הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

מורנה הנדנדקטומיה מודל של קוליטיס כרונית הקשורים סרטן המעי הגס על ידי לוקליזציה מדויקת של תיקון Caecal

10K צפיות

DOI:

10.3791/59921

24 באוגוסט 2019

במאמר זה

סיכום

הפרוטוקול המוצג מתאר הסרה כירורגית נתיישב של התוספתן (טלאי caecal) בעכבר ואחריו אינדוקציה של מחלת המעי הגס מחלות הקיבה הקשורים סרטן. המודל להסרת התוספתן של murine מאפשר חקירה של התפקיד הביולוגי של התוספתן בפתוגנזה של מחלת העיכול האנושית.

תקציר

התוספתן האנושי היה מעורב לאחרונה לשחק תפקידים ביולוגיים חשובים בפתוגנזה של מחלות מורכבות שונות, כגון סרטן המעי הגס, מחלות מעי דלקתיות, מחלת פרקינסון. כדי ללמוד את התפקוד של הנספח, מודל מושפע מחלת התוספתן הקשורים murine הוקמה והפרוטוקול צעד אחר צעד שלה מתואר כאן. דו ח זה מציג פרוטוקול נתיישב להסרת תיקון caecal בעכברים ואחריו אינדוקציה כימית של סרטן המעי הגס כרונית הקשורים באמצעות שילוב של דטרן סולפט נתרן (DSS) ו האזובתאן (aom). IgA התאים הספציפיים ריכוז IgA הופחת באופן משמעותי עם הסרת התיקון caecal בזכר C57BL/6 עכברים לעומת אלה בקבוצה המזויף. במקביל ניהול 2% DSS ו AOM הביא כמעט 80% עכברים הישרדות הן התחזות ו לנדקטומיה קבוצות ללא ירידה משמעותית במשקל הגוף. תוצאות היסטולוגית אישר דלקת חוקן ודרגות שונות של אדנוקרצינומה. מודל זה יכול לשמש למחקר של התפקיד הפונקציונלי של הנספח בשמירה על המעיים microbiota המעי הפתוגנזה של הבטן קוליטיס וממאירות, כמו גם עבור פיתוח פוטנציאלי של תרופות לפילוח טיפולים.

מבוא

ניתוח התוספתן הקליני הוא הליך כירורגי סטנדרטי מעורבים הסרת התוספתן בעיקר בשל דלקת (למשל, התוספתן)1,2,3. עם זאת, הפונקציה הביולוגית של התוספתן האנושי תוספתן נשאר שנוי במחלוקת4,5,6. התוספתן נחשב כשריד שריד הקרנת מתוך המעי הגס במעיים גדולים. עד לאחרונה, מחקרים אבולוציוניים, אימונולוגיים, מורפולוגיים ומיקרוביולוגית הציעו כי הנספח עשוי להחזיק בפונקציות שונות. תפקידים אלה כוללים את הייצור של החיסוני (g., IgA ו IgG), מגוון של תאים B ו-T תאים קריטיים עבור תגובות החיסונית אדפטיבית בתוך רקמות ....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כל הליכים בעלי חיים אושרו על ידי טיפול בעלי חיים מוסדיים והשתמש בוועדה של שיאן Jiaotong אוניברסיטת (No. XJTULAC2019-1023).

1. הנדקטומיה של עכברים

  1. בית 8 – 10-שבוע בן C57BL/6 עכברים גברים בסביבה מוסמכת מוסמך הפתוגן חינם (SPF) למשך שבוע אחד לפני הניתוח.
  2. להכין את הכלים הבאים סטרילי כירורגי: זוג אחד של מיקרו מספריים, זוג אחד של מיקרו מלקחיים, שני גדלים (4-0 ו 8-0) של התפרים נספג ללא ספיגה, עט קרישת חשמלי עם מחזיק מחט, 75% אלכוהול רפואי, שטיפת יוד מבוססי ( לדוגמה, entoiodine), וחבילה של מטליות כותנה סטרילי.
  3. מילוי מזרק 10 מ ל עם הקדם מחומם 0.9% מלוחים פיזיולוגיים עבור סומק הבטן ומחות במהלך הניתוח.
  4. הintraperi....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

הקמת מודל להסרת תוספתן

זה מודל מורנדקטומיה המודל של קוליטיס כרונית הקשורים סרטן המעי הגס יכול להיווצר על ידי ביצוע צעדים כירורגיים רציפים האינדוקציה מומחש באיור 1. המקומות התכופים ביותר של caecum הם בתוך השמאל והימין פוסה ואחריו קו האמצע של הבטן (איור 2). השיעור המוצלח של טרום לוקליזציה של caecum לפני חתך הבטן באמצעות שיטת מישוש הוא כמעט 70% (מידע משלים, לוח S2). תהליכי הניתוח להסרת תוספתן מהווים בעיק.......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

מודל להסרת תוספתן מורבית של סרטן המעי הגס הקשורים קוליטיס הושגה באמצעות שלבים כירורגיים עם שיעור הישרדות גבוהה בעכברים. ברוב המקרים, כיוון שהcaecum הוצב תחת קיר הבטן (שולחן משלים 1, הטבלה השלמה 2, ואיור 2), היה קשה לשפוט את מיקומו ללא כריתת אונה. בפרוטוקול כירורגי זה, צעד קל של נגיעה הבליטה הוצגה, והערכה כמותית של מיקום מעי סופק גם כהנחיה כדי להגדיל את הדיוק ללוקליזציה מראש של מעי (איור 2). ניצול של תכונות אנטומיים להסיר את תיקון caecal ממוזער ש.......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

. למחברים אין מה לגלות

תודות

עבודה זו נתמכת באופן חלקי על ידי קרנות המחקר הבסיסי של האוניברסיטה המרכזית (G2018KY0302), האוניברסיטה הבסיסית לפיתוח מחקר באוניברסיטת (KT00062), הלאומי המדע הטבעי הקרן של סין (81870380), ואת פרס המחקר הקליני של בית החולים המסונף הראשון של אוניברסיטת שיאן Jiaotong בסין (לא. XJTU1AF-2015-029). המחברים מודים ד ר Chengxin Shi עבור הצעות טכניות שלו במהלך השלב הקודם של המחקר של המודל להסרת תוספתן murine, כמו גם הפתולוג ד ר. Xi Liu עבור הערכה של H & E כתמים תוצאות של גידולים קוליטיס המעי הגס. י ביצעה את הפגנת הניתוח, עשתה ניתוח נתונים וכתב את טיוטת כתב היד; J.L., G.L., Z.P., ו Y.M. נטלו חלק בהכנה כירורגית, אוספי רקמות והפקת וידאו; M.Z. ביצע את הזרימה cy try ו-אליסה; Q.W. ו H....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
אזוקסימתאן (AOM)סיגמא-אולדריץ', בע"מA5486
Dextran סולפט מלח נתרן (DSS)MP Biomedicals, Inc.160110
Entoiodineשנחאי likon חיטוי טכנולוגיה גבוהה ושות' בע"מ310102
קליפר דיגיטליNingbo yuanneng מסחר ושות' בע"מ4859263
4-0 תפרי משיYuanlikang ושות' בע"מ20172650032
8-0 Prolene תפריםYuanlikang ושות' בע"מ20172650032
עט קרישה חשמליChuang מיי ציוד רפואי ושות' בע"מ28221777292
מזרק חד פעמי 1 מ"לShengguang מוצרים רפואיים ושות' בע"מ3262-2014
מזרק חד פעמי 10 מ"לShengguang מוצרים רפואיים ושות' בע"מ3262-2014
75% אלכוהול רפואישאנדונג אנג'י היי-טק חיטוי טכנולוגיה ושות' בע"מ371402AAJ008
פנטוברביטל מלחנתרןסיגמא-אולדריץ', בע"מ57-33-0
פיזיולוגי מלחשאנדונג qidu פרמצבטיקה ושות' בע"מH37020766
ספוגית כותנה סופגתHenan ruike רפואית ושות', בע"מRK051
מכשירים כירורגיים-עינייםJinzhong שנחאי ושות'. בע"מWA3050

מקורות

  1. Leung, T. T., et al. Bowel obstruction following appendectomy: what is the true incidence. of Surgery. 250 (1), 51-53 (2009).
  2. Salminen, P., et al. Antibiotic Therapy vs. Ap....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

IgAFlow ELISA