Method Article

שלב מוצק 11ג-מתילציה, טיהור וניסוח לייצור מנותבים PET

DOI:

10.3791/60237

⸱

October 24th, 2019

 ,  ,  ,  ,  , 
1McConnell Brain Imaging Centre, Montreal Neurological Institute, McGill University, 2Department of Neurology and Neurosurgery, McGill University

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אנו מדווחים על טכניקה יעילה פחמן-11 רדיויניום לייצר מדורים הרלוונטיים קלינית עבור פליטת פוזיטרון טומוגרפיה (PET) באמצעות מחסניות החילוץ שלב מלא. מיכל בן 11 C-מתילגדירוג הסוכן הוא עבר דרך מחסנית טעונה מטעון עם המבשר והחלף רצופים עם אתנול מימית מספק כימית וכימית לחיות מעוקב טהור בתשואות רדיוכימית גבוהה.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

הפקה שגרתית של רדיומשדרים המשמשים טומוגרפיה פליטת פוזיטרונים (PET) בעיקר מסתמך על כימיה רטובה שבה synthon רדיואקטיבי מגיב עם מבשר לא רדיואקטיבי בפתרון. גישה זו מחייבת טיהור של מעקב באמצעות כרומטוגרפיה נוזלית ביצועים גבוהים (בדיקות) ואחריו ניסוח מחדש בממס תואם סתיימים המינהל האנושי. פיתחנו לאחרונה רומן 11C-מתילציה גישה לסינתזה יעילה מאוד של פחמן -11 התווית PET radiopharmaceuticals, ניצול מחסניות מוצק הפאזה כמו חד פעמי "3-in-1" יחידות לסינתזה, טיהור ו ניסוח מחדש של המשדרים. גישה זו מצמצמת את השימוש במאבבי הטיפול ומפחיתה את ההפסדים של מכשיר המעקב בקווי העברה ועקב ריקבון רדיואקטיבי. יתרה מזו, הטכניקה המבוססת על מחסנית משפרת את אמינות הסינתזה, מפשטת את תהליך האוטומציה ומקלה על תאימות לדרישות הייצור הטוב (GMP). כאן, אנו להדגים טכניקה זו בדוגמה של ייצור של מעקב PET מתחם פיטסבורג B ([11ג] pib), תקן זהב vivo הדמיה סוכן עבור לוחיות עמילואיד במוח האנושי.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

טומוגרפיה של פליטת פוזיטרונים (PET) היא מודאליות הדמיה מולקולרית אשר מסתמך על זיהוי הריקבון רדיואקטיבי של איזוטופ המצורפת מולקולה פעילה ביולוגית כדי לאפשר הדמיה vivo של תהליכים ביוכימיים, אותות והעתקות . פחמן -11 (t1/2 = 20.3 דקות) הוא אחד הרדיואיזוטופים הנפוצים ביותר ב PET בגלל השפע שלה במולקולות אורגניות ומחצית חיים קצר המאפשר מנהלות מעקב מרובים באותו יום לאותו נושא אנושי או בעלי חיים ו מפחית את העומס הרדיואקטיבי על המטופלים. משתמשים רבים המסומנים איזוטופ זה משמשים במחקרים קליניים ובמחקר בריאות בסיסי עבור vivo PET הדמיה של מטרות רלוונטיות ביולוגית והמתעוררים-[11ג] Raclopride D2/d3 קולטנים, [11ג] PiB עבור לוחיות ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. הכנת מאגרים ומשחרלי מאגר

  1. לפזר 2.72 גרם של סודיום אצטט הטרימים ב 100 mL של מים כדי להכין 0.2 M אצטט תמיסת נתרן (פתרון A).
  2. התמוססות 11.4 mL של חומצה אצטית קרחוני ב 1 L של מים כדי להכין 0.2 M פתרון חומצה אצטית (פתרון B).
  3. לשלב 50 mL של פתרון A עם 450 mL של פתרון B כדי להכין את מאגר אצטט ב-pH 3.7 (מאגר 1) על פי מרכז התייחסות מאגר15. ודא את ה-pH של המאגר עם רצועות pH או מד pH.
  4. לשלב 12.5 mL של אתנול מוחלט עם 87.5 mL של מאגר 1 כדי להפוך 12.5% מימית פתרון אטוח (לשטוף 1) בקבוק 100 mL.
  5. לשלב 15 מ ל של אתנול מוחלט עם 85 mL של מאגר 1 כדי להפוך 15% פתרון אטוח מימית (לשטוף 2) ב 100 mL בקבוק.
  6. לשלב 5....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כדי לסכם רדיוסינתזה טיפוסית של [11ג] pib, גז [11ג] CH3otf הוא עבר הראשון באמצעות מחסנית tC18 מראש עם פתרון של הקודמן (איור 1). הפרדת תערובת התגובה מושגת לאחר מכן על ידי הימנעות מאספקת פתרונות אתנול מימית כדלקמן. ראשית, 12.5% אטואה הרוב של הגיב [11ג] CH3OTF ו 6-OH-bta-0, ואז 15% אטוח שוטף את שרידי זיהומים, ולבסוף 50% אתנול פתרון להתחמק הרצוי [11ג] pib לתוך בקבוקון סטרילי. מעקב מדולל אז עם מאגר פ.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

למרות הופעתה האחרונה ואת אישור ה-FDA של מספר 18F מסומן PET מסומנים, כגון florbetapir, florbetaben ו flutemetamol, [11ג] pib נשאר מעקב התקן זהב הדמיה עמילואיד בשל ספיגת המוח מהיר נמוך לא ספציפי איגוד. כיום מעקב זה מסונתז באמצעות כימיה רטובה16 או באמצעות "לולאה יבשה" גישה4,17. שתי השיטות דורשות טיהור מיטומים ואחריו ניסוח מחדש באתנול מימית, אשר לוקח כ 20-30 דקות החל מ [11ג] CH3otf. בהשראת ח.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים מצהירים כי אין להם אינטרסים פיננסיים מתחרים.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מחקר זה היה נתמך באופן חלקי על ידי מענק 18-05 מאגודת האלצהיימר של קנדה (עבור A. K.) ואת המוח קנדה קרן עם תמיכה של בריאות קנדה. המחברים רוצים להכיר באוניברסיטת מקגיל הפקולטה לרפואה, מכון נוירולוגי מונטריאול מרכז הדמיה מקקונל המוח לתמיכה של עבודה זו. כמו כן, אנו מודים לגברת מוניקה לקטטוס-סמולה לעזרה בהליכי בקרת איכות ובד"ר ז'אן פול Soucy וגסאן מאסנה לגישה לרדיואיזוטופים ולמתקן הרדיוכימיה.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
6-OH-BTA-0ABX תרכובות ביוכימיות מתקדמות5101קודמן לא רדיואקטיבי של [11C]PiB
6-OH-BTA-1ABX תרכובות ביוכימיות מתקדמות5140תקן לא רדיואקטיבי של [11C]PiB
Agilent 1200 מערכת HPLCAgilent1200מערכת HPLC אנליטית
אתנול מוחלטאלכוהול מסחרי432526
מזרק המילטון (luer-tip, 250 ומיקרו; L)המילטוןHAM80701
MZ אנליטי PerfectSil 120MZ-Analysentechik GmbHMZ1440-100040עמוד HPLC אנליטי
Perkin Elmer Clarus 480 מערכת GC Perkin Elmer Clarus480כרומוטוגרף גז
סעפת פוליקרבונטScintomicsACC-101סעפת סינתזה
Restek MTX-Wax עמוד (30 מ', 0.53 מ"מ)Restek70625-273אנליטי GC טור
Scintomics GRP מודולScintomicsScintomics GRPיחידת סינתזה אוטומטית
Sep-Pak tC18 PlusWatersWAT020515מחסנית מיצוי שלב מוצק
סעפת עמידה בפני ממסScintomicsACC-201סעפת סינתזה
מחט עמוד השדרהBD405181
סטרילי קו הרחבהB. Braun8255059
מסנן סטריליMilliporeSLLG013SL
בקבוקון סטרילי (20 מ"ל)HuayiSVV-20A
מים סטרילייםBaxterJF7623
Synthra MeIplus ResearchSynthraMeIplus Research[11C]CH3I/[11C]CH<תת>3מזרק מודול OTf
(10 מ"ל)מזרק BD309604
(1 מ"ל)מזרק BD309659
(20 מ"ל)B. Braun4617207Vמזרק מתקן
מסנן אוורורMilliporeTEFG02525

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Langstrom, B., Lundqvist, H. The preparation of 11C-methyl iodide and its use in the synthesis of 11C-methyl-L-methionine. The International journal of applied radiation and isotopes. 27 (7), 357-363 (1976).
  2. Larsen, P., Ulin, J., Dahlstrøm, K., Jensen, M.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Solid Phase MethylationCarbon 11 RadiolabelingPET Tracer ProductionHPLC Free SynthesisCartridge Based TechniquePittsburgh Compound BRadiochemical Purity AnalysisGood Manufacturing PracticeLead Shielded Hot CellQuality Control Procedures

Related Articles