מאמר שיטה

פרוטוקול הצלת עוברים להכלאה בין-מינית בסקווש

DOI:

10.3791/64071

⸱

12 בספטמבר 2022

 ,  ,  , 
1UF/IFAS Tropical Research and Education Center

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המאמר מתאר פרוטוקול חילוץ עוברים להתחדשות של עוברים לא בשלים הנגזר מההכלאה הבין-מינית של Cucurbita pepo ו- Cucurbita moschata. ניתן לשכפל את הפרוטוקול בקלות והוא יהווה משאב חשוב לתוכניות גידול סקווש.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

הכלאה בין-מינית בגידולי קוקורביטה (סקווש) רצויה להרחבת השונות הגנטית ולאינטרוגרסיה של אללים שימושיים. עוברים לא בשלים הנוצרים מצלבים רחבים אלה חייבים להתחדש באמצעות טכניקות מתאימות להצלת עוברים. למרות שטכניקה זו מבוססת היטב עבור גידולים רבים, חסר תיאור מפורט של המתודולוגיה המתאימה לדלעת שתאפשר את יישומה השגרתי. כאן אנו מתארים פרוטוקול הצלת עוברים שימושי להכלאה בין-מינית של C. pepo ו- C. moschata. כדי לזהות שילובים בני קיימא להצלת עוברים, בוצעו 24 צלבים בין-ספציפיים. סט פירות התקבל מעשרים ושניים צלבים, מה שמעיד על שיעור הצלחה של 92%. עם זאת, רוב הפירות שהתקבלו היו parthenocarpic, עם זרעים נטולי עוברים (זרעים ריקים). רק שילוב צלב אחד הכיל עוברים לא בשלים שניתן היה לחדשם באמצעות אמצעי גידול צמחיים בסיסיים. בסך הכל חולצו 10 עוברים מפרי F1 הבין-ספציפי, ושיעור ההצלחה של הצלת עוברים היה 80%. פרוטוקול חילוץ העוברים שפותח כאן יהיה שימושי להכלאה בין-מינית בתוכניות גידול סקווש.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

קוקורביטה (שם מדעי: Cucurbita; 2n = 40) הוא סוג מגוון מאוד במשפחת ה-Cucurbitaceae, הכולל 27 מינים שונים, מתוכם חמישה מבויתים1. מבין אלה, Cucurbita moschata, C. pepo, ו- C. maxima הם החשובים ביותר מבחינה כלכלית בעולם. בארה"ב, C. moschata ו- C. pepo הם שני המינים החשובים ביותר בייצור החקלאי. C. pepo מורכב מארבעה תת-מינים (ovifera, pepo, fraternal ו-gumala) המכילים קבוצות דלעת בקיץ ובחורף של נוכלים, סטרייטנק, בלוט, צדפות, קוקוזל, מח ירקות, קישואים ודלעת 2,3,4,5.....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. שתילה והאבקה

הערה: חשוב לזהות גנוטיפים תואמים שההכלאה שלהם תביא לסט פירות ולייצור עוברים בני קיימא.

  1. תנאי שתילה ותחזוקה
    1. השג זרעים של גנוטיפים של דלעת (cultivars/accessions) להכלאה (טבלה 1).
    2. מלאו 50 תאים התחלתיים (25 ס"מ רוחב x 50 ס"מ אורך) עם חומר עציץ מתוקן עם דשן NPK שלם המכיל 1.38 גרם/ק"ג N, 1.38 גרם/ק"ג P ו-1.38 גרם/ק"ג K.
    3. זורעים זרעים לעומק השווה לאורכם ומכסים במדיום עציצים. להשקות את הדירות מבלי ליצור מים עומדים. לאחר מכן, שמרו על המדיה לחה על ידי השקיה ידנית פעם ביום.
    4. בשלב השני של עלי אמת, השתלו את השתילים לתוך עציצים בקוטר 25 ס"מ עד 30 ס"מ מתוקנים ....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כדאיות סט פירות וזרעים
נערכה בדיקה ראשונית לקביעת כדאיות סט הפירות והזרעים במגוון שילובים צולבים. בסך הכל נבחרו 15 גנוטיפים של דלעת, ארבעה C. pepo ו-11 C. moschata, (טבלה 1). מתוך 24 צירופי הצלב הבין-ספציפיים שנוסו, הושגה ערכת פירות עבור 22 (טבלה 2), המייצגת הצלחה כוללת של >92% בערכת הפירות. לא הושגו פירות בוגרים על ידי חציית O ו-M ו-E ו-J, בעוד שהמספר הגבוה ביותר של פירות (n = 6) הושגו על ידי חציית F ו-J (טבלה 2). מספר הפרחים שהו.......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ישנם שני צווארי בקבוק עיקריים להכלאה בין-מינית מוצלחת בין C. moschata ו- C. pepo: מחסום תאימות צולבת, הנקבע על ידי היענות גנוטיפית לייצור עוברים היברידיים, ומחסומים לאחר ההפריה, המעכבים את התפתחותם של עוברים היברידיים לזרעים רגילים. כפי שדווח בעבר על דלעת, בדיקת התאימות הצולבת במחקר הנוכחי גילתה כי רוב הפרי התפתח באופן חלקי, כאשר רוב הזרעים אינם ניתנים להשגה16. לגנוטיפ ההורי יש השפעה ניכרת על התאימות של הכלאה בין-מינית בין C. moschata ו- C. pepo. מבין 24 צירופי .......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים מצהירים על היעדר ניגוד עניינים.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עבודה זו נתמכה על ידי המכון הלאומי למזון וחקלאות של USDA, פרויקט NRS מס '. FLA-TRC-006176 והמכון למדעי המזון והחקלאות של אוניברסיטת פלורידה.

....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
אמפיציליןפישר סיינטיפיקBP1760-5
אוטוקלאבסטריסAMSCO LAB 250
איזון
צפוטקסיםסיגמא אלפריךC 7039
צינורות צנטריפוגה (1.5 מ"ל)סיגמא אלפריךT9661
חומר ניקוי
אתנול, 95%מלקחיים של Decon Labs2805HC
VWR82027-408
מסטיק גלאןCaisson LaboratoriesG024
תא גידול או מדף
מואר מכסה מנוע למינרי / ארון בטיחות ביולוגיתThe Baker Company, IncEdgegard
נייר דבק UlineS-11735
מדיה בקבוק
Murashige & Skoog Medium ResearchProducts InternationalM10200
NPK דשן (20-20-20)BWI Companies, Inc  PR200
Osmocote Plus דשןBWI Companie,s IncOS90590
Parafilm MSigma AlfrichP7793
צלחת פטרי (60 x 15 מ"מ)USA Scientific, Inc8609-0160
עציצים לצמחיםBWI Companies, IncNP4000BXL
מיכלי מזון מפלסטיק, בשימוש חוזראוסקר מאייר4470003330
תגי תלייה מפלסטיקשל אמזוןB07QTZRY6T
ג'וליגארדנרPro-Line C/B
מגשי התחלה שתילים BWICompanies Incמסנן
(0.22 אום)ExtraGeneB25CA022-S
הוםדיפו  2A060006
אמבטיית
תערובת עציצים מזרק GPPF128S4 תמיכה בסבכה מים

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Paris, H. S. Genetic Resources of Pumpkins and Squash, Cucurbita spp. Genetics and Genomics of Cucurbitaceae. Plant Genetics and Genomics: Crops and Models. Grumet, R., Katzir, N., Garcia-Mas, J. 20, (2016).
  2. Gong, L., Stift, G., Kofler, R., Pachner, M., Lelley, T.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

CucurbitaMS

מאמרים קשורים