקמות להתרחש, שיטה זו מספקת גם את ההזדמנות כדי לתמצת מולקולות ביו כגון פפטידים מיקרוביאלית למשלוח סמים מקומי. CO2 מורחבת nanofiber פיגומים החזק פוטנציאל התחדשות רקמות, ריפוי פצעים, מידול תלת-ממד רקמות ו תרופות אקטואלי.

מבוא

הרעיון של פיתוח לפיגום סינתטי, זה יכול להיות מושתל לתוך חולים כדי לסייע רקמות תיקון והתחדשות הוא זה יש חילחלו השדה רפואה רגנרטיבית במשך עשרות שנים. לגרדום סינטטי אידיאלי מגישה לזירוז נדידת תאים שבסביבה רקמה בריאה, מספקת ארכיטקטורה התא זריעה אדהזיה, איתות, התפשטות, בידול, תומך vascularization, מאפשר חמצון נאותה, תזונה משלוח, ומקדם את הפעילות החיסונית המארח כדי להבטיח הצלחה לאחר ההשתלה1. בנוסף, זה יכול לשמש כנשא להטבעת מולקולות מיקרוביאלית לסייע1,3,6,7,8,9<....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כל ויוו ההליכים המתוארים להלן אושרו על ידי ועדת IACUC במרכז הרפואי של אוניברסיטת נברסקה.

1. מכינים את הפתרונות עבור Electrospinning רגיל

  1. שפופרת זכוכית 20 מ"ל, לפזר 2 גר' poly(ε-caprolactone) (PCL, Mw = 80 kDa) בתערובת ממס של דיכלורומתאן (DCM) ו- N, N-dimethylformamide (DMF) עם קצבה 4:1 (v/v)-ריכוז של 10% (w/v).
    התראה: ידית DCM ו DMF בשכונה מאוורר היטב כדי למנוע חשיפה האדים. אין לחשוף DCM חומרים פלסטיים.
  2. להכניס את מבחנה בתוך מסובב המעבדה עד הפתרון נעשה ברור. הפתרון יכול לערבב בין לילה.
  3. אם מתוך כוונה להטביע ביו חומרים כמו פפטידים או סמים לתוך לגרדום, ליצור פתרון נפרד, לאחסן בטמפרטורה 4 ° C עד מוכן לשי....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

היעילות של הרחבת electrospun דו-ממדית מסורתית nanofiber מחצלות לתוך פיגומים תלת-ממד באמצעות לחצים של נוזל2 CO subcritical הודגם בתפקידים שונים: העובי של פיגומים עלה מ 1 מ"מ כאשר מטופל-2.5 מ מ, 19.2 מ"מ עם אחד ושני CO2 טיפולים, בהתאמה (איור 3 א). המאפיין נקבוביות-a של הארכיטקטורה קריטי עבור תא זריעה-גם הגדילה באופן התואם עובי מוגברת (איור 3C). נקבוביות פיגומים עלה מ 79.5% עבור לא מטופל מחצל.......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

להפוך electrospun דו-ממדית מסורתית nanofiber מחצלות המורחב פיגומים תלת-ממד באמצעות CO2 לחצים נחקר. Nanofiber דו-ממדית מסורתית מחצלות בהצלחה המורחב באמצעות subcritical נוזל2 CO. השלבים הקריטיים הם לפברק 2D nanofiber מחצלות תחת תנאי ממוטבת ואחתוך מחצלות ללא עיוות בקצוות (למשל., באמצעות מספריים כירורגיים). זה CO2-nanofiber המורחב פיגומים יש יתרונות רבים על מחצלות 2D המסורתי כולל מבני שכבות (איור 3 א-B), פחות אריזה צפיפ.......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

מחברים מכריז שאין אין ניגוד אינטרסים.

תודות

עבודה זו נתמכה על ידי מענקים של לאומי המכון כללי רפואי למדע (NIGMS) ב- NIH (20 P 2 GM103480-06 ו- 1R01GM123081 כדי J.X.), את הכספים אוטיס גלאבה קרן למחקר רפואי, NE LB606 ו אתחול הרפואי אוניברסיטת נברסקה מרכז.

....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
PolycaprolactoneSigma-Aldrich440744
N,N-DimethlyformamideFisher ChemicalD-199-1
DichloromethaneFisher ChemicalAC61093-1000
Coumarin 6Sigma-Aldrich546283
תוף פלדה מסתובבמותאם אישיתזה משמש כאספן במהלך אלקטרו-ספינינג.
משאבת מזרקפישר סיינטיפיק14-831-200ספינינג קואקסיאלי דורש שתי משאבות מזרק בודדות.
RevolverLab Net InternationalH5600מסובב מעבדה מתכוונן לערבוב פתרונות
מחט היפודרמית (27G x 1 1/2 אינץ')EXCELINT International Co26426זהו חלק מהדוגמה המוצגת בהתאמה אישית של נוזל קואקסיאלי המוצג.
מחט היפודרמית (21G x 1 1/2 אינץ')EXCELINT International Co26416זהו חלק מהדוגמה המוצגת בהתאמה אישית של נוזל קואקסיאלי המוצג.
ספק כוח DC במתח גבוהגמא מחקר מתח גבוהES30
סריקת מיקרוסקופ אלקטרוניםFEINova 2300
מיקרוסקופ פלואורסצנטיZeissAxio Imager 2
LL 37 ELISA KitHycult BiotechHK321-02

מקורות

  1. Chen, S., et al. Recent advances in electrospun nanofibers for wound healing. Nanomedicine. 12 (11), 1335-1352 (2017).
  2. Khandalavala, K., Jiang, J., Shuler, F. D., Xie, J. Electrospun Nanofiber Scaffolds with Gradations in Fiber Organization. Journal o....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

CO2

מאמרים קשורים