פרוטוקול זה מפרט את השלבים הכירורגיים של יצירת פיסטולה עורקית איליאק משותפת. פיתחנו מודל זה כדי לחקור פתופיזיולוגיה של הגפיים הקשורות להמודיאליזה.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
פרוטוקול זה מפרט את השלבים הכירורגיים של יצירת פיסטולה עורקית איליאק משותפת. פיתחנו מודל זה כדי לחקור פתופיזיולוגיה של הגפיים הקשורות להמודיאליזה.
מחלת כליות כרונית היא בעיה מרכזית בבריאות הציבור, והשכיחות של מחלת כליות סופנית (ESRD) הדורשת טיפולים כרוניים בתחליפי כליות כגון המודיאליזה ממשיכה לעלות. מיקום פיסטולה עורקית אוטוגנית (AVF) נותר אפשרות גישה וסקולרית עיקרית עבור חולי ESRD. למרבה הצער, כמחצית מחולי המודיאליזה חווים הפרעות בתפקוד היד הקשור לדיאליזה (ARHD), החל מנימול עדין ועד נמק דיגיטלי. יש לציין כי המניעים הביולוגיים הבסיסיים האחראים ל- ARHD אינם מובנים היטב, ולא קיים מודל מתאים של בעלי חיים כדי להבהיר את המנגנונים ו / או לפתח טיפולים חדשניים למניעה/טיפול ב- ARHD. במאמר זה נתאר מודל עכברי חדש שבו נוצר AVF בין העורק האיליאק המשותף השמאלי לווריד, ובכך מקל על הערכת הפתופיזיולוגיה של הגפיים. המיקרו-כירורגיה כוללת בידוד כלי דם, ורנוטומיה אורכית, יצירת אנסטומוזה עורקית ושחזור ורידי. ניתוחי דאם כוללים את כל השלבים הקריטיים למעט יצירת AVF. מיקום Iliac AVF גורם לשינויים רלוונטיים מבחינה קלינית בהמודינמיקה המרכזית, איסכמיה היקפית וליקויים בביצועים נוירומוטוריים בגפיים האחוריות. מודל AVF פרה-קליני חדשני זה מספק פלטפורמה שימושית המשחזרת הפרעות נוירומוטוריות נפוצות שדווחו על ידי חולי המודיאליזה, ומאפשר לחוקרים לחקור את המנגנונים של פתופיזיולוגיה של ARHD ולבחון טיפולים פוטנציאליים.
הקמה ושימור של גישה תפקודית לכלי הדם נותרה מטרה עיקרית חשובה עבור חולי מחלת כליות סופנית (ESRD) המקבלים טיפול בתחליפי כליות באמצעות המודיאליזה1. טיפולי המודיאליזה חוזרים ונשנים נחוצים כדי להסיר מוצרי פסולת, לנרמל אלקטרוליטים ולשמור על איזון נוזלים ברגע שתפקוד הכליות הופך ללקוי, ולכן הם נחוצים להישרדות לטווח ארוך2. לכן, גישה וסקולרית מייצגת "חבל הצלה" עבור חולים עם ESRD, ומיקום פיסטולה עורקית אוטוגנית (AVF) נותר אפשרות גישה מועדפת לדיאליזה בקרב קבוצהזו 3. עם זאת, כ-30%-60% מחולי המודיאליזה חווים ספקטרום של נכויות ידיים, המוגדרות קלינית כתפקוד לקוי של היד (ARHD). הסימפטומים של ARHD יכולים לנוע בין חולשה וחוסר תיאום למונופלגיה ונמק דיגיטלי, אשר יכול להתרחש מוקדם לאחר יצירת AVF או להתפתח בהדרגה עם התבגרות פיסטולה. יתר על כן, ARHD מסבך את לוח הזמנים לטיפול ESRD, אשר קשורה לאיכות חיים ירודה, סיכון גבוה למחלות לב וכלי דם, ותמותה מוגברת 2,3,4.
מספר מודלים של בעלי חיים פותחו כדי לחקור עיצוב מחדש של כלי דם הנגרמים על ידי שינויים המודינמיים לאחר יצירת AVF 5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15. מודלים גדולים של בעלי חיים עם AVF 16,17,18,19,20 ומודלים של מכרסמים המשתמשים באנסטומוזה של עורק התרדמה-עורק הצוואר או בהיווצרות פיסטולה אינפרא-כלייתית של אבי העורקים הנבוב התחתון מבוססים היטב כדי לבחון את ההיבטים הנ"ל של התבגרות AVF ופטנטיות 21 . לדוגמה, יתר לחץ דם ורידי, קוטר לומינלי גדול יותר ועובי דופן ורידי מוגבר הם סימנים להבשלה מוצלחת של AVF, בעוד שפיברוזיס משמעותי של המדיה והתפתחות היפרפלזיה אינטימית או פקקת ללא שינויים בזרימה מאפיינים לעתים קרובות כשלים של AVF 6,15. עם זאת, מודלים של בעלי חיים גדולים חסרים את הגמישות הניסיונית או את היכולות המהונדסות של מודלים של מורין, בעוד שמודלים עכשוויים של מכרסמים אינם מאפשרים בקלות חקירה של ARHD בשל המיקום האנטומי ו / או היעדר פתולוגיה של הגפיים הקשורות. ואכן, בשל היעדר מודל מבוסס של בעלי חיים פרה-קליניים המשחזר את הפנוטיפ הקליני הרלוונטי, התקדמות המחקר להבהרת המנגנונים הפתוביולוגיים ופיתוח אסטרטגיות טיפוליות חדשניות נותרה קפואה, למרות עלייה הדרגתית במספר חולי ARHD סימפטומטיים. לכן, המטרה העיקרית של מחקר זה היא להציג מודל עכבר ייחודי של ARHD, מתן צעדים פרוצדורליים של מיקרו-כירורגיה AVF ואפיון של פתופיזיולוגיה הקשורה ל- AVF.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
כל ההליכים אושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים (IACUC) של אוניברסיטת פלורידה והמרכז הרפואי לענייני חיילים משוחררים מלקום רנדל.
הערה: עכברי C57BL/6J זכרים בוגרים צעירים (בני 8-10 שבועות) נרכשו ממעבדת ג'קסון ושוכנו באור (12 שעות אור: 12 שעות מחזור כהה), טמפרטורה (22 ° C ± 1 ° C) ולחות (50% ± 10%) מתקן בעלי חיים נשלט. חמישה עכברים הורשו לשהות בכל כלוב (W:18 cm x L:29 cm x H:12.5 cm) עם חומרי קינון, מזון ומים זמינים עד לליביטום. לאחר 7 ימים של התאקלמות בית גידול עם צ'או סטנדרטי, העכברים שונו לתזונת צ'או מבוססת קזאין למשך 7 ימים כשלב מעבר לתזונה. לאחר מכן, עכברים קיבלו צ'או מבוסס קזאין עם תוספת אדנין של 0.2%-0.15% במשך 2-3 שבועות כדי לגרום לתפקוד כלייתי לקוי (CKD) לפני ניתוח AVF כפי שתואר קודם לכן22,23,24. עכברי ביקורת קיבלו דיאטת צ'או מבוססת קזאין ללא תוספת אדנין (ביקורת). דיאטות הבקרה וה- CKD נשמרו לאורך כל תקופת ההחלמה שלאחר הניתוח (POD).
1. מדידות טרום ניתוחיות
2. הכנה כירורגית
3. הרדמה ומיקום
4. חקר אזור המטרה הניתוחית
5. יצירת אנסטומוזה משותפת של פיסטולה עורקית איליאק
6. טיפול ומדידה לאחר הניתוח
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
בעלי חיים שנחשפו לדיאטת אדנין הפחיתו את שיעורי הסינון הגלומרולרי (בקרה: 441.3 ± 54.2 מיקרוליטר/דקה לעומת CKD: 165.1 ± 118.3 מיקרוליטר/דקה, p < 0.05) ורמות גבוהות יותר של חנקן אוריאה בדם בסרום (בקרה: 20.39 ± 4.2 מיקרוליטר/דקה לעומת CKD: 38.20 ± 10.65 מיקרוליטר/דקה, p < 0.05) בהשוואה לבעלי החיים שקיבלו צ'או מבוסס קזאין, המאשר את קיומה של אי ספיקת כליות לפני ניתוח פיסטולה עורקית.
אימות פטנט AVF
למרות שאישור חזותי תוך ניתוחי להצלחה טכנית הוא הזיהוי הראש...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
השכיחות של חולי המודיאליזה עם ARHD לאחר יצירת AVF המשיכה לעלות30,31. ואכן, סיבוכים סימפטומטיים לא פתורים 4,32,33 כגון כאב, חולשה, נימול ו / או טווח תנועה מופחת יכולים להשפיע לרעה על רווחת המטופלים 4,32,33,34,35,36 ולאיים על יכולתם לקבל טיפול המודיאליזה חוזר באיכות גבוהה.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
למחברים אין מה לחשוף.
אנו מודים מקרב לב לד"ר גוואני לו מהמחלקה לכירורגיית כלי דם וטיפול אנדוסקולרי באוניברסיטת פלורידה על התמיכה הטכנית בפיתוח מודל AVF iliac, כמו גם הכשרה כירורגית, וראווי קומאר מהמחלקה לפיזיולוגיה יישומית וקינסיולוגיה באוניברסיטת פלורידה על התמיכה הטכנית בקבלת התמונות המיקרוכירורגיות החיות.
עבודה זו נתמכה על ידי מענקים מהמכונים הלאומיים לבריאות וללב, ריאות ודם לאומיים, מספרי המכון R01-HL148697 (ל- S.T.S.), כמו גם מענק איגוד הלב האמריקאי מספר POST903198 (לק.ק).
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| 0.15% דיאטת אדנין | ENVIGO | TD.130899 | 20% קזאין, 0.15% אדנין, 0.9% P |
| 0.2% דיאטת אדנין | ENVIGO | TD.130900 | 20% קזאין, 0.2% אדנין, 0.9% P |
| 10-0 תפר ניילון | AD כירורגי | XXS-N1005T4 | |
| 29 גרם מזרקי מחט | Exel International | 14-841-32 | |
| 31 G מזרקי מחט | Advocate | U-100 מזרק אינסולין | |
| 4-0 תפר משי | AD כירורגי | S-S41813 | |
| מלקחיים דומונט בזווית 45 מעלות | Fine Science Tools | 11253-25 | |
| 5-0 תפר PGA | AD כירורגי | PSGU-518R13 | |
| 6-0 תפר משי | AD כירורגי | S-S618R13 | |
| ספוג ג'לטין נספג | ETHICON | 1975 | |
| אלכוהול מכין | Covidien | 5110-cs4000 | 70% איזופרופיל אלכוהול |
| בופרנורפין | NA | 0.01 גרם/מ"ל | |
| C57BL6/J עכברי | מעבדה Jaxon | ||
| דיאטת קזאין | ENVIGO | TD.130898 | 20% קזאין, 0.9% P |
| צמר גפן | CONSTIX | SC-9 | צמר גפן עגול בינוני חד קצה |
| צמר גפן | CONSTIX | SC-4 | ספוגית כותנה קטנה דו-צדדית קשה, חדה ומחודדת |
| Curity ספוגים לא ארוגים (2x2) | Covidien | 9022 | |
| מספריים קפיציים מעוקלים של Vannas | Fine Science Tools | 15001-08 | |
| אולטרסאונד דופלר | VisualSonics | Vevo 2100 | |
| מלקחיים דקים במיוחד | Fine Science | Tools 11150-10 | 2 זוגות |
| עין חומר סיכה | CLCMEDICA | Optixcare סיכה | |
| הפרין (5000 U/mL) | רשימת קודי תרופות לאומית | 63739-953-25 | 100 IU/mL |
| מעקר חרוזים חמים | Fine Science Tools | 18000-50 | |
| צריבה בטמפרטורה נמוכה | Bovie | AA04 | |
| גוזם עט | Wahl | 5640-600 | |
| כפפות כירורגיות ללא אבקה | Ansell | 7824PF | |
| מחזיקי מחט עם ידית עגולה | כלי מדע עדינים | 12076-12 | |
| וילון מגבת סטרילי | Dynarex | DY440-MI | |
| מעוקר 0.9% מלח | רשימת קודי תרופות לאומית | 46066-807-25 | |
| מלקחיים ישרים דומונט | כלי מדע עדינים | 11253-20 | |
| מחזיק מחט ישר | מדע עדין כלים | FST 12001-13 | |
| מספריים קפיציים ישרים של ואנה | מדע עדינים | 25001-08 | |
| TrizChLOR4 | רשימת קודי תרופות לאומית | 17033-279-50 |
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.