Method Article

מינון בולוס תוך ורידי מרובים והערכה המודינמית פולשנית במודל יתר לחץ דם של עורק ריאתי בעכבר הנגרם על ידי היפוקסיה

DOI:

10.3791/63839

⸱

November 11th, 2022

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Surgery, Yale University School of Medicine, 2Department of Vascular Surgery, The First Hospital of China Medical University, Key Laboratory of Pathogenesis, Prevention, and Therapeutics of Aortic Aneurysm, 3VasoRx Inc., 4Yale Cardiovascular Research Center, Department of Internal Medicine, Yale University School of Medicine, 5Department of Cell Biology, Yale University School of Medicine

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פרוטוקול זה מספק הליך שלב אחר שלב לביצוע מתן מינון בולוס תוך ורידי מרובים וניטור המודינמי פולשני בעכברים. חוקרים יכולים להשתמש בפרוטוקול זה לבדיקת תרכובת טיפולית עתידית ליתר לחץ דם בעורק הריאה.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

יתר לחץ דם עורקי ריאתי (PAH) היא מחלה מתקדמת ומסכנת חיים, הפוגעת בעיקר בעורקי הריאה הקטנים של הריאה. נכון לעכשיו, אין תרופה עבור PAH. חשוב לגלות תרכובות חדשות שניתן להשתמש בהן לטיפול ב- PAH. מודל PAH הנגרם על ידי היפוקסיה בעכבר הוא מודל בשימוש נרחב למחקר PAH. מודל זה משחזר ביטויים קליניים אנושיים של מחלת PAH Group 3 והוא כלי מחקרי חשוב להערכת יעילותם של טיפולים ניסיוניים חדשים עבור PAH. מחקר באמצעות מודל זה דורש לעתים קרובות מתן של תרכובות בעכברים. עבור תרכובת שצריכה להינתן ישירות לזרם הדם, אופטימיזציה של מתן תוך ורידי (IV) היא חלק מרכזי בהליכי הניסוי. באופן אידיאלי, מערכת הזרקת העירוי צריכה לאפשר זריקות מרובות על פני מסלול זמן מוגדר. למרות שמודל PAH המושרה על ידי היפוקסיה בעכבר פופולרי מאוד במעבדות רבות, זה מאתגר מבחינה טכנית לבצע מינון בולוס IV מרובים והערכה המודינמית פולשנית במודל זה. בפרוטוקול זה, אנו מציגים הוראות שלב אחר שלב כיצד לבצע מינון בולוס IV מרובה דרך וריד הצוואר של העכבר ולבצע צנתור עורקי וחדר ימין להערכה המודינמית במודל PAH הנגרם על ידי היפוקסיה בעכבר.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

יתר לחץ דם בעורק הריאה (PAH) מוגדר על ידי לחץ סיסטולי ממוצע של עורק הריאה הגדול מ -20 מ"מ כספית במנוחה 1,2. זוהי מחלה פרוגרסיבית וקטלנית המאופיינת בעלייה מתמשכת בלחץ עורקי הריאה, המובילה לעומס יתר בחדר ימין ובסופו של דבר למוות עקב אי ספיקת חדר ימין1. נכון לעכשיו, אין תרופה עבור PAH.

השימוש במודלים של יתר לחץ דם ריאתי בבעלי חיים חשוב לבדיקת יעילותם של טיפולי PAH ניסיוניים. בין מודלים אלה, מודל PAH הנגרם על ידי היפוקסיה בעכבר סיפק תובנות מפתח לגבי התפתחות מחלת PAH 3 בבני אדם 3,4. מחקר המשתמש במודל זה דו....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל ההליכים בבעלי חיים בוצעו תחת פרוטוקולים שאושרו על ידי ועדות מוסדיות לטיפול ושימוש בבעלי חיים באוניברסיטת ייל.

1. הכנת בעלי חיים, כלים, ציוד למדידת לחץ דם ותא היפוקסיה

  1. התאקלמות בעלי חיים.
    הערה: חיות ניסוי ששימשו למחקר זה היו זכרים, עכברי C57BL/6 בני 8 שבועות במשקל 25-27 גרם. יש לקחת בחשבון מספר גורמים בעת הערכת מספר בעלי החיים הדרושים לניסוי, כולל תמותה הקשורה לניתוח, סיבוכים כירורגיים בלתי צפויים ומוות פתאומי בלתי צפוי. השתמשו בלפחות 10 עכברים בכל קבוצה כדי להגיע לכוח סטטיסטי ולהימנע ממחקרים חלשים.
    1. עם קבלת הפנים, אכסנו את בעלי החיים בכלובי מכרסמים מאווררים (קבוצות של חמישה בעלי חיים בכל כלוב) המסופקים....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

הרדמה לעתים קרובות מפחיתה את לחץ הדם. לכן, מינון מינימלי של הרדמה שימש כדי לבטל את התנועות בתגובה לגירוי מזיק. ניתן לדמיין גישה מוצלחת לחדר החדר הימני כאשר צורת הגל ההמודינמית משתנה באזורים שונים של מערכות ורידיות (איור 8).

במחקר זה, עכברים חולקו באופן אקראי לקבוצת נורמוקסי (21% O2) (n = 10), היפוקסיה (10% O2) (n = 10), או היפוקסיה + 7C1 / let-7 קבוצת טיפול (n = 10). כדי לבחון את ההשפעה של let-7 miRNA בדיכוי התפתחות PAH הנגרמת על ידי היפוקסיה.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מספר מודלים של יתר לחץ דם ריאתי בבעלי חיים הוקמו כדי לחקות את אירועי התנגדות כלי הדם הריאתיים הגבוהים בנבדקים אנושיים. ביניהם, מודל PAH הנגרם על ידי היפוקסיה בעכבר נמצא בשימוש נרחב להערכת היעילות של טיפולים ניסיוניים חדשים עבור PAH. מחקר באמצעות מודל זה דורש לעתים קרובות מתן של תרכובות לעכברים. בהשוואה לפרוטוקולים אחרים שפורסמו של הזרקה תוך ורידית (IV) והערכה המודינמית פולשנית, שיטה זו מספקת הן המחשה חזותית והן תיאור מפורט.

ישנם שלושה שלבים קריטיים לביצוע מוצלח של ההליך ולהשגת מדידות לחץ דם מד.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

K Zsebo, M Simons ו- P-Y Chen הם מייסדים מדעיים ובעלי מניות של VasoRx, Inc. M Simons הוא חבר במועצה המדעית המייעצת של VasoRx, Inc. HJ Duckers הוא עובד ובעל מניות של VasoRx. המחברים האחרים מצהירים שאין אינטרסים מתחרים.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עבודה זו נתמכה בחלקה על ידי מיקרו-מענק של קונסורציום ביולוגיה משותף שניתן במסגרת מענק NIH P30AR070253 (PYC), קרן חינוך למחקר רפואי קרדיווסקולרי (PYC), VasoRx, Inc. Fund (MS) ומענקים של NIH HL135582 (MS), HL152197 (MS).

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
5-0 חבילת תפרים פרולןEthicon8698Gלסגירת חתך
8-0 חבילת תפרים ניילוןAROSמכשירים אורגייםT06A08N14-13לקשירה
תא אינדוקציה להרדמהVETEQUIP#941444מחזיק את החיה במהלך חשיפה להרדמה
כבל ממשק קטטר PEC-4DMillarלחיבור קטטר Millar Mikro-Tip ל מסנני מיכל פחם PCU-2000
VETEQUIP#931401  כדי לסייע בהסרה  פסולת הרדמה  גזים
צמר גפןMcKesson24-106להפעלת לחץ על מקום ההזרקה למניעת דימום
מספריים עדיניםFine Science Tools14059-11כלים כירורגיים
מזרק אינסולין 28 גרםEXEL26027להזרקת IV של וריד הצוואר
IsofluraneCOVETRUS#029405להרדמת עכבר
תוכנת LabChart 8אמצעיםלניתוח נתונים
צנתר לחץ Mikro-Tip SPR-1000 (1.0 F)Millarלמדידת לחץ דם פולשני
מחט-25 GBD305124ליצירת חור בכלי
בקר חמצן ProOx חיישן חמצן BioSpherixE702לניטור ריכוז חמצן
PCU-2000 יחידת בקרת לחץMillarלחיבור צנתר Millar Mikro-Tip ל-PowerLab 4/35
PowerLab 4/35ADIstrumentsfor Data Acquisition.
החוקר צריך לחבר את ה-PowerLab 4/35 למחשב נייד אישי המכיל תוכנת LabChart 8 לצורך הפעלה.
פריזמה 8GraphPadלסטטיסטיקה וגרפים מדעיים
תא היפוקסיה הניתן לאטימה למחצהBioSpherixסביבה מלאכותית המדמה תנאי גובה רב לבעלי חיים
מספריים אביבייםכלי מדע עדינים15021-15כלים כירורגיים
פינצטה סגנון 4מדעי מיקרוסקופיה אלקטרונית0302-4-POכלים
כירורגייםתרכובת VasoRx 7C1/let-7 miRNAVasoRx, Inc.Lot # B2-L-16AprIV תרכובת הזרקה
VIP 3000 וטרינרי וופרייזרCOLONIAL MEDICAL SUPPLY CO., INC.למתן הרדמה מדויקת

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. McLaughlin, V. V., McGoon, M. D. Pulmonary arterial hypertension. Circulation. 114 (1), 1417-1431 (2006).
  2. Hoeper, M. M., Humbert, M. The new haemodynamic definition of pulmonary hypertension: evidence prevails, finally. European Respiratory Journal. 53....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Pulmonary Arterial HypertensionHypoxia Mouse ModelIntravenous Bolus DosingHemodynamic AssessmentJugular Vein InjectionRight Ventricle CatheterizationArterial CatheterizationBlood Pressure MeasurementDrug Development ScreeningCatheter Insertion

Related Articles