מאמר שיטה

חקירת ההשפעות המקלות של מתן Bacillus cereus על קוליטיס באמצעות אפנון מיקרוביוטה של המעיים

DOI:

10.3791/63707

⸱

27 ביולי 2022

 ,  ,  ,  ,  , 
1School of Life Sciences, Anhui University, 2Key Laboratory of Human Microenvironment and Precision Medicine of Anhui Higher Education Institutes, Anhui University, 3Anhui Key Laboratory of Modern Biomanufacturing, 4Institute of Physical Science and Information Technology, Anhui University

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לביסוס מודל עכברי קוליטיס המושרה על ידי פסאודו-חיידקים נטולי חיידקים דקסטרן סולפט נתרן כדי לחקור את תפקידה של מיקרוביוטת המעיים בוויסות ההשפעות החיוביות של Bacillus cereus על קוליטיס.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מאמינים כי לדיסביוזה של חיידקי המעיים יש תפקיד בהתקדמות קוליטיס. עם זאת, הסטנדרטים המדויקים למתן פרוביוטיקה להקלה על קוליטיס נותרו לא מוגדרים. רוב שיטות הניתוח מסתמכות על מגוון ושפע מוגבלים של מיקרואורגניזמים במעיים. לכן, מחקרים תצפיתיים אינם יכולים לבסס סיבתיות. במחקר זה, יישמנו עכברים נטולי חיידקים המושרים על ידי אנטיביוטיקה כדי לחקור את תפקידה של מיקרוביוטת המעיים בוויסות ההשפעות הפרוביוטיות של Bacillus cereus (B. cereus) על קוליטיס הנגרמת על ידי דקסטרן סולפט נתרן (DSS) בעכברים. תהליך זה מאפשר להעריך את ההשפעה הדו-כיוונית של תוסף B. cereus על הבריאות ומספק תוצאות יציבות וניתנות לשחזור. כאן מסופקים הפרוטוקולים המפורטים לגידול B. cereus , ניתוח גבאז', איסוף צואה וטיפול בפינוי אנטיביוטיקה בעכברי קוליטיס. שיטות האופטימיזציה ישימות גם להפרעות דלקתיות כרוניות אחרות. התוצאות הראו כי מתן B. cereus הפחית את הירידה במשקל הגוף, קיצור אורך המעי הגס, מדד פעילות המחלה והציונים ההיסטופתולוגיים. עם זאת, טיפול באנטיביוטיקה דיכא את ההשפעה החיובית של B. cereus על קוליטיס. תוצאות אלה מצביעות על כך שמיקרוביוטת המעיים נחוצה להקלה על ההשפעות של B. cereus על קוליטיס. לכן, חקירת ההשפעות המועילות של פרוביוטיקה במחקר זה היא גישה מבטיחה לפיתוח אסטרטגיות טיפול חדשות להקלה על הסימפטומים של הפרעות דלקתיות כרוניות.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מחלות מעי דלקתיות (IBDs) הן הפרעות דלקתיות כרוניות שכיחות במערכת העיכול, כולל מחלת קרוהן וקוליטיס כיבית (UC)1. הדרכים הטיפוליות הנוכחיות לקוליטיס דלקתית הן 5-אמינוסליצילטים, קורטיקוסטרואידים, אזתיופרין ואנטיביוטיקה2. יתר על כן, לתרופות אלו יש תופעות לוואי ניכרות3. לכן, עלינו לשים לב יותר להשפעת הפרוביוטיקה על הטיפול בקוליטיס.

גישות טיפוליות חלופיות כוללות מתן פרוביוטיקה, ששימש במודלים של בעלי חיים ובניסויים קליניים. מחקרים קודמים הצביעו על כך שמתן פרוביוטיקה שונה, כגון Bacillus cereus או Bifidobacterium infantis, יכול להקל על קוליטיס 4,5. במחקרים פרה-קליניים יש לחקור את היעילות והבטיחות של פרוביוטיקה במודלים של בעלי חיים.

מודלים של עכברי קוליטיס נתרן דקסטרן סולפט (DSS) יכולים לעזור לחקור את המנגנונים של קוליטיס ולהעריך את ההשפעות החיוביות של פרוביוטיקה. השראת ה-DSS גורמת לשחיקה של רירית המעי, תפקוד לקוי של מחסום המעי ועלייה בחדירות האפיתל של המעי6. רוב דגמי העכברים לפרוביוטיקה הדגישו בעיקר את ההשפעות הביולוגיות. עם זאת, המנגנון מאחורי מתן פרוביוטיקה זו מאתגר לחקירה, בהתחשב במגבלה באימות נוסף של הקשר הסיבתי בין פרוביוטיקה להקלה על קוליטיס. לפיכך, יש צורך לפתח שיטה סטנדרטית לחקר המנגנון של חיידקים פרוביוטיים.

באופן מסורתי, מחקרים אלה דורשים חיסון פרוביוטיקה מסוימת בעכברים נטולי חיידקים7. עם זאת, ישנן כמה מגבלות מעבדה בשימוש בעכברים נטולי חיידקים כקולטנים לפרוביוטיקה, כגון יכולת חיסונית נמוכה ומתקנים יקרים ללא חיידקים8. על מנת להימנע ממגבלות אלה, הוקם מודל קוליטיס חלופי המושרה על ידי DSS באמצעות עכברים נטולי חיידקים מדומים. מודל העכבר הפסאודו-נטול חיידקים הוקם על ידי יישום אנטיביוטיקה כפי שתואר קודם לכן 9,10.

במאמר זה, אנו מקימים עכברים נטולי חיידקים עם קוקטייל אנטיביוטי. אנו גם מתארים בפירוט את המתודולוגיה לביסוס והערכה של מודלים של קוליטיס בעכברים וחוקרים את ההשפעות של פרוביוטיקה על הקלה על תסמיני קוליטיס. הפרוטוקול שלהלן מספק גם את השיטות למתן פרוביוטיקה על ידי גבאג'.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל ההליכים בוצעו בהתאם להנחיות לטיפול ושימוש בחיות מעבדה של אוניברסיטת אנהוי, סין, וכל הנהלים אושרו על ידי ועדת האתיקה של בעלי חיים של אוניברסיטת אנהוי, סין (No. IACUC (AHU)-2020-014).

1. מתן אנטיביוטיקה

  1. הכינו קוקטייל של אנטיביוטיקה על ידי המסת אמפיצילין (1 גרם/ליטר), ניאומיצין סולפט (1 גרם/ליטר), מטרונידזול (0.5 גרם/ליטר) וונקומיצין (0.5 גרם/ליטר) ב-1 ליטר מי שתייה5.
  2. לאחר פירוק מוחלט, יש לאחסן את התמיסות בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס.
  3. הכניסו את תמיסות הקוקטייל האנטיביוטי לבקבוק מים. הנח את הבקבוק על גבי כלוב העכבר.
    הערה: הקפד להשתמש בבקבוקים חומים או לעטוף את הבקבוקים בנייר אלומיניום כדי להגן על תמיסות האנטיביוטיקה מפני אור.
  4. החלף את קוקטייל האנטיביוטיקה בתמיסות טריות פעמיים בשבוע.
  5. אפשר לעכברים לשתות את תמיסות הקוקטייל האנטיביוטיות בחופשיות למשך 4 שבועות.

2. הכנת מי שתייה DSS והשראת קוליטיס

  1. כדי ליצור תמיסת נתרן דקסטרן סולפט (DSS) של 2.5%, ממיסים 2.5 גרם DSS ב-100 מ"ל מים מזוקקים11.
  2. החלף את מי השתייה בתמיסת DSS של 2.5% בקבוצת העכברים מדגם קוליטיס. ודא שלעכברים בקבוצת הקוליטיס אין גישה למי שתייה אחרים. בינתיים, טפלו בעכברי הביקורת במים מזוקקים ללא DSS.
  3. עכברי בית זכרים C57BL/6J (משקל גוף ממוצע, 20 גרם ± 2 גרם; בני 7 שבועות) בתנאים נטולי פתוגנים עם גישה חופשית למזון ומים סטנדרטיים.
    הערה: מאכלסים בסך הכל חמישה עכברים בכל כלוב בתנאים נטולי פתוגנים.
  4. תכנון ניסיוני
    הערה: הניסויים בבעלי חיים תוכננו בשני שלבים. חמישה עכברים נכללו בכל קבוצה.
    1. שלב ראשון: כדי להעריך את ההשפעה החיובית של B. cereus על הקלה על קוליטיס, יש לחלק את העכברים באופן אקראי לשלוש הקבוצות הבאות: קבוצת ביקורת (ביקורת), מודל קוליטיס הנגרמת על ידי DSS (DSS), תוסף פרוביוטי של B. cereus לעכברים המושרים על ידי DSS (B. cereus).
    2. שלב שני: כדי לחקור את תפקידה של מיקרוביוטת המעיים בוויסות ההשפעות הפרוביוטיות של B. cereus על קוליטיס הנגרמת על ידי DSS, הקצו את העכברים באופן אקראי לשלוש הקבוצות הבאות: ABX (ביקורת), ABX (DSS) ו-ABX (B. cereus + DSS).
      1. טפל בעכברים בקבוצת ABX (ביקורת) במי מלח פיזיולוגיים.
      2. לאחר טיפול בתמיסות קוקטייל אנטיביוטיות במשך 4 שבועות, תנו לעכברים בקבוצת ABX (DSS) לקבל מים המכילים 2.5% DSS למשך שבוע אחד ותמיסת מלח פיזיולוגית רגילה למשך שבועיים.
      3. לאחר טיפול בתמיסות קוקטייל אנטיביוטיות ומי DSS, יש לטפל בעכברים מקבוצת ABX (B. cereus + DSS) מדי יום עם B. cereus (2 x 108 תאים) ב-200 מיקרוליטר של מי מלח פיזיולוגיים באמצעות צינורית תוך קיבה למשך שבועיים.
  5. לאחר מתן הקוקטייל האנטיביוטי, יש לטפל מיד בעכברי C57BL/6 הזכרים בתמיסת DSS 2.5% במי שתייה למשך 7 ימים.
  6. רשום את משקל הגוף של העכברים לפני התערבות ה-DSS כמשקל הבסיס.

3. כימות של B. cereus

  1. הכן שמונה צינורות מיקרו-צנטריפוגה של 1.5 מ"ל מלאים ב-900 מיקרוליטר של מי מלח רגילים סטריליים.
  2. פיפטה 100 מיקרוליטר של גידול לוגריתמי B. cereus ומתמוססת ב-900 מיקרוליטר של מי מלח סטריליים רגילים.
  3. יש לדלל באופן סדרתי את B. cereus באמצעות צינורות.
  4. צלחת 40 מיקרוליטר מכל דילול על צלחת אגר LB המתאימה המסומנת ביחס הדילול. חזור על הפעולה פי 3 עבור כל יחס דילול.
  5. תרבית את הצלחות בחממה בטמפרטורה קבועה של 37 מעלות צלזיוס למשך 16 שעות.
  6. בחר את הצלחות עם ~20-70 מושבות לספירה. חשב את ריכוז החיידקים הממוצע לפי מכפיל הדילול של הלוחות שנבחרו.

4. הכנת B. cereus לגבאז'

  1. לאחר הכימות של B. cereus, אספו 1 מ"ל של מדיום B. cereus המכיל 1 x 109 CFU וצנטריפוגה ב-8,000 x גרם למשך 10 דקות. לאחר מכן, שטפו את תאי החיידקים פי 2 במים סטריליים על ידי צנטריפוגה בטמפרטורה של 8,000 x גרם למשך 10 דקות והסירו את הסופרנטנט.
  2. יש לדלל את ה-B. cereus המרוכז בתמיסת מלח סטרילית רגילה לריכוז סופי של 2 x 108 CFU/200 μL4.
  3. פיפטה את הדילול למעלה ולמטה שוב ושוב כדי להשיג תרחיף B. cereus מפוזר.
  4. בצע את הכימות של ריכוז B. cereus בטכניקת ספירת הלוחות לפני השלמת שיטת הגבאג'.

5. יישום תוספי B. cereus על ידי gavage

  1. יש לתת את ההתערבויות (2 x 108 CFU פרוביוטיקה ב-200 מיקרוליטר של מי מלח רגילים) לעכברים דרך הפה בזמן קבוע.
  2. כדי לתת B. cereus, חבר מחט גבג' (גודל מחט הזנה: 20 גרם, 38 מ"מ) למזרק של 1 מ"ל. נגב את החלק החיצוני של מחט הגאווג' עם 70% אתנול בין עכברים ושמור על יישום מינון נכון.
  3. כדי לרסן את העכברים, הרימו אותם בזנבם, ותפסו בחוזקה את העור הרפוי של הגב כשקצה הזנב קבוע בין שתי האצבעות האחרונות של המטפל.
  4. שמור את העכברים במצב אנכי. לאחר מכן, הכנס את מחט הגאווג' בזהירות ובעדינות דרך הפה לוושט. אם לא נתקלת בהתנגדות בשלב זה, דחף בעדינות את המחט לתוך הקיבה.
    הערה: יש לאשר נשימה סדירה וללא הפרעה של העכברים לפני מתן התרופה.
  5. התקדם לאט את המחט והטיל את תמיסת B. cereus . משוך את המחט בעדינות לאחר השלמת הגוואג. שחרר את העכבר והחזר אותו לכלוב שלו.

6. קביעת מדד פעילות המחלה

הערה: מדד פעילות המחלה (DAI) חושב מדי יום על ידי הירידה במשקל הגוף של העכברים, דם סמוי בצואה וסמיכות הצואה.

  1. מדוד את משקל הגוף של העכברים מדי יום. הקצה ציון של 0-4 לכל עכבר על סמך אחוז הירידה במשקל הגוף (0: 0%, 1: 1%-5%, 2: 6%-10%, 3: 11%-18% ו-4: >18%).
  2. אסוף דגימות צואה טריות מכל עכבר. השתמש בצמר גפן כדי לעורר את התכווצות פי הטבעת כדי לקדם את עשיית הצרכים. לאחר מכן, אסוף את דגימות הצואה מיד לאחר עשיית הצרכים בצינור צנטריפוגה מעוקר.
  3. קבע את הדם הסמוי בצואה על ידי נייר בדיקת דם סמוי בצואה. יש לאסוף 10 מ"ג של דגימת צואה על מקל אפליקטור.
  4. הניחו את הדגימה על כרטיס הבדיקה ומרחו מריחה דקה על הכרטיס. פתח את הדש האחורי והחל מפתח על המריחה.
  5. לאחר מכן, ציון לדם סמוי באמצעות נייר בדיקת דם סמוי בצואה תוך 120 שניות.
    הערה: כל זכר של כחול על או בקצה המריחה חיובי לדם סמוי. ציוני הנסתר בצואה היו כדלקמן: 0: אין, 1: המוקולט חיובי, 2: קל, 3: עקבות דם בצואה ו-4: דימום גס.
  6. זהה את עקביות הצואה על ידי זיהוי דגימת הצואה11. הקצה ציון של 0-4 (0: רגיל, 1: צואה רכה, 2: צואה חצי מעוצבת, 3: צואה נוזלית ו-4: שלשול).

7. איסוף רקמות

  1. להרדים את העכברים על ידי הזרקת 10% כלורל הידרט (10 מ"ג/ק"ג) בתום השלב הראשון והשני של הניסוי. העריכו את עומק ההרדמה בעכברים על ידי רפלקס נסיגת הצביטה.
  2. לאחר מכן, המתת חסד של העכברים על ידי פריקת צוואר הרחם.
  3. תקן את העכברים שוכב על שולחן הניתוחים, ופתח את חלל הצפק.
  4. הפרד את כל המעי הגס בניתוח ומדוד את האורך בעזרת סרגל.
  5. לאחר מכן, שטפו בעדינות את המעי הגס עם מזרק של 5 מ"ל מלא ב-PBS מקורר מראש.

8. הערכת נזק היסטולוגי

  1. חותכים את רקמת המעי הגס לשברים קטנים, מקבעים אותם ב-4% פרפורמלדהיד ומטמיעים אותם בפרפין באמצעות מכונת הטמעת רקמות.
  2. לאחר מכן, חתכו את הרקמות המוטבעות בפרפין עם מיקרוטום להכנת קטעי רקמת המעי הגס בעובי 4 מיקרומטר. מסירים שעווה ומייבשים את חלקי המעי הגס. לאחר מכן, צבעו את חלקי המעי הגס בהמטוקסילין ואאוזין (H&E).
    הערה: דגימות המעי הגס המוכתמות מוערכות על ידי החוקר באמצעות מערכת למדדים הבאים: דרגת חדירת תאים דלקתיים (אין: 0, קל: 1, בינוני: 2, חמור: 3), נזק לרירית (אין: 0, שכבה רירית: 1, תת-רירית: 2, שרירים וסרוזה: 3), נזק לקריפטה (אין: 0, 1/3: 1, 2/3: 2, שלם: 3, שלם + אובדן אפיתל: 4), טווח הנגעים (%) (0%: 0, 1%-25%: 1, 26%-50%: 2, 51%-75%: 3, 76%-100%: 4). ציון הנזק ההיסטולוגי הכולל מחושב עבור כל ציון בודד של המדדים לעיל5.
  3. תנו לשני נסיינים עצמאיים להעריך (עיוורו) את הציונים ההיסטולוגיים של הדגימה תחת מיקרוסקופ אור.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

תוספי ב. צראוס וקוליטיס
מודל הקוליטיס הניסיוני החריף הושרה על ידי התערבות DSS במי שתייה. איור 1A מראה את הפרוטוקול הניסיוני למתן B. cereus למודל העכבר של קוליטיס. השראת DSS כמובן הפחיתה את משקל הגוף (איור 1B) ואת אורך המעי הגס. ההשפעה המקלה של B. cereus באמצעות גבאז' דרך הפה נחקרה על עכברי מודל קוליטיס. בהשוואה לעכברי קוליטיס הנגרמת על ידי DSS, ירידה במשקל הגוף וקיצור אורך המעי הגס (איור 1C

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

על מנת להשתמש בפרוביוטיקה במחקרים קליניים, יש צורך להעריך את היעילות והבטיחות של פרוביוטיקה במודלים של בעלי חיים. הפרוטוקולים שסופקו עברו אופטימיזציה בעבר להערכת חומרת הקוליטיס. עכברים שטופלו ב-DSS הם מודל לדלקת מעיים, המחקה את המאפיינים הקליניים וההיסטולוגיים האופייניים לקוליטיס כיבית12. עכברי מודל קוליטיס חריפה מאופיינים בירידה במשקל הגוף, שלשולים, דימום צואתי וחדירת תאים דלקתיים13. מערכת הניקוד של מדד פעילות המחלה (DAI) משמשת להערכה איכו...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

למחברים אין מה לחשוף.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מחקר זה נתמך לפחות בחלקו על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (ק.ס., מענק מס' 32000081), הקרן למדעי הטבע של מחוז אנהוי (ק.ס., מענק מס' 1908085QC120), תוכנית הפרויקט הפתוח של מעבדת המפתח הממלכתית למדע וטכנולוגיה של מזון, אוניברסיטת ג'יאנגנאן (ק.ס., מענק מס' SKLF-KF-201920), הקרן למדעי הטבע של מוסדות ההשכלה הגבוהה של אנהוי בסין (ק.ס., מענק מס' KJ2019A0040), קרן המחקר המדעי לדוקטורט של אוניברסיטת אנהוי (K.S., מענק מס' J01003316), הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (Y.W., מענק מס' 31770066, 31470218), הקרן הפתוחה לבניית דיסציפלינה, המכון למדע פיזיקלי וטכנולוגיית מידע של אוניברסיטת אנהוי (Y.W.), ותוכנית הכישרונות המצטיינים של אוניברסיטת אנהוי, סין (Y.W.).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
0.01 M PBS (אבקה, pH7.2– 7.4)סולארביוP1010-2L
אלכוהול אתילי מוחלטהושי64-17-5
תמיסת בידול fsat אלכוהול חומציביוטייםמס' C0163S
אגרסנגון ביוטק9002-18-0
אמפיציליןסולארביו69-53-4אחסן ב-2– 8 & deg; C
חממה אנאירוביתלונג יוLA1-3T
דקסטרן סולפט נתרן מלח קוליטיס דרגהMP ביומדיקל160110
חממה אלקטרותרמיתצרפתHP-050A
מקבע רקמות לשימוש כלליביושארפBL539א
גליצרינוםהושי56-81-5
ערכת צביעת המטוקסילין ואאוזיןביוטייםמס' C0105
מדיום ההרכבה של Kisserביוטייםמס' C0181
מטרונידזולסולארביו443-48-1אחסן ב-2– 8 & deg; C
נאומיין סולפטסולארביו1405-10-3אחסן ב-2– 8 & deg; C
חממה מתנדנדתשנחאי ז'יצ'וZQLY-180S
נתרן כלוריסנגון ביוטק7647-14-5
נייר בדיקת דם סמוי בצואהבאסוBA2020B
טריפטוןאוקסואיד2285856
ונקומיציןסולארביו1404-93-9אחסן ב-2– 8 & deg; C
קסילןהושי1330-20-7
תמצית שמריםסנגון ביוטק8013-01-2

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Pittayanon, R., et al. Differences in gut microbiota in patients with vs without inflammatory bowel diseases: A systematic review. Gastroenterology. 158 (4), 960-946 (2020).
  2. Kuehn, F., Hodin, R. A. Impact of modern drug therapy on surgery: Ulcerative colitis. Visceral Medicine. 34 (6), 426-431 (2018).
  3. Harmand, P. -O., Solassol, J. Thiopurine drugs in the treatment of ulcerative colitis: Identification of a novel deleterious mutation in TPMT. Genes. 11 (10), 1212(2020).
  4. Sheng, K., et al. Synbiotic supplementation containing Bifidobacterium infantis and xylooligosaccharides alleviates dextran sulfate sodium-induced ulcerative colitis. Food & Function. 11 (5), 3964-3974 (2020).
  5. Sheng, K., et al. Probiotic Bacillus cereus alleviates dextran sulfate sodium-induced colitis in mice through improvement of the intestinal barrier function, anti-inflammation, and gut microbiota modulation. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 69 (49), 14810-14823 (2021).
  6. Wei, L., et al. PRKAR2A deficiency protects mice from experimental colitis by increasing IFN-stimulated gene expression and modulating the intestinal microbiota. Mucosal Immunology. 14 (6), 1282-1294 (2021).
  7. Souza, E. L. S., et al. Beneficial effects resulting from oral administration of Escherichia coli Nissle 1917 on a chronic colitis model. Beneficial Microbes. 11 (8), 779-790 (2020).
  8. Trinder, M., Daisley, B. A., Dube, J. S., Reid, G. Drosophila melanogaster as a high-throughput model for host-microbiota interactions. Frontiers in Microbiology. 8, 751(2017).
  9. Liang, W., et al. Colonization potential to reconstitute a microbe community in pseudo germ-free mice after fecal microbe transplant from equol producer. Frontiers in Microbiology. 11, 1221(2020).
  10. Hernandez-Chirlaque, C., et al. Germ-free and antibiotic-treated mice are highly susceptible to epithelial injury in DSS colitis. Journal of Crohns & Colitis. 10 (11), 1324-1335 (2016).
  11. Sheng, K., et al. Grape seed proanthocyanidin extract ameliorates dextran sulfate sodium-induced colitis through intestinal barrier improvement, oxidative stress reduction, and inflammatory cytokines and gut microbiota modulation. Food & Function. 11 (9), 7817-7829 (2020).
  12. Xu, X., et al. Histological and ultrastructural changes of the colon in dextran sodium sulfate-induced mouse colitis. Experimental and Therapeutic Medicine. 20 (3), 1987-1994 (2020).
  13. Zheng, L., et al. Jianpi Qingchang decoction alleviates ulcerative colitis by inhibiting nuclear factor-kappa B activation. World Journal of Gastroenterology. 23 (7), 1180-1188 (2017).
  14. Gao, X., et al. Symptoms of anxiety/depression is associated with more aggressive inflammatory bowel disease. Scientific Reports. 11, 1440(2021).
  15. Thippeswamy, B. S., et al. Protective effect of embelin against acetic acid induced ulcerative colitis in rats. European Journal of Pharmacology. 654 (1), 100-105 (2011).
  16. Sakai, S., et al. Astaxanthin, a xanthophyll carotenoid, prevents development of dextran sulphate sodium-induced murine colitis. Journal of Clinical Biochemistry and Nutrition. 64 (1), 66-72 (2019).
  17. Li, S., et al. Role of gut microbiota in the anti-colitic effects of anthocyanin-containing potatoes. Molecular Nutrition & Food Research. 65 (24), 2100152(2021).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

DSSGavage

מאמרים קשורים