הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

מפות מיקוריזאליות ככלי לחקור דפוסי התיישבות ואסטרטגיות פטרייתיות בשורשים של Festuca rubra ו - Zea mays

2.7K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/63599

⸱

26 באוגוסט 2022

 ,  ,  , 
1Department of Microbiology, Faculty of Agriculture, University of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine Cluj-Napoca

במאמר זה

סיכום

הפרוטוקול כאן מתאר את השיטות להערכת דפוסי ההתיישבות המיקוריזאלית הארבוסקולרית והאסטרטגיה בשורשים לשני מינים: Zea mays ו-Festuca rubra. השימוש בשיטת MycoPatt מאפשר חישוב פרמטרים, המרה של מבנים מיקוריזאליים לנתונים דיגיטליים ומיפוי מיקומם האמיתי בשורשים.

תקציר

פטריות מיקוריזאליות ארבוסקולריות הן סימביונטים בשורשי הצמחים. תפקידם הוא לשמר את התפתחות המארחים ולשמור על שיווי המשקל התזונתי במערכות האקולוגיות. תהליך ההתיישבות תלוי במספר גורמים כמו אקולוגיה של הקרקע, המגוון הגנטי של הפטריות והפונדקאי, ופרקטיקות אגרונומיות. פעולתם המסונכרנת מובילה להתפתחות רשת היפאלית מורכבת ומובילה להתפתחות משנית של שלפוחיות וארבוסקולות בתאי השורש. מטרת מחקר זה הייתה לנתח את היעילות של שיטת תבניות המיקוריזה (MycoPatt) למיקום מבנים פטרייתיים בשורשים של Festuca rubra ו - Zea mays. מטרה נוספת הייתה לחקור את אסטרטגיית ההתיישבות הפטרייתית כפי שהיא מתגלה במפות מיקוריזאליות של כל מין. הרכישה וההרכבה של תמונות מיקרוסקופיות מרובות מאפשרות הערכת התיישבות מיקוריזאלית הן בצמחי תירס והן בצמחי צואה אדומה כדי לספק מידע על המיקום המציאותי של המבנים המפותחים. דפוסי המיקוריזה שנצפו מדגישים את היעילות המשתנה של כל צמח במונחים של פיתוח קשרים עם פטריות סימביוטיות בקרקע, הנגרמות על ידי טיפולים יישומיים ושלב הצמיחה. מפות מפורטות של מיקוריזאל המתקבלות בשיטת MycoPatt שימושיות לגילוי מוקדם של יעילות הצמח ברכישה סימביוטית מהקרקע.

מבוא

פטריות מיקוריזה ארבוסקולריות (AM) הן קטגוריה של אנדופיטים הנישאים בקרקע ומהווים כל הזמן תחום עניין עבור חוקרים. נוכחותם בשורשים של רוב הצמחים ומעורבותם במחזורי חומרי מזון הופכת אותם למרכיבים חיוניים ביציבות של כל מערכת אקולוגית שבה נמצאים צמחים עשבוניים 1,2. באמצעות התפטיר החוץ-רדיקולרי שלהם, AM משמש כהרחבה פטרייתית לשורשי צמחים, במיוחד באזורים שקשה להגיע אליהם3. הפעילות העיקרית היא בשורשי צמחים מארחים, שם AM מפתחת רשתות גדולות של מקף ומבנים תוך-תאיים ספציפיים הנקראים ארבוסקולים. חוסר הספציפיות של המארח מאפשר לסימביונט ליישב מספר מינים בו זמנית. יכולת זו מספקת ל-AM את התפקיד של הקצאת משאבים וויסות חומרים מזינים במערכת האקולוגית; הפטרייה גם מספקת תמיכה בהישרדות הצמחים ומסייעת בביצועי הצמח 4,5,6,7. התגובה של מיני AM לשורשים מארחים נראית בהרחבה ובמיקום של התפטיר התוך-רדיקולרי והנוכחות והצורה של הארבוסקולים התפתחו תוך תאיים. הארבוסקולים התוך-תאיים משמשים כנקודת החלפה בין שני הסימביונטים ומייצגים אזורים המאופיינים בתהליכי העברה מהירים. המבנים שה-AM מייצרים הם תלויי מינים, ובנוסף לארבוסקולים, בשורשים, הם מפתחים גם שלפוחיות, נבגים ותאי עזר.

ישנם אתגרים רבים בהערכת סימביונטים של AM בשורשי צמחים 8,9. הראשון הוא ההתפתחות המתמדת שלהם במהלך כל תקופת הצמחייה של המארחים, מה שמוביל לשינויים מרובים במבנה הארבוסקולרי ההיפלי. השלבים השונים של הצמיחה הארבוסקולרית, עד לקריסתם, נמצאים בבירור בשורשים, אך מבני AM הסנסנטיים מתעכלים לפעמים, מה שהופך אותם לנראים רק באופן חלקי10. האתגר השני מיוצג על ידי שיטת הצביעה והפרוטוקול, המגוון הגדול של מערכות השורשים, ממד התאים שלהן וההבדלים בעובי, המקשים על הצעת שיטה אחידה. האתגר האחרון מיוצג על ידי הערכה וניקוד של קולוניזציה AM. ישנן שיטות רבות המבקיעות AM בדרגות שונות של אובייקטיביות, ורובן עדיין מוגבלות לטכניקות מיקרוסקופיה. הפשוטים מבוססים על נוכחות/היעדר מבנים בקליפת השורש, ואילו המורכבים יותר מבוססים על ניקוד חזותי ושימוש במחלקות קולוניזציה, תוך אינטגרציה של התדירות והעוצמה של תופעת הקולוניזציה. הרבה נתונים הופקו בעשורים האחרונים על מצב המיקוריזה של מינים מרובים, אך רוב השיטות מוגבלות לערך הנצפה של קולוניזציה מבלי להצביע על המיקום האמיתי של כל מבנה בקליפת השורש. כתגובה לצורך בתוצאות מדויקות יותר על התיישבות AM, פותחה שיטה המבוססת על ניתוח מיקרוסקופי של תבניות מיקוריזאליות (MycoPatt) בשורשים כדי להרכיב, בצורה דיגיטלית, את מפות המיקוריזאל המפורטות11. כמו כן, השיטה מאפשרת חישוב אובייקטיבי של פרמטרי קולוניזציה וקביעת המיקום בפועל של כל מבנה בשורש.

המיקום של מבנים פטרייתיים AM יכול להיות חשוב לענות על שתי השאלות הבאות. הראשון קשור לניתוח הקולוניזציה ברגע מסוים אחד ממחזור הצמחייה של הצמח. בהקשר זה, כדאי מאוד להתבונן בשפע הארבוסקולרי/שלפוחית, לדווח כיצד הם ממוקמים בשורש, ולספק תמונת קולוניזציה ופרמטרים ברורים מאוד. השני קשור לזיהוי אסטרטגיה פטרייתית והאוריינטציה שלה ואפילו לתחזית התפתחותה העתידית. יישום אחד של MycoPatt יכול להיות עבור צמחים מנותחים מדי יום, כל 2-3 ימים, מדי שבוע, או במהלך שלבי צמיחה שונים. בהקשר זה, מיקום הבועיות/ארבוסקולות חשוב כדי להבין טוב יותר את המנגנון הביולוגי של התיישבות AM. פרמטרים ותצפיות אלה שימושיים מאוד כדי להשלים את הפרמטרים המתמטיים.

מטרת מאמר זה היא להדגים את יכולתה של מערכת MycoPatt לחקור את הפוטנציאל והאסטרטגיה של התיישבות פטריות AM בשורשי Zea mays (תירס) בשלבי התפתחות שונים ובשורשי Festuca rubra (צואה אדומה) בתנאי הפריה ארוכי טווח שונים. כדי להגשים את המטרה נותחו שני מאגרי מידע גדולים משני ניסויים. ניסוי התירס נערך בקוג'וצ'נה (46°44′56" lat. N ו-23°50′0" אורך). E), בחווה הדידקטית הניסויית של האוניברסיטה למדעי החקלאות והרפואה הווטרינרית קלוז' על פאוזיום עם אדמה מרקם שמנמן12. ניסוי הצואה האדומה הוא חלק מאתר ניסוי גדול יותר שהוקם בשנת 2001 בגהשארי, הרי אפוסני (46°49'064" lat. N ו-22°81'418''' אורך). E), על אדמת פרלובוסול (טרה רוסה) סוג13,14. התירס נאסף בחמישה פנופאזות גדילה שונות12: B1 = 2-4 עלים (כנקודת בקרה לתחילת ההתיישבות המיקוריזאלית); B2 = 6 עלים; B3 = 8-10 עלים; B4 = היווצרות cob; B5 = בגרות פיזיולוגית. החל משלב 2-4 העלים (A0), הוחל טיפול אורגני, שהביא לגורם שני סיום (A1 = בקרה ו- A2 = מטופל). שורשים של צואה אדומה נאספו בפריחה מניסוי עם חמש הפריות ארוכות טווח13,14: V1 = בקרה, לא מופרית; V2 = 10 t·ha-1 זבל; V3 = 10 t·ha-1 זבל + N 50 kg·ha-1, P 2 O5 25 kg·ha-1, K2O 25 kg·ha-1; V4 = N 100 kg·ha-1, P 2 O5 50 kg·ha-1, K2O 50 kg·ha-1; V5 = 10 t·ha-1 זבל + N 100 kg·ha-1, P 2 O5 50 kg·ha-1, K2O 50 kg·ha-1. בכל שלב נאספו חמישה צמחים מכל גרסת הפריה. פרוטוקולי הצביעה וביצועיהם מבחינת זמן עיבוד הדגימה ואיכות הכתמים נותחו. הקשר בין התפתחות AM hyphae לבין נוכחות המבנים שלו בשורשים נותח בנפרד עבור כל מין והמשיך בזיהוי השורשים המתירניים ביותר להתיישבות. דפוסי הקולוניזציה הספציפיים של כל מערכת שורשים נותחו על סמך מפות קולוניזציה והערך של פרמטרי AM.

תירס הוא צמח שנתי, אשר מרמז על צמיחה מתמשכת של השורשים, וזה היה הסיבה העיקרית ליישם את MycoPatt בשלבי הגידול. צואה אדומה היא צמח רב שנתי ממרעה שטופלה במשך זמן רב בדשנים שונים. לשורשיו יש התפתחות קצרה יותר של שנה, והאנתזה נחשבת לנקודת הצמחייה כאשר הצמח משנה את חילוף החומרים שלו מווגטטיבי לגנרטיבי. כדי לתפוס צמחים אלה במהלך תקופות פעילות אינטנסיביות אלה, נבחרו נקודות הזמן הנ"ל. דיגום בתקופת הצמחייה קשה למין זה כאשר הוא גדל בערבות טבעיות.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

1. בחירת חומר ביולוגי, דגימת שורשים ואחסון

  1. אספו את כל שורש הצמחים עם חפירה (איור 1A) בנפרד עבור כל וריאנט ושכפלו. מוציאים בעדינות, ביד, את אגרגטי הקרקע הגדולים מהשורשים. שטפו את כל מערכת השורשים ומדדו אותה בקנה מידה עם תאים בגודל 1 ס"מ על 1 ס"מ (איור 1B). חותכים את השורשים בנפרד עבור כל צמח, ומניחים אותם לתוך שקית ניילון.
  2. אספו את כל השורשים הנקיים מכל צמח בשקית ניילון, ואספו את כל הדגימות מגרסה אחת בשקית אחת גדולה יותר. כתוב על כל שקית את שם הבמה / הגרסה ואת תאריך הדגימה. אחסנו את השורשים במקרר או במקפיא בטמפרטורה שבין −4°C ל-−20°C עד לעיבוד.

2. עיבוד שורשים, ניקוי והכתמה למיקרוסקופיה

הערה: השתמש בכפפות, מסכה ומכסה מנוע מיקרוביולוגי/כימי לשלב זה של הפרוטוקול.

  1. ודאו שתהליך הפשרת השורשים נעשה באיטיות בטמפרטורת החדר. עבור כל השלבים של עיבוד, להשתמש צנצנות קטנות (30-50 מ"ל) כדי להפחית את כמות החומרים הדרושים.
  2. בצע את ארבעת השלבים הבאים של הליך הניקוי וההכתמה האיטי15. בצע את כל השלבים בטמפרטורת החדר. שיטה זו מאפשרת עיבוד של מספר רב של דגימות בו זמנית ללא שימוש באמבט מים לרתיחה.
    1. ניקוי שורשים: מניחים את כל השורשים מצמח אחד בצנצנת. מכינים תמיסת NaOH 10% עם מי ברז ויוצקים אותה לכל צנצנת עד שהיא מכסה לחלוטין את השורשים. לנער את הצנצנות במרץ במשך 1 דקה או 2 דקות כדי לייצר פיזור הומוגני של תמיסת ניקוי בשורשים. חזור על הליך זה לאחר 24 שעות ולהשאיר את השורשים בתמיסת הניקוי לפחות 48 שעות.
      הערה: לשורשים נקיים יש היבט צהוב חיוור (עד לבן), והמרקם רך (ניתן לרסק אותם בקלות על ידי לחיצה עם פינצטה).
    2. שטיפת שורשים: מעבירים את התוכן של צנצנת אחת בכל פעם דרך מסננת. מחזר את פתרון הסליקה. יש לשטוף את השורשים מספר פעמים במי ברז עד להסרתם המלאה של תמיסת הסליקה.
      הערה: אם תמיסת הניקוי לא תוסר לחלוטין, הדבר ישפיע על איכות הליך ההכתמה.
    3. מכתים שורשים: מניחים את השורשים השטופים בצנצנת נקייה. הכינו תמיסת חומץ דיו 5%:5% עם מי ברז (5 מ"ל דיו כחול + 5 מ"ל של 9% חומצה אצטית + 90 מ"ל של מי ברז). יוצקים את התמיסה לכל צנצנת עד שהיא מכסה לחלוטין את השורשים. נערו את הצנצנות במרץ במשך דקה או 2 דקות כדי לייצר פיזור הומוגני של תמיסת צביעה בשורשים. חזור על הליך זה לאחר 24 שעות ולהשאיר את השורשים בפתרון זה במשך 48 שעות.
      הערה: לשורשים מוכתמים יש צבע כחול עז.
    4. ניקוי חלקי של השורשים: שטפו את השורשים המוכתמים במי ברז למשך 1-2 דקות. נערו את הצנצנות במרץ כדי להסיר את תמיסת הכתמים הנוספת. חזור על ההליך אם הכתם עז מדי ואינו מאפשר הערכה מיקרוסקופית ברורה.
      הערה: ניתן לשמור שורשים מוכתמים במי ברז עד שבוע בטמפרטורת החדר מבלי לשנות את איכות הכתמים (איור 2). לתקופות ארוכות יותר, ניתן לשמור על שורשים עד 2-3 חודשים בתמיסת חומץ תפוחים מסחרית של 5% (5% חומצה אצטית).

3. עיבוד שורש למיקרוסקופיה

  1. פילוח שורשים: הניחו את השורשים המוכתמים מכל דגימה על קרש חיתוך מוקטן (איור 3A). חותכים את השורשים למקטעים של 1 ס"מ (איור 3B). בחר 15 מקטעים עבור כל גרסה.
  2. שיטת ריסוק עדינה להכנת הקטע: מורחים את השורשים על שקופית. השתמשו בשקית למינציה לכיסוי השורשים ומעכו אותם בעדינות החל מהקצה (איור 3C,D). השתמש בכלי פלסטיק רך, כגון פינצטה, ידית אזמל, עט או עיפרון עם מחק, כדי להציג באיטיות את השורשים בשקופית. הסירו בזהירות את שקית הלמינציה וכסו את הדגימה בכיסוי (איור 3E).
    הערה: לשורשים יש צורה צינורית, ולכן יש צורך להפריד ביניהם במישור דו-ממדי. פעולה זו מניחה את הפרדת השורשים בנקודה האמצעית, מה שמוביל לתצוגה של שני חלקי הקוטר הפנימי. השימוש בשקיות למינציה בהליך הריסוק העדין מאפשר להציג את השורשים, בעלי צורת גליל, בשני חלקים - אחד משמאל ואחד מימין - לכיוון נקודת האמצע שלהם. בדרך זו, השורש כולו מנותח לעומק, ודרגת הקולוניזציה היא הפרמטר המציג את הקולוניזציה הנפחית (המתוארת בעבודה המקורית על MycoPatt11). בעיקרון, אנחנו חותכים גליל לשניים, ואחרי זה, אנחנו בונים אותו מחדש מתמטית.
  3. הוסיפו מים לפינה של המגלשה עם פיפטה ותנו למים להתפשט באיטיות על המגלשה (איור 3F). מוציאים את המים הנוספים בעזרת מגבת נייר.

4. ניתוח מיקרוסקופי של דגימות השורש

  1. השתמש במיקרוסקופ המצויד במצלמה ברזולוציה טובה.
  2. נתח את השקופיות החל מקיצוניות. צלם כל שדה מיקרוסקופי. שנה את השם של כל תמונה שצולמה עם קוד שיאפשר את ההרכבה האמיתית שלאחר ההרכבה של חלקי השורש. עבור שורשים עבים, השתמש בהגדלה של 10x או 40x, ועבור שורשים דקים, השתמש בהגדלה של 40x. השתמש באותה מטרה והגדלה עבור כל קבוצת השורשים ממין מסוים.

5. אסמבלאז' תמונה לאחר מיקרוסקופיה

  1. השתמש בתוכנת מצגות כדי לעצב לוח שרטוט להרכבת תמונות. הגדר את הרוחב 2-3 ס"מ רחב יותר מרוחב התמונה. הוסיפו את כל התמונות שצולמו מקטע אחד לפי סדר לכידתן ושחזרו את כל אורך מקטע השורש (איור 4A).
    1. בקצרה, אסוף סך של 15 תמונות עבור כל קטע של 1 ס"מ וארגן אותן אנכית, החל מ- 1 עד 15, בתוכנת המצגת כדי לשחזר את המקטע.
  2. יישרו את התמונות במרכז. השתמש ביישור האנכי כדי לוודא שכל תמונה עוקבת אחר התמונה הקודמת. בכל התמונות, מקם רשת של 10 תאים x 150 תאים כדי לכסות את כל מקטע השורש.
    1. בנוסף, בכל תמונה בנפרד, מקם רשת בגודל 10 x 10, ובכל תא ברשת זו, הוסף מספר מאחד עד שישה אם מבנה AM גלוי או השאר ריק אם אין מבנה AM. בדרך זו, הדיוק של התהליך הוא מקסימלי ללא שגיאות במיקום של מבני AM להיות שנצפו.
  3. הוסף טבלה עבור רשת של 10 תאים ברוחב ו- 150 תאים באורך (15 ריבועים של 10 תאים x 10 תאים). שנה את מידות רוחב הטבלה לרוחב התמונות. שנה את אורך הטבלה כך שתכלול את כל התמונות (איור 4B).

6. ניקוד של התיישבות מיקוריזאלית

  1. השתמש במספר הייחודי כדי לדרג כל סוג של מבנה כמתואר בשיטת תבניות מיקוריזאליות11: 1 עבור hyphae; 2 עבור ארבוסקולים; 3 עבור שלפוחית; 4 לנבגים; 5 עבור תאי עזר; ו-6 עבור נקודות כניסה (איור 4C). ניקוד כל אחד מהם צפה במבנה מיקוריזאלי מכל תא ברשתות שהוחלו קודם לכן (איור 4D).

7. ניתוח נתונים גולמיים וחילוץ תוצאות

  1. הוסף את כל הציונים שהתקבלו בגיליון האלקטרוניMycoPatt 11. השתמש בפונקציית העתקה/הדבקה כדי להעביר את כל התוצאות מהמצגת לגיליון הראשון שנקרא rawdata (איור 5).
  2. ניתוח ראשוני של תוצאות: השתמש בפרמטרים בעלי שם הגיליון השלישי בכלי הגיליון האלקטרוני MycoPatt כדי להציג את התוצאות באופן חזותי כאחוזים (%) בנפרד בשלוש צורות (איור 6A-C). השתמש בעמודות A עד K כדי לנתח את התמונה האופקית של הקולוניזציה; עמודות M עד W כדי לנתח את התמונה האנכית של הקולוניזציה; ועמודות Y עד AI כדי לנתח את הקולוניזציה הרוחבית (הממוצעת) עבור כל אחד מ-15 ריבועי 10 x 10 (קווים 2-17) והקולוניזציה הממוצעת הסופית (קווים 19-20).
    הערה: הקולוניזציה הממוצעת הרוחבית משמשת לחישוב פרמטרי הקולוניזציה האמיתיים, הקשורים לניתוח אופקי ואנכי כאחד. בדרך זו, לא ניתן לבצע שגיאות בהשוואה אם רק ניתוח אופקי או אנכי משמש (המתואר בפירוט בעבודה המקורית11). כמו כן, קבוצה זו של פרמטרים מחושב עבור כל פני השטח של השדה המיקרוסקופי.
    1. השתמש בהגדרות ובנוסחאות, הספציפיות לכל פרמטר, כדי לנתח את התוצאות11. השתמש בפרמטרים הבאים של התיישבות: תדירות הקולוניזציה (%), עוצמת הקולוניזציה (%), ארבוסקולים (%) ובועיות (%), נבגים (%) ותאי עזר (%), נקודות כניסה (%), אחוז האזורים שאינם מיקוריזאליים (%), מידת הקולוניזציה הכוללת (%), ודיווח על אזורים מיקוריזאליים/לא מיקוריזאליים.
      הערה: אם חסרים ארבוסקולים, שלפוחיות, נבגים, תאי עזר ונקודות כניסה בדגימות שנותחו, הגיליון האלקטרוני של MycoPatt ייתן להם ציון אפס (0).
  3. הפקה והפקה של מפות מיקוריזאליות: דמיינו את התמונה המתקבלת מהמרה של מבנים מיקוריזאליים מקודדים לצבעים בגיליון השני של הגרפים בעלי השם MycoPatt (איור 7A). ייצא את תמונת התוצאה בגיליון הגרפים כתמונה (איור 7B). השתמש בקוד הצבע במקרא לניתוח תבניות מיקוריזאליות.
  4. ניתוח מפת מיקוריזאל: זהה את המבנים החשובים ביותר ואת ההרכבה שלהם במפות מיקוריזאליות. תאר את דפוס ההתיישבות המיקורייזאלי שנצפה בשורשים המנותחים. תאר את אסטרטגיית ההתיישבות המיקוריזאלית המבוססת על התפתחות מבנית נצפית בשורש, תבנית ההסתעפות והתפתחות ארבוסקולה/שלפוחית.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

השימוש הנכון בשיטת הריסוק העדינה של השורשים לאחר הליכי הצביעה מספק פרטים טובים על מבנים מיקוריזאליים, הן עבור Zea mays (איור 8A-C) והן עבור Festuca rubra (איור 9A-E), ניגודיות טובה בין מבנים מיקוריזאליים לתאי שורש, ואישור של המצבה בשל הצבע הכחול. אם הליכי הניקוי וההכתמה לא מצליחים, קשה לרסק דגימות שורשים והן לא מראות בבירור מבנים מיקוריזאליים (איור 10A-E

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

מחקרים על התיישבות מיקוריזאלית חיוניים לפיתוח אסטרטגיה חדשה בתחום האגרונומי. הפוטנציאל של צמחים מעובדים מרובים ליצור קשר סימביוטי עם מיקוריזות ארבוסקולריות הפך אותם למרכיב חשוב בפיתוח בר-קיימא של המערכת החקלאית ובשמירה על בריאותה 16,17,18,19,20. לפיכך, יש צורך בהבנה טובה יותר של מנגנון הקולוניזציה ואסטרטגיות פטרייתיות, המספקות נתונים חיוניים על האופן שבו צמח י...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים על היעדר ניגוד עניינים.

תודות

מאמר זה משתמש בנתונים הנובעים משני מחקרי דוקטורט בתחום התמטי של "תבניות מיקוריזאליות של תירס המונעות על ידי תשומות אגרונומיות", שנערכו על ידי ויקטוריה פופ-מולדובה, ו"מעמד מיקוריזאלי ופיתוח התיישבות במינים דומיננטיים בערבה הררית", שנערכו על ידי לריסה קורקוז, בתיאום של פרופ' רוקסנה וידיקן.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
חומץ תפוחים 5%FABRICA DE CONSERVE RAURENI S.R.L.O?ET DE MERE
דיו כחולPelikan4001
https://www.pelikan.com/pulse/Pulsar/ro_RO.Store.displayStore.224848./cerneal%C4%83-4001-de-la-pelikan כיסוי מלקחייםMenzel-GlaserD 263 M
https://si.vwr.com/store/product/20545757/cover-glasses-menzel-glaser, PMPVitalab9.171 411http://shop.llg.de/info881_Forceps_PMP_lang_UK.< > htm? UID=55005bf838d8000000000000000
& המגבר; OFS = 33
צנצנת זכוכית 47 מ"לכרטיסי אינדיגוBORCAN 47 מ"ל שקיות
למינציהאפרסקPP525-08כרטיס ביקור (60x90 מ"מ) /
https://supremoffice.ro/folie-laminare-60x90mm-125mic-carte-vizita-100-top-peach-pp525-08-510328 Microflow Class II ABS ארון Bioquellבריטניה בע"מMicroflow Class II ABS ארוןhttp://www.laboratoryanalysis.co.uk/graphics/products/034_11%20CLASS%202BSC%20(STD).pdf
שקופיות מיקרוסקופDeltalabD100001https://distrimed.ro/lame-microscop-matuite-la-un-capat-26x76-mm-deltalab/?utm_source=Google%20Shopping&utm_campaign=
google%20shopping%20distrimed& utm_medium=cpc&
utm_term=1647& gclid=CjwKCAjwu
YWSBhByEiwAKd_n_odzr8CaCXQ
hl9VQkAB3p-ODo2Ssuou9cnoRtz1Gb
xsjqPY7F05HmhoCj6oQAvD_BwE
Microsoft Office 365MicrosoftOffice 365Excel ו-Powerpoint; גיליון אלקטרוני ומצגת
NaOHOltchim01-2119457892-27-0065
http://www.sodacaustica.com.ro/pdf/fisa-tehnica-soda-caustica.pdf כפפות ניטרילSemperGuard816780637https://www.sigmaaldrich.com/RO/en/product/aldrich/816780637?gclid=CjwKCAjwuYWSBhByEiwAKd
_n_rmo4RRt8zBql7ul8ox
AAYhwhxuXHWZcw4hlR
x0Iro_4IyVt69aFHRoCmd
wQAvD_BwE
מצלמת אופטיקהOPTIKACP-8; מצלמת P8 Pro, 8.3 מגה פיקסל CMOS, USB 3.0
https://www.optikamicroscopes.com/optikamicroscopes/product/c-p-series/ מיקרוסקופ אופטיקהOPTIKAB383pLhttps://www.optikamicroscopes.com/optikamicroscopes/product/b-380-series/
מסכת מגן FFP3Hermes GiftHERMES000100EN 149-2001+A1:2009 /
https://www.emag.ro/set-10-masti-de-protectie-respiratorie-hermes-gift-ffp3-5-straturi-albe-hermes000100/pd/DTZ8CXMBM/#specification-section אזמלCutfix9409814https://shop.thgeyer-lab.com/erp/catalog/search/search.action;jsessionid=C258CA
663588CD1CBE65BF
100F85241B?model.query=9409809
חומץ יין לבן 9%FABRICA DE CONSERVE RAURENI S.R.L.O?ET DE VIN ALB https://www.raureni.ro/ro-ro/produs/otet-de-vin-alb
https://www.raureni.ro/ro-ro/produs/otet-de-mere https://indigo.com.ro/borcan-47-ml-hexagonal משושה

מקורות

  1. Trivedi, P., Leach, J. E., Tringe, S. G., Sa, T., Singh, B. K. Plant-microbiome interactions: From community assembly to plant health. Nature Reviews Microbiology. 18 (11), 607-621 (2020).
  2. Jeffries, P., Barea, J. M. 4 Arbuscular Mycorrhiza: A Key Component of Sustainable Plant-Soil Ecosystems. The Mycota. IX Fungal Associations. Hock, B. , SpringerVerlag. Berlin, Germany. 51-75 (2012).
  3. Parniske, M. Arbuscular mycorrhiza: the mother of plant root endosymbioses. Nature Reviews Microbiology. 6 (10), 763-775 (2008).
  4. Gianinazzi, S., et al. Agroecology: The key role of arbuscular mycorrhizas in ecosystem services. Mycorrhiza. 20 (8), 519-530 (2010).
  5. Lee, E. -H., Eo, J. -K., Ka, K. -H., Eom, A. -H. Diversity of arbuscular mycorrhizal fungi and their roles in ecosystems. Mycobiology. 41 (3), 121-125 (2013).
  6. Zhang, Y., Zeng, M., Xiong, B., Yang, X. Ecological significance of arbuscular mycorrhiza biotechnology in modern agricultural system. Ying Yong Sheng Tai Xue Bao = The Journal of Applied Ecology. 14 (4), 613-617 (2003).
  7. Shah, A. A., et al. Effect of endophytic Bacillus megaterium colonization on structure strengthening, microbial community, chemical composition and stabilization properties of Hybrid Pennisetum. Journal of the Science of Food and Agriculture. 100 (3), 1164-1173 (2020).
  8. Souza, T. Handbook of Arbuscular Mycorrhizal Fungi. , Springer. New York City, NY. (2015).
  9. Sun, X. -G., Tang, M. Comparison of four routinely used methods for assessing root colonization by arbuscular mycorrhizal fungi. Botany. 90 (11), 1073-1083 (2012).
  10. Smith, S., Read, D. Colonization of Roots and Anatomy of Arbuscular Mycorrhiza. Mycorrhizal Symbiosis. Smith, S. E., Read, D. J. , Academic Press. London, UK. 42-90 (2008).
  11. Stoian, V., et al. Sensitive approach and future perspectives in microscopic patterns of mycorrhizal roots. Scientific Reports. 9 (1), 10233(2019).
  12. Pop-Moldovan, V., et al. Divergence in corn mycorrhizal colonization patterns due to organic treatment. Plants. 10 (12), 2760(2021).
  13. Corcoz, L., et al. Mycorrhizal patterns in the roots of dominant Festuca rubra in a high-natural-value grassland. Plants. 11 (1), 112(2021).
  14. Corcoz, L., et al. Deciphering the colonization strategies in roots of long-term fertilized Festuca rubra. Agronomy. 12 (3), 650(2022).
  15. Stoian, V., Florian, V. Mycorrhiza - Benefits, influence, diagnostic method. Bulletin of University of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine Cluj-Napoca. Agriculture. 66 (1), 2009(2009).
  16. Prates Júnior, P., et al. Agroecological coffee management increases arbuscular mycorrhizal fungi diversity. PLoS One. 14 (1), 0209093(2019).
  17. Rillig, M. C., et al. Why farmers should manage the arbuscular mycorrhizal symbiosis. New Phytologist. 222 (3), 1171-1175 (2019).
  18. Rillig, M. C., et al. Towards an integrated mycorrhizal technology: Harnessing mycorrhiza for sustainable intensification in agriculture. Frontiers in Plant Science. 7, 1625(2016).
  19. Bhale, U. N., Bansode, S. A., Singh, S. Multifactorial Role of Arbuscular Mycorrhizae in Agroecosystem. Fungi and their Role in Sustainable Development: Current Perspectives. Gehlot, P., Singh, J. , Springer. New York City, NY. 205-220 (2018).
  20. Khaliq, A., et al. Integrated control of dry root rot of chickpea caused by Rhizoctonia bataticola under the natural field condition. Biotechnology Reports. 25, 00423(2020).
  21. Vaida, I., Păcurar, F., Rotar, I., Tomoș, L., Stoian, V. Changes in diversity due to long-term management in a high natural value grassland. Plants. 10 (4), 739(2021).
  22. Taxonomy of Arbuscular Fungi. , Available from: http://www.zor.zut.edu.pl/Glomeromycota/Taxonomy.html (2022).
  23. The International Collection of (Vesicular) Arbuscular Mycorrhizal Fungi. , Available from: https://invam.wvu.edu/collection (2022).
  24. The International Bank for the Glomeromycota. , Available from: https://www.i-beg.eu/ (2022).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

MycoPattFestuca RubraZea Mays
מפות מיקוריזאליות ככלי לחקור דפוסי התיישבות ואסטרטגיות פטרייתיות בשורשים של Festuca rubra ו - Zea mays
צור קשר
המלצה לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

2026 © זכויות יוצרים MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.