אנו מתארים פרוטוקול כירורגי כדי לגרום בעקביות בירידה חזקה בבית החזה של אבי העורקים בעכברים. ההליך כולל כריתת האונה השמאלית, החשיפה של אבי העורקים החזה, ומיקום של ספוג ספוגה הלבלב לבלב חזירי על הקיר של אבי העורקים.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
המודל הכירורגי של מורנה של Elastase אקטואלי המושרה מפרצת אבי העורקים החזי
במאמר זה
סיכום
תקציר
על פי המרכז לבקרת מחלות, מחלת אבי העורקים (AAs) נחשבו לגורם מוביל של מוות בכל הגזעים ובשני המינים מ-1999-2016. צורות מפרצת כתוצאה של היחלשות מתקדמת ובסופו של דבר התרחבות של העורקים, אשר יכול קרע או דמעה ברגע שהוא מגיע לקוטר קריטי. מפרצות של אבי העורקים היורדים בחזה, שנקרא בירידה בdTAA של אבי העורקים הבית החזה (ב), לפצות על חלק גדול של מקרים מפרצת בארצות הברית. הקרע dTAA uncontained הוא קטלני כמעט אוניברסלית, ותיקון בחירה יש שיעור גבוה של תחלואה ותמותה. מטרת המודל שלנו היא ללמוד dTAA באופן ספציפי, כדי להבהיר את הפתופסיולוגיה של dTAA ולחפש מטרות מולקולריות כדי לעצור את הצמיחה או להקטין את הגודל של dTAA. על ידי בעל מודל murine ללמוד מחלות בבית החזה בדיוק, טיפולים ייעודיים ניתן לפתח כדי לבדוק במיוחד dTAA. השיטה מבוססת על המיקום של חזירי הלבלב elastase (PPE) ישירות על קיר אבי העורקים החיצוני murine לאחר חשיפה כירורגית. זה יוצר תגובה הרסנית דלקתית, אשר מחליש את חומת אבי העורקים ומאפשר היווצרות מפרצת במשך שבועות עד חודשים. למרות מודלים murine בעלי מגבלות, מודל dTAA שלנו מייצרת מפרצות חזקות של גודל צפוי. יתר על כן, מודל זה יכול לשמש כדי לבדוק מטרות גנטיות ותרופות אשר עלול לעצור את הצמיחה dTAA או למנוע קרע. בחולים אנושיים, התערבויות כגון אלה יכולים למנוע קרע מפרצת, והתערבות כירורגית קשה.
מבוא
המטרה של שיטה זו היא ללמוד את ההתפתחות, פתופסולוגיה, ושינויים מבניים מורטין יורד העורקים החזי במהלך היווצרות מפרצת אבי העורקים. המודל שלנו מציע שיטה מיותרת ועקבית כדי לגרום לטרשת העורקים הבית החזה (dTAA) בעכברים ובכך מאפשר בדיקות של מעכבי גנטיים ופרמקוקולוגי שונים. העבודה הזאת יכולה לעזור לזהות תרופות גן-טיפולים אשר יכול להיות מתורגם לאסטרטגיה הטיפול קיימא עבור בני אדם עם מחלת dTAA.
dTAAs טופס כאשר הקיר של העורקים של בית החזה הופך נחלש ומדיטים לאורך זמן עד להגיע לקוטר קריטי כאשר קרע או קרע יכול להתרחש לאחר מכן. קלינית, dTAA יכול להתקדם בשתיקה, הגדלת גודל עד מבנה של קיר אבי העורקים הוא כל כך מעוות, כי בסופו של דבר נכשל, עם השלכות קטסטרופיות.....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
פרוטוקולי בעלי חיים אושרו על ידי הוועדה לטיפול בבעלי חיים מוסדיים באוניברסיטת וירג (No. 3634).
1. אינדוקציה של הרדמה וצנרור
- מ8-10 ניחים עכבר C57BL/6 גבר בן שבוע בחדר סגור עם זרימה רציפה של 5% isof ane ותערובת חמצן עבור 5 דקות, עד הנשימות הם בעליל האטה.
הערה: זנים שונים, מינים וגילאים של עכברים ניתן להשתמש בהתאם לפרוטוקול ניסיוני. עכברים נקבה עלול להיות קשה יותר לצנרור בגלל גודל קטן יותר ולכן יותר קל נשימה. - צנרור את העכבר כפי שמתואר על ידי ואנדיבורט ואח '13.
הערה: צעד הצנרור הוא החלק הקשה ביותר של מודל זה כדי ללמוד ולבצע. המחברים הנ ל לעשות עבודה מצוינת להסביר את השלבים בווידאו שלהם.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
היישום של הפרוטוקול שלנו תוצאות dTAA חזק בעכברים לעומת שולטת מלוחים. TAAs פיתח הם כישורי צורה ומתרחשים רק בחלק המטופל של העורקים (איור 1 ואיור 2)11. איור 2 מראה דוגמה של וידאו micrometry מדידה בקציר רקמות. באמצעות משוואה 1, התרחבות אבי העורקים היא 130% בדוגמה זו.
המחקר המקורי על ידי ג'ונסטון ואח '11 המתארת את המודל הראה עלייה משמעותית התרחבות אבי העורקים ב מ.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
את החזה ואת העורקים הבטן הם תאית ו embryologically נפרדות, אשר רלוונטי מחלת אנאאולי14,15,16. לכן, יש צורך במודל בעלי חיים ספציפי ללימוד TAA. למרות מודלים murine dTAA אחרים פורסמו8, שלנו היא המודל היחיד כדי ליצור בירידה האבי העורקים רחבה אשר יכול להיחשב אנאורילי באמת (מעל 50% התרחבות). יתר על כן, המודל שלנו הוא מהיר יחסית לביצוע ותוצאות התרחבות מקסימלית ב 14 ימים לעומת 16 שבועות ב CaCl2 מודל
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
. למחברים אין מה לגלות
תודות
עבודה זו נתמכת על ידי המלגה לפיתוח המדען AHA 14SDG18730000 (טרשת נפוצה), NIH K08 HL098560 (G.A.) ו RO1 HL081629 (G.R.U.) מענקים. פרויקט זה נתמך על ידי קרן כירורגיה של החזה למחקר וחינוך (TSFRE) מענק מחקר (PI: G. Ailawadi). התוכן הוא אך ורק באחריות המחברים ואינו מייצג בהכרח את ההשקפות של NHLBI או את TSFRE. אנו מודים לאנתוני הרינג וסינדי דודסון על הידע שלהם ועל מומחיותם הטכנית.
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| אנגיוקטטר (22G) | משמש לפינצטה של ET | ||
| Tube Dumont; דפוס #7 x2 | Roboz | RS-4982 | |
| מלקחיים לרקמות Graefe | Roboz | RS-5158 | |
| פוגע במלקחיים x2 | Roboz | RS-5097 | |
| מחזיק מחט תוך לבבית; עדין במיוחד; מלתעות קרביד; 7 אינץ' | אורך Roboz | RS-7800 | |
| KL 1500 LED מקור אור | Leica | 150-400 | |
| M205A מיקרוסקופ Dissction | Leica | CH 94-35 | |
| מספריים איריס, 11 ס"מ, טונגסטן קרביד | World Precision Instruments | 500216-G | |
| לוח | לשימוש עם סט מפסק העכבר | ||
| סט מפסק עכבר | קנט | SURGI-5001 | זקוק ל-2 מקבעים קצרים וגבוהים |
| מאוורר עכבר MiniVent סוג 845, 115 וולט, ספק כוח עם מחבר ארה"ב | מכשיר הרווארד | 73-0043 | מאוורר MiniVent לעכברים (דגם 845), חיה יחידה, סיגמא אולדריץ' אלסטאז מבוקר נפח |
| מלבלב חזיר | E0258-50MG | ניתן לרכוש בבקבוקים בגדלים שונים | |
| כלי קטן ערכת צריבה | כלי מדע עדינים | 18000-00 | ממליץ להשתמש בסוללות AA נטענות |
| מספריים קפיציות, 10.5 ס"מ | מכשירי דיוק עולמיים | 14127 | |
| ספוגיות סטריליות (ספוגים) | Sugi | 31603 | ניתן לחתוך לגודל |
| Surgi Suite פלטפורמה כירורגית | קנט | לחבר ללוח קליפס | |
| Tech IV Isoflurane Vap | Jorgensen מעבדות | J0561A | וופורייזר הרדמה |
מקורות
- Coady, M. A., et al. What is the appropriate size criterion for resection of thoracic aortic aneurysms. Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 113 (3), 489-491 (1997).
- Aggarwal, S., Qamar, A., Sharma, V., Sharma, A.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
תגיות
