כאן, אנו מספקים גישה שימושית לחקר המנגנון של כשל המוח הימני. גישה נוחה יותר ויעילה יותר לכווץ עורק הריאתי מוקמת באמצעות כלים כירורגיים שנעשו. בנוסף, מסופקים שיטות להערכת איכות הגישה הזאת באמצעות האקו-לב והצנתור.
מאמר שיטה
כאן, אנו מספקים גישה שימושית לחקר המנגנון של כשל המוח הימני. גישה נוחה יותר ויעילה יותר לכווץ עורק הריאתי מוקמת באמצעות כלים כירורגיים שנעשו. בנוסף, מסופקים שיטות להערכת איכות הגישה הזאת באמצעות האקו-לב והצנתור.
המנגנון של הכשל החדרית הימני (RVF) דורש הבהרה בשל ייחודו, תחלואה גבוהה, תמותה גבוהה, ואופי עקשן של RVF. הקודם מודלים עכברוש מחקה התקדמות RVF תוארו. בהשוואה לחולדות, עכברים נגישים יותר, חסכוני, ובשימוש נרחב בניסויים בבעלי חיים. פיתחנו את הגישה לכווץ עורק הריאתי (PAC) אשר מורכב של פסי הגזע הריאתי בעכברים כדי לגרום להיפרפרס הימני (RV). המחט מיוחד תפס כירורגי תוכנן המאפשר הפרדה קלה יותר של העורקים ואת גזע הריאתי. בניסויים שלנו, השימוש במחט זו מפוברק מופחת הפחתת הסיכון של העורקים העורקי ושיפור שיעור ההצלחה הכירורגית 90%. השתמשנו המחט מרווח שונים קטרים כדי ליצור בדיוק לכווץ כמותי, אשר יכול לגרום לדרגות שונות של היפרפרס RV. אנו לכמת את מידת הכווץ על ידי הערכת מהירות זרימת הדם של הרשות הפלסטינית, אשר נמדדה על ידי האקו הטרנסקרדיוגרפיה שאינה פולשנית. הפונקציה RV הוערך בדיוק על ידי צנתור לב ימני במהלך 8 שבועות לאחר הניתוח. מכשירים כירורגיים שנעשו מצוידים בחומרים משותפים באמצעות תהליך פשוט קל לשלוט. לכן, גישת ה-PAC המתוארת כאן קלה לחיקוי באמצעות כלי נגינה הנעשים במעבדה וניתן להשתמש בה באופן נרחב במעבדות אחרות. מחקר זה מציג גישה שונה PAC כי יש שיעור הצלחה גבוה יותר מאשר דגמים אחרים 8-שבוע שיעור ההישרדות של 97.8%. גישה זו PAC מספק טכניקה שימושית עבור לימוד מנגנון RVF ויאפשר הבנה מוגברת של RVF.
בעיות RV (RVD), מוגדר כאן כראיות של מבנה RV נורמלי או פונקציה, קשורה לתוצאות קליניות עניים. RVF, כשלב הסיום של הפונקציה RV, היא תסמונת קלינית עם סימנים ותסמינים של אי ספיקת לב הנובע RVD מתקדמת1. עם הבדלים במבנה ותפקוד פיזיולוגי, המוח השמאלי (LV) כשל RVF יש מנגנונים פתופסלוגיים שונים. כמה מנגנוני הפתופסולוגית עצמאיים ב RVF דווחו, כולל יתר ביטוי של β2-אדראררגיות הקולטן איתות2, דלקת3, שיפוץ רוחבי כדורית, ו-Ca2 + טיפול בתפקוד4 .
RVF יכול להיגרם על ידי נפח או עומס הלחץ של הקרוואן. הדגמים הקודמים בעלי חיים השתמשו SU5416 (מעכב חזק וסלקטיבי של קולטן גורמי הצמיחה של כלי הדם) בשילוב עם היפוקסיה (suhx)5,6 או המונונוין7 כדי לגרום ליתר לחץ דם ריאתי, אשר תוצאות RVF משנית למחלות כלי דם ריאתי2. החוקרים העורכים מחקרים אלה התמקדו בוולטורה במקום בהתקדמות פתולוגית של RVF. בנוסף, למונרוטלילין יש השפעות לב במיוחד שאינן יכולות לייצג בדיוק מחלת קרדיוגנטית. דגמים אחרים השתמשו אלוהי העורקים כדי לגרום עומס יתר של נפח rvf8. עם זאת, ניתוח זה קשה לבצע ולא הולם עבור עכברים, הדורשים תקופות אינדוקציה ארוכות לייצור RVF.
מודלים של חולדות PAC באמצעות קטעי פסים קיימים גם9,10. לעומת חולדות, עכברים יש יתרונות רבים כמו מודלים בעלי חיים של מחלות לב, כגון רבייה קלה יותר, שימוש נרחב יותר, מופחת עלויות, גישה שינוי גנים11. עם זאת, קטרים של קליפים פסים בדרך כלל נע בין 0.5 מ"מ ל 1.0 מ"מ, אשר גדולים מדי עבור עכברים9. בנוסף, קשה לייצר את הקליפ, לחקות ולהפיץ את הרצועות במעבדות אחרות.
אנו מספקים פרוטוקול לפתח מודל הרבייה שונה rvf עכבר מבוסס על מחקרים דיווחו, אשר משתמש PAC כדי לחקות את tetralogy של fallot ותסמונת נונן או אחרים עורקים ריאתי מחלות דם12,13, 14,15,16,17,18,19. גישה זו PAC נוצר על ידי ליגדירוג הגזע הריאתי של עכברים באמצעות בריח ומרווח המחט עשה מוכן לשלוט על מידת הכווץ. המחט תפס עשוי מזרק מעוקל 90 ° עם תפר משי קלוע עבר דרך המזרק. המחט מורכב מחומרים נפוצים באמצעות תהליך קל להתמחות. המחט ריפוד מעוקל 120 ° מן מחט מד. מחטי מרווח עם קטרים שונים (0.6-0.8 מ"מ) משמשים, בהתאם למשקל העכברים (20-35 g). בנוסף, אנו מקימים קריטריון הערכה כדי לקבוע את היציבות והאיכות של מודל RVF באמצעות האקו וצנתור הלב הימני. אנו משתמשים בעכברים כחיית מודל בגלל השימוש הנרחב שלהם בניסויים אחרים. המחטים שנעשו במעבדה קלות להתרבות וניתן להשתמש בה באופן נרחב במעבדות אחרות. מחקר זה מספק גישה טובה לחוקרים לחקור את המנגנון של RVF.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
כל ההליכים בוצעו בהתאם להנחיות המוסדיים לחקר בעלי חיים, המתאימים למדריך לטיפול ולשימוש בבעלי חיים מעבדתיים שפורסמו על ידי מכוני הבריאות הלאומיים של ארה ב (NIH פרסום No. 85-23, תוקן ב 1996). C57BL/6 עכברים גברים (8-10 בן שבועות, במשקל 20-25 g) סופקו על ידי מרכז בעלי חיים של האוניברסיטה הרפואית הדרום. לאחר ההגעה, העכברים היו שוכנו תחת מחזור החושך/האור 12/12 h, עם מספיק אוכל ומים.
1. הכנת כלי הניתוח והייצור של המחטים
2. הכנה לניתוח
3. כירורגיה
4. הערכה של הפונקציה RV לאחר הניתוח
הערה: ניתן לזהות שינויים באקוקרדיוגרפי 3 ימים לאחר הניתוח.
5. צנתור לב ימני להערכת הפונקציה RV
הערה: צנתור לב ימני בוצע 8 שבועות לאחר הניתוח כדי להעריך את הפונקציה RV, באמצעות קטטר 1.0 F ומערכת ניטור.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
במחקר זה, עכברים הוקצו באופן אקראי לקבוצת PAC (n = 9) או קבוצת הפעולה המזויף (n = 10). אקו-קרדיוגרפיה בוצעה ב-1, 4 ו -8 שבועות לאחר הניתוח. שמונה שבועות לאחר הניתוח, בעקבות ההערכות האחרונות של האקו והצנתור, הורדמים העכברים, וליבם נקצרו להערכה מורפולוגית והיסטולוגית.
מכווץ החדק של הריאות גרם היפרפרס RV (איור 2). לעומת הקבוצה המזויף, מהירות שיא גבוהה יותר (איור 2...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גידול פתולוגי בלחצים מילוי קרוואן התוצאה היא שינוי שמאלי של המחיצה, אשר יכול לשנות את הגיאומטריה LV21. שינויים אלה תורמים פלט לב מופחת ושבריר הוצאה LV (LVEF), אשר יכול לגרום הפרעת הומודינמיקה של מערכת הדם22. לכן, מודל יעיל, יציב וחסכוני ללימוד המנגנון של RVF הוא בעל ערך.
פיתחנו גישה יעילה יותר ומאוד מתוכנות ל-PAC באמצעות בריח המחט מרווח עשה מוכן. המנעול עשה מאפשר הפרדה קלה יותר של העורקים ואת גזע הריאות, אשר מפחית את הסיכון של העורק העורקי ומשפר ...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
. למחברים אין מה לגלות
עבודה זו היתה נתמכת על ידי מענקים של הארגון הלאומי למדעי הטבע של סין (81570464, 81770271; לד ר ליאו) ופרויקטים תכנון עירוניים של הטכנולוגיה המדעית של גואנגג'ואו (201804020083) (לד ר ליאו).
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| מכונת הנשמה ALC-V8S | שנחאי אלקוט ביוטק CO | ALC-V8S | סיוע אוורור |
| בעלי חיים מיני מאוורר | Haverd | סוג 845 | סיוע אוורור |
| מערכת אולטרסאונד לבעלי חיים VEVO2100 | Visual Sonic | VEVO2100 | אקו לב |
| תאורה קרה | אולימפוס | ILD-2 | כרית חום אור |
| - מערכת כירורגית תרמוסטטית (ALC-HTP-S1) | SHANGHAI אלקוט ביוטק CO | ALC-HTP-S1 | חימום |
| איזופלורן | RWD מדעי החיים | R510-22 | הרדמה ממליצה |
| Matrx VIP 3000 איזופורן וופורן | תאגיד Midmark Corporation | VIP 3000 | הרדמה |
| רפואית תפר משי קלוע (6-0) | שנחאי Pudong Jinhuan ציוד רפואי ושות' | 6-0 | |
| תפר ניילון רפואי קשירה (5-0) | Ningbo Medical Needle Co. | 5-0 | קטטר |
| תפר מילר (1.0 F) | מכשירי AD | 1.0F | לצנתור לב ימין |
| מלח נתרן פנטוברביטל | Merck | 25MG | הרדמה |
| PowerLab מערכת הקלטה פיזיולוגית רב כיוונית | מכשירי AD 4 | /35 | הקלט את התוצאה של צנתור לב ימין |
| איזון אלקטרוני מדויק | מכשיר דנבר | חיישן שקילה | TB-114 |
| מחט תפס מתוצרת עצמית | הפרד בין אבי העורקים לתא המטען הריאתי | ||
| מחט ריפוד מתוצרת עצמית | התכווצות | ||
| אינטובציה עצמית | |||
| ציוד מיקרוכירורגיה לבעלי חיים קטנים | Napox | MA-65 | מכשירים כירורגיים |
| ג'ל שידור | גואנג גונג פאי | 250 מ"ל | אקו לב |
| קרם הסרת שיער Veet קרם | רקיט בנצ'יסר | RQ/B 33 סוג 2 | הסר שיער של עכברים |
| מעקר קיטור בלחץ אלקטרותרמי אוטומטי | אנכי Hefei Huatai ציוד רפואי ושות' | LX-B50L | ניקוי אוטומטי של מכשירי הניתוח |
| מיקרוסקופ אנכי לניתוחי בעלי חיים קטנים | Yihua מכשיר אופטי | Y-HX-4A | לצנתור לב ימין |
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה
בקש הרשאה