ישנם מספר הבדלים בין החדרים הימניים והשמאליים. עם זאת, הפתופיזיולוגיה של אוטם החדר הימני (RVI) לא הובהרה. בפרוטוקול הנוכחי, מוצגת שיטה ניתנת לשחזור ליצירת מודל עכבר RVI, אשר עשויה לספק אמצעי להסביר את המנגנון של RVI.
מאמר שיטה
ישנם מספר הבדלים בין החדרים הימניים והשמאליים. עם זאת, הפתופיזיולוגיה של אוטם החדר הימני (RVI) לא הובהרה. בפרוטוקול הנוכחי, מוצגת שיטה ניתנת לשחזור ליצירת מודל עכבר RVI, אשר עשויה לספק אמצעי להסביר את המנגנון של RVI.
אוטם חדר ימין (RVI) הוא מצגת נפוצה בפרקטיקה הקלינית. RVI חמור יכול להוביל לתפקוד המודינמי קטלני והפרעות קצב. בניגוד למודל אוטם שריר הלב של העכבר (MI) הנפוץ שנוצר על ידי קשירת עורקים כליליים שמאליים, מודל העכבר RVI משמש לעתים רחוקות בשל הקושי הקשור ליצירת מודל. מחקר על המנגנונים והטיפול בשיפוץ RV ותפקוד לקוי המושרה על ידי RVI דורש מודלים של בעלי חיים כדי לחקות את הפתופיזיולוגיה של RVI בחולים. מחקר זה מציג הליך אפשרי ליצירת מודל RVI בעכברי C57BL/6J. יתר על כן, מודל זה אופיין על סמך הדברים הבאים: הערכת גודל אוטם ב 24 שעות לאחר MI, הערכה של שיפוץ לב ותפקוד עם אקוקרדיוגרפיה, הערכת המודינמיקה RV, והיסטולוגיה של אזור האוטם ב 4 שבועות לאחר RVI. בנוסף, בוצע יציקת כלי דם כלילית כדי לבחון את סידור העורקים הכליליים ב- RV. מודל עכבר זה של RVI יקל על המחקר על מנגנונים של אי ספיקת לב נכונה ויחפש מטרות טיפוליות חדשות של שיפוץ קרוואנים.
החדר הימני (RV), שנחשב במשך זמן רב לצינור פשוט המחובר לעורק הריאתי, הוזנח שלא כדין במשך שנים רבות1. עם זאת, לאחרונה חלה התעניינות גוברת בתפקוד הקרוואנים מכיוון שהיא ממלאת תפקיד חיוני בהפרעות המודינמיות 2,3 ועשויה לשמש כמנבאת סיכון עצמאית למחלות לב וכלי דם 4,5,6,7. מחלות RV כוללות אוטם RV (RVI), יתר לחץ דם בעורקים ריאתיים ומחלה וולוולרית8. בניגוד לעניין העצום ביתר לחץ דם בעורקים ריאתיים, RVI נותר מוזנח 7,9.
RVI, המלווה בדרך כלל באוטם שריר הלב נחות-אחורי10,11, נגרם על ידי חסימת עורק כלילי ימני (RCA). על פי מחקרים קליניים, RVI חמור ככל הנראה גורם להפרעות המודינמיות והפרעות קצב, כגון לחץ דם, ברדיקרדיה וגוש אטריו-חדרי, הקשורים לתחלואה גבוהה יותר בבית החולים ולתמותהשל 12,13,14. תפקוד RV יכול להתאושש באופן ספונטני במידה מסוימת גם בהיעדר רפרפוזיה15,16. קיימים מספר הבדלים מורפולוגיים ותפקודיים בין החדר השמאלי (LV) לבין RV17. RV הוא האמין להיות עמיד יותר איסכמיה מאשר LV8, בין היתר בשל היווצרות סירקולציה בטחונית נרחבת יותר לאחר RVI. הבהרת ההבדלים בין אוטם LV (LVI) ל-RVI וזיהוי המנגנונים הבסיסיים יספקו מטרות טיפוליות חדשות להתחדשות לב ואי ספיקת לב איסכמית. עם זאת, בשל הקושי הקשור ליצירת מודל עכבר RVI, המחקר הבסיסי על RVI מוגבל בעיקר.
מודל חייתי גדול של RVI נוצר על ידי קשירת RCA בחזיר18, אשר קל יותר לתפעול בגלל RCA גלוי. בהשוואה למודל החיות הגדול, למודל העכבר יש את היתרונות הבאים: נגישות רבה יותר במניפולציה גנטית, עלות כלכלית נמוכה יותר ותקופת ניסוי קצרה יותר19,20. למרות שמודל RVI של עכבר המתמקד בהשפעת RVI על פונקציית LV דווח בעבר, השלבים המפורטים של ההליך, הקשיים ונקודות המפתח של הפעולה, ומאפייני המודל כגון שינויים המודינמיים לא הוכנסו במלואם 9,21.
מאמר זה מספק הליכים כירורגיים מפורטים ליצירת מודל עכבר של RVI. יתר על כן, מודל זה התאפיין במדידה אקוקרדיוגרפית, הערכה המודינמית פולשנית וניתוח היסטולוגי. יתר על כן, בוצע יציקת כלי דם כלילית כדי לבחון את סידור העורקים הכליליים ב-RV. הטכניקה שהוצגה במאמר זה תסייע למתחילים לתפוס במהירות את הדור של מודל RVI העכבר עם תמותת פעולה מקובלת וגישות הערכה אמינות. מודל העכבר של RVI יעזור לחקור את המנגנונים של אי ספיקת לב נכונה ולחפש מטרות טיפוליות חדשות של שיפוץ קרוואנים.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
כל ההליכים בוצעו על פי המדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה שפורסם על ידי המכונים הלאומיים לבריאות בארה"ב (פרסום NIH מס '85-23, תוקן בשנת 1996) ואושרו על ידי ועדת האתיקה של בעלי חיים של בית החולים ננפאנג, האוניברסיטה הרפואית הדרומית (גואנגג'ואו, סין). עכברי C57BL/6J זכרים בריאים (בני 8-10 שבועות; משקל גוף, 25-30 גרם) התקבלו ממרכז החיות של האוניברסיטה הדרומית לרפואה. ניתן גם להשתמש בעכברות נקבות, אך ערבוב שני המינים אינו מומלץ בשל ההשפעות הפוטנציאליות של הבדלי המין. לאחר הגעתם, העכברים שוכנו תחת מחזור כהה/אור של 12 שעות/12 שעות (3-4 עכברים לכל כלוב), עם מזון ומים של ad libitum.
1. הכנה לניתוח
2. קשירת קבע של העורק הכלילי הימני
3. הערכה אקוקרדיוגרפית של תפקוד ה-RV לאחר הניתוח
הערה: עבור אקוקרדיוגרפיה, השתמש בבדיקת MS400D עם תדר מרכזי של 30 MHz, המחוברת למערכת הדמיית אולטרסאונד ברזולוציה גבוהה (ראה טבלת חומרים). בדיקת האקוקרדיוגרפיה מבוצעת 4 שבועות לאחר הניתוח.
4. מדידות פולשניות של המודינמיקה של RV
הערה: המודינמיקה של RV מוערכת באמצעות צנתור לב ימין 4 שבועות לאחר RVI. צנתר 1.0 F יחד עם מערכת ניטור מוחל.
5. יציקת כלי דם כלילית באמצעות חומר יציקה וסקולרי
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
במחקר זה, עכברים הוקצו באופן אקראי לקבוצת RVI (n = 11) או פעולת ה-sham (n = 11). הגבס הכלילי בשני לבבות עכברים רגילים מוצג באיור 1A. בתגובה לקשירת RCA, גובה מקטע ST נצפה בעופרת III של האק"ג (איור 1B). יתר על כן, צביעה של 2,3,5,5 טריפניל טטרזוליום כלוריד (TTC) הראתה שאזור האוטם מהווה 45% מהקיר נטול הקרוואנים ב-24 שעות לאחר הניתוח (איור 1C,D). הנתונים לעיל הצביעו על הדור המוצלח של מודל העכבר RVI.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
סיקארד ועמיתיו מצרפת דיווחו לראשונה על מודל עכבר של RVI בשנת 2019, שתיאר את התהליך הכירורגי והתמקד באינטראקציה בין LV ל- RV לאחר RVI9. עם זאת, עד כה, אף מחקר לא דיווח על שימוש במודל זה למחקרים נוספים. הליך מפורט יותר יעזור לחוקרים להשתמש במודל העכבר של RVI לחקירה. בניגוד לדו"ח של Sicard et al.9, סיפקנו מידע שלב אחר שלב ליצירת מודלים ואסטרטגיה לבקרת איכות והערכנו עוד יותר את ההתפלגות האנטומית של RCA, המודינמיקה של RV והישרדותם של קרדיומיוציטים באזור האוטם. דו"ח שפורסם לאחרונ...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
למחברים אין מה לחשוף.
עבודה זו נתמכה על ידי מענקים מהקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (82073851 לשמש) ומהקרן הלאומית למדע הבתר-דוקטורט של סין (2021M690074 ללין).
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride | Sigma | T8877 | עבור צביעת TTC |
| חיים מיני מאוורר | Havard | סוג 845 | לאוורור מלאכותי |
| מערכת אולטרסאונד של בעלי חיים VEVO2100 | מדידת VEVO2100 קולית חזותית | למהירות זרימת דופלר ורובד AS | |
| Batson' s #17 ערכת קורוזיה אנטומית | Polyscience Inc | 7349 | ליציקת כלי דם |
| בופרנורפין | Isoreag | 1134630-70-8 | להפחתת כאב של עכברים לאחר ניתוח |
| עכברי C57BL/6J + D29A1A2:D27 | מרכז החיות של האוניברסיטה הרפואית הדרומית | - | לדור עכבר RVI |
| דגם מצלמה | Sangnond | לצילום | |
| אור קר תאורה | אולימפוס | ILD-2 | אור להפעלה |
| אלקטרוקרדיוגרף | מכשיר ADI | ADAS1000 | אלקטרוקרדיוגרמה |
| רקיט בנצ'יסר | RQ/B 33 סוג 2 | הסרת שיער עכבר | |
| כרית חום- מערכת כירורגית תרמוסטטית (ALC-HTP-S1) | שנחאי אלקוט ביוטק CO | ALC-HTP-S1 | חימום |
| המטוקסילין-אאוזין צבע | Leagene | DH0003 | המטוקסילין-אאוזין מכתים |
| הפרין מלח נתרן | מקלין | H837056 | להפריזציה |
| איזופלורן | RWD מדעי החיים | R510-22 | מעבדת הרדמה ממשאפת |
| עשתה מרית | עבודה כגרון | ||
| מעבדה עשתה צינורית | לאינטובציה | ||
| Matrx VIP 3000 וופורייזר איזופורן | Midmark Corporation | VIP 3000 | הרדמה |
| רפואית תפר ניילון רפואי (5-0) | Ningbo Medical Needle Co. | 5-0 | לסגירת חזה |
| פינצטה מרפק מיקרוכירורגית | RWD מדעי החיים | F11021-11 | לניתוח |
| מספריים מיקרוכירורגיים | NAPOX | MB-54-1 | לכריתת עורקים |
| צנתר מילר | AD מכשירים, שנחאי | 1.0F | מדידת שיפוע לחץ |
| MS400D בדיקה אולטרסאונד | סוניק | חזותי MS400D | לזרימת דופלר מהירות ורובד AS |
| מלקחיים מחט | Visual Sonic | F31006-12 | לניתוח |
| ניטרוגליצרין | BEIJING YIMIN MEDICINE Co | להרחבת העורקים הכליליים | |
| מספריים | RWD מדעי החיים | S11022-14 | לניתוח |
| מלח נתרן פנטוברביטל | Merck | 25MG | הרדמה |
| PowerLab רב כיווני מערכת הקלטה פיזיולוגית | AD Instruments, שנחאי | 4/35 | הקלטת לחץ |
| איזון אלקטרוני מדויק | Denver Instrument | TB-114 | משקל שקילה |
| תפר משי (8-0) | Ningbo Medical Needle Co. | 6-0 | קשירת עורקים כליליים |
| ציוד מיקרו-כירורגי לבעלי חיים קטנים | Napox | MA-65 | מכשירים כירורגיים |
| מלקחיים לרקמות | Visual Sonic | F-12007-10 | לניתוח |
| מספריים לרקמות | Visual Sonic | S13052-12 | חזה פתוח למדידה המודינמית |
| ג'ל שידור | גואנג גונג פאי | 250 מ"ל | הכנה ל מדידת אקו לב |
| מהדקי כלי דם | Visual Sonic | R31005-06 | לחסימת דם מאבי העורקים |
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה
בקש הרשאה