השתלה אלוגנאית העור הוא מודל סטנדרטי לארח assay T התגובות התא MHC-אנטיגנים שונים התורם. זה וידאו המאמר מספק הדרכה ויזואלית של כל צעד מעורב בביצוע BALB/c--> השתלת C57BL / 6 העור.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
במאמר זה
סיכום
תקציר
בתור אחד המודלים המחמירים ביותר והפחות מאתגר מבחינה טכנית, השתלת עור היא שיטה רגילה לארח assay T התגובות התא MHC-אנטיגנים שונים התורם. מטרת מאמר-video זה היא לספק את הצופה עם הפגנה צעד אחר צעד ויזואלית של השתלת עור באמצעות מודל העכבר. הפרוטוקול מחולק 5 מרכיבים עיקריים: 1) התורם קצירת העור; 2) הכנת הנמען להשתלה; 3) להשתלת עור; 4) הסרת התחבושת דחיית שתל ניטור: 5) עצות מועילות. בקיאים פעם, את ההליך עצמו צריך לקחת <10 דקות לבצע.
פרוטוקול
לפני תחילת הניסוי:
- לקבל אישור IACUC
- לעקר כלי ניתוח ו-Q-טיפים
I. רקמות התורם קציר
- להרדים עכבר התורם (בהתאם SOP של המוסד)
- שיער רטוב חזרה מהבסיס של האוזן עם אלכוהול
- התורם קציר העור על ידי חיתוך האוזן את בבסיס
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
כפי שמודגם במאמר-video זה, המודל השתלת עור היא שיטה מהירה וקלה לניטור allogeneic T התגובות התא. השתלה אלוגנאית העור יש מגוון רחב של יישומים נוצל עד assay את היעילות של מגוון רחב של סוכני מדכאות חיסון ואינדוקציה סובלנות פרוטוקולים, וכן כדי לחקור את ההשפעות הביולוגיות של נוגדנים חסימה שונים.
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
למחברים אין ניגודי עניינים להצהיר עליהם.
תודות
NIH אימונולוגיה הדרכה גרנט T32 AI 60,573 (KRG) ו-NIH מענק GM 41,514 (MDC)
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| פינצטה למיקרו-דיסקציה (מעוקלת) | Sigma-Aldrich | F4142 | |
| פינצטת שיני חולדה (1x2 שיניים, ישרה) | Fine Science Tools | 11053-10 | n=2 |
| מספרי סטראביזמוס (קצה קהה) | Fine Science Tools | 14074-11 | |
| פינצטת איריס (מעוקלת) | Fine Science Tools | 11065-07 | |
| מספרי קפיץ (זוויתיים) | Fine Science Tools | 15006-09 | |
| מחזיק מחטים מיקרוסקופי מסוג Halsey | Fine Science Tools | 12500-12 | |
| צלחות 10 cm | Corning | 430167 | |
| PBS | Cellgro | 21-040-CV | |
| Bupernex (Buprenorphine hydrochloride) | Reckitt Benckiser | 517201 | |
| מזרקי אינסולין (29 Ga) | Monoject | 8881 600145 | |
| מקלונים (Q-tips) | Solon Manufacturing Company | 362 | |
| להבי תער בעלי קו חיתוך יחיד (#9) | Smith & Nephew Inc. | 67-0238 | |
| חוט תפירה ממשי (2-0; PS-2) | Ethicon Inc. | 583H |
הדפסות חוזרות והרשאות
