הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

הערכת דומיננטיות חברתית במודלים של עכברים באמצעות מבחן המבחנה

2.4K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/67919

⸱

6 ביוני 2025

 ,  ,  ,  , 
1Department of Neurology, Center for Neurodegeneration and Experimental Therapeutics, Alzheimer's Disease Center, University of Alabama at Birmingham, 2Department of Biostatistics, Ryals School of Public Health, University of Alabama at Birmingham

במאמר זה

סיכום

פרוטוקול זה מתאר מבחן התנהגותי להערכת דומיננטיות חברתית במכרסמים באמצעות מבחן המבחנה. הדומיננטיות החברתית נשארת יציבה לאורך זמן, ומספר מודלים של הפרעות התפתחותיות ונוירולוגיות מציגים חריגות דומיננטיות חברתיות חזקות. לכן, בדיקת הצינור משמשת כמדד תוצאה נוח למחקרים מכניסטיים או להקרנה טיפולית פרה-קלינית.

תקציר

דומיננטיות חברתית משתנה במחלות נוירו-התפתחותיות ונוירודגנרטיביות ומשמשת כמדד תוצאה שימושי במחקרים פרה-קליניים של הפרעות אלה. בדיקת המבחנה היא בדיקה התנהגותית פשוטה להערכת דומיננטיות חברתית שאינה דורשת ציוד יקר. בבדיקה זו, שני עכברים נכנסים לקצוות מנוגדים של צינור פלסטיק שקוף, ולאחר שנפגשו באמצע, אחד (הפחות דומיננטי) חייב לסגת. בדיקת המבחנה יכולה לשמש לעכברים זכרים ונקבות כאחד וכוללת מספר פרמטרים הניתנים להתאמה לצרכי החוקר. עכברים עשויים להיבדק מול מספר יריבים ייחודיים כדי לספק מדד לדומיננטיות חברתית. הדומיננטיות החברתית במבחן המבחנה נשארת יציבה על פני בדיקות חוזרות ונשנות ונמצאת בקורלציה עם ביצועים במבחנים חברתיים אחרים. בנוסף, ניתן לבצע את המבחן בין חברים לכלוב כדי להעריך היררכיות דומיננטיות חברתיות בתוך הכלוב. בדיקת הצינור שימושית במיוחד במחקרים טיפוליים פרה-קליניים, מכיוון שהיא מאפשרת בדיקות אורך לפני ואחרי התערבויות ניסיוניות. לכן, הוא משמש כמדד תוצאה נוח למחקרים מכניסטיים וסינון טיפולי פרה-קליני.

מבוא

הפרעה בהתנהגות חברתית היא מאפיין של הפרעות אנושיות רבות, כולל הפרעות התפתחותיות, פסיכיאטריות ונוירודגנרטיביות 1,2. מודלים של עכברים משמשים כדי לקבל תובנה לגבי הפתוגנזה של הפרעות אלו ולספק פלטפורמה לבדיקות פרה-קליניות של טיפולים. עם זאת, מבחנים רבים להתנהגות חברתית של עכברים גוזלים זמן לביצוע, דורשים ציוד יקר ו/או תוכנת מעקב וידאו לניתוח, או שיש להם אלגוריתמים סובייקטיביים של ניקוד. לעומת זאת, בדיקת המבחנה לדומיננטיות חברתית היא מהירה ופשוטה לביצוע ואינה דורשת ציוד מיוחד או מעקב וידאו. לבדיקה יש תוצאה בינארית של ניצחון/הפסד, מה שהופך את פרשנות התוצאות לפשוטה.

מבחן המבחנה לדומיננטיות חברתית פותח על ידי לינדזי ועמיתיו במאמץ להעריך דומיננטיות חברתית בעכברים3. מאז פיתוחו, בדיקת המבחנה הוקמה גם כדרך להעריך היררכיות דומיננטיות חברתיות בתוך הכלוב4. פנוטיפים של בדיקת מבחנה נמצאים בקורלציה עם מדדים אחרים של דומיננטיות חברתית כמו ספרות, תחרות תגמול וייצור שתן בעכברים זכרים5. עם זאת, ישנן תוצאות מעורבות של בדיקת המבחנה והמתאם שלה עם תחרות על גישה למזון ומים ותוקפנות 3,6,7. חשוב לציין, פנוטיפים של בדיקת מבחנה נמצאים בקורלציה עם פנוטיפים חברתיים אחרים כגון חברותיות תלת-קאמרית 8,9.

היתרון של בדיקת המבחנה הוא שהאנטומיה שלה מוגדרת היטב, מה שהופך אותה לשימושית במיוחד במודלים שונים של עכברים, כולל מודלים של הפרעות על הספקטרום האוטיסטי ומחלות אחרות המאופיינות בליקויים חברתיים כמו דמנציה פרונטו-טמפורלית 8,9,10,11,12,13,14,15,16 . קליפת המוח הקדם-מצחית האמצעית (mPFC) היא מתווך מרכזי בהתנהגות בדיקת מבחנה של עכבר6. וואנג ועמיתיו הראו כי פעילות בקליפת המוח הקדם-מצחית האמצעית מניעה דומיננטיות חברתית בעכברים6, ונתונים עדכניים יותר חידדו תובנה זו על ידי כך שהראו כי קלט תלמי מדיודורסלי לקליפת המוח החגורה הקדם-לימבית והקדמית מניע דומיננטיות חברתית17. בהתאם לתפקיד מפתח של ה-mPFC בדומיננטיות חברתית של בדיקת צינורית, חריגות בסורגים דנדריטיים, עמוד שדרה דנדריטי, קולטני גלוטמט ו/או ריגוש עצבי, ה-mPFC נקשר לחריגות בבדיקת מבחנה במודלים של מכרסמים של הפרעות בספקטרום האוטיסטי15,18, דמנציה פרונטו-טמפורלית 8,19, מתח כרוני20 ובידוד חברתי21.

יתרון מרכזי נוסף של בדיקת המבחנה הוא היכולת לבחון דומיננטיות חברתית לפני ואחרי התערבות טיפולית, שכן הדומיננטיות החברתית של העכברים בבדיקת המבחנה יציבה לאורך זמן, ומאפשרת בדיקות חוזרות לפני ואחריהתערבות ניסיונית. דוגמה אחת לכך מגיעה ממודלים של עכברים הטרוזיגוטיים של פרוגרנולין (Grn+/-) של דמנציה פרונטו-טמפורלית הנגרמת על ידי מוטציות פרוגרנולין (GRN), מחלת הפלו-אינספיקציה. לעכברים הטרוזיגוטיים של פרוגרנולין יש גירעון דומיננטיות חברתית8. ניתן להפוך את הגירעון הזה בבדיקת מבחנה על ידי שחזור פרוגרנולין עם טיפול גנטי AAV-progranulin22, או מתן נוגדנים נגד סורטילין שנועדו להפחית את פירוק הפרוגרנולין23. דוגמאות אלו מדגימות את התועלת של בדיקת המבחנה בתכנון ניסויים פרה-קליניים למחקר הקשור לדמנציה.

פרוטוקול זה מספק שיטות בסיסיות להפעלת בדיקת מבחנה בין לא-קגמטים כדי להעריך הבדלים בין קבוצות ניסוי, ובין קגמטים להערכת היררכיות דומיננטיות חברתיות בתוך הכלוב.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כל הליכי הניסוי אושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים של אוניברסיטת אלבמה בברמינגהם ובוצעו בהתאם לאגודה להערכה והסמכה של טיפול בחיות מעבדה (AAALAC). עכברים הטרוזיגוטיים של פרוגרנולין נוצרו ונחצו על רקע C57BL/6J כפי שתואר קודם לכן9. העכברים ששימשו למחקר זה הוצלבו לאחור על רקע C57BL/6J במשך 12 דורות לפחות. עכברים בגילאי 9-16 חודשים שימשו בנתוני הדגימה. זכרים ונקבות שימשו שניהם במחקר זה. העכברים הוחזקו במחזור אור/חושך של 12:12 שעות עם אורות דולקים בשעה 06:00, וכל הבדיקות נערכו במהלך שלב האור. לעכברים ניתנה גישה אד-ליביטום למזון ומים במהלך כל הניסויים. פרטי הריאגנטים והציוד המשמש מפורטים בטבלת החומרים.

1. עיצוב גפרור מבחן משפופרת

  1. תכנן את התאמות בדיקת המבחנה לפני הבדיקה. ודא שאין הערה גנוטיפית כדי לשמור על הנסיין עיוור לקבוצות (ראה טבלה משלימה 1).
    הערה: אנו בדרך כלל בודקים עכברים מול 3 יריבים ייחודיים מקבוצת הניסוי הנגדית 8,9,22,23, אך חלק מהמחקרים מדווחים על בדיקות נגד מתנגדים נוספים 10,11,13.
  2. איזון נגד הקצאת עכברי הניסוי לצד השמאלי והימני של הצינור כדי למנוע השפעות מבלבלות פוטנציאליות של הטיית צד.
  3. בעת בדיקת חברים שאינם כלובים, צמצם את תנועת הכלובים כדי למנוע לחץ על עכברים יותר מהנדרש. כדי למזער את תנועת הכלוב, חפיפה בין אותם שני כלובים ככל האפשר.
  4. בעת בדיקת כלובים, בדוק כל עכבר מכלוב מול כל עכבר אחר בצורה סיבובית. אם חוזרים על הבדיקה במשך מספר ימים, יש להחליף את צד הצינור שהעכבר מוקצה להיכנס אליו (כלומר, שמאל או ימין) מיום ליום.

2. בחירת צינורות

הערה: בדרך כלל, בדיקת הצינור מתבצעת עם צינורות פלסטיק שקופים זמינים מסחרית עשויים PVC (ראה טבלת חומרים). חשוב לציין כי פרוטוקול זה מותאם לעכברים אך ניתן ליישם אותו על מודלים אחרים של מכרסמים כגון חולדות, נברנים ואוגרים2.

  1. חותכים את צינורות ה-PVC לאורך של 30.5 ס"מ. צינורות PVC גמישים מעט ומאוחסנים לרוב בגלילים, כך שייתכן שיהיה צורך ליישר אותם לפני השימוש. חימום קל יעזור ליישר צינורות מעוקלים.
  2. הקוטר הפנימי של הצינור הוא קריטי להצלחת הבדיקה. ודא שהצינור גדול מספיק כדי שהעכברים יוכלו לעבור דרכו, אך לא גדול מספיק כדי לאפשר לעכברים לחצות זה את זה.
    הערה: הבדיקה לא תעבוד אם הצינור גדול מספיק כדי שהעכברים יוכלו לעבור אחד את השני מבלי להשתתף בתחרות דומיננטיות חברתית. להלן הנחיות משוערות לגדלי צינורות מתאימים בעכברי C57BL/6J: (1) קוטר פנימי של 1 אינץ'/2.5 ס"מ (ID) לעכברים זכרים <בני 6 חודשים, עכברים נקבות <9 חודשים; (2) מזהה 1.25 אינץ'/3.2 ס"מ לעכברים זכרים בני 6-9 חודשים, עכברים נקבות >9 חודשים; ו-(3) מזהה 1.5 אינץ'/3.5 ס"מ לעכברים זכרים בני >9 חודשים.
  3. במידת האפשר, השתמש בשפופרת באותו גודל עבור כל הבדיקות בתוך קבוצת עכברים. אם עכברים מצטלבים במהלך המשחקים הראשונים, הפעל את כל המשחקים הבאים עם הצינור הקטן הבא.

3. מיקום הבדיקה

  1. בצע את בדיקת הצינור על כל משטח שטוח ויציב או מכסה מנוע מסונן תחת תאורת סביבה.
    הערה: הבדיקה נעשית בדרך כלל במהלך היום בין השעות 8:00-17:00. במקרים שבהם עכברים נבדקים על פני מספר ימים, יש לבדוק כל עכבר באותה שעה ביום עבור כל בדיקה (למשל, בין 11 בבוקר ל-3 אחר הצהריים). למיטב ידיעתנו, השפעות השעה ביום לא נחקרו בעבר.
  2. בצע את בדיקת המבחנה במקום שקט עם גירויים חיצוניים מינימליים. באופן אידיאלי, החוקר צריך להיות האדם היחיד בחדר.

4. התרגלות

  1. הרגלה היא פרקטיקה חשובה במבחנים התנהגותיים המאפשרת לעכברים להכיר את סביבת הבדיקה, מה שיכול להוביל לתוצאות עקביות ואמינות יותר24. לבדיקת הצינור, התאקלמו העכברים בחדר הבדיקה לפני הבדיקה. אם הבדיקה לא נעשית בחדר המגורים של בעלי החיים, אפשר לעכברים לפחות שעה אחת להתרגל לחדר החדש לפני הבדיקה.
  2. (אופציונלי) אם תרצה, ניתן להרגיל את העכברים לצינור לפני הבדיקה. כדי להתרגל לצינור, הנח את העכבר בצינור ללא יריב ואפשר לו לעבור דרך הצינור 2-3 פעמים, 2-3 ימים לפני הבדיקה. זה לא הנוהג הסטנדרטי שלנו.

5. בדיקת מבחנה רגילה

הערה: (אופציונלי) חוקרים חדשים בבדיקת המבחנה עשויים לרצות לתרגל הנחת עכברים בצינור באמצעות קבוצה נפרדת של עכברים לא ניסיוניים. חוקרים צריכים לעתים קרובות לתרגל הכנסת עכברים לצינור. חוקר מנוסה יגרום פחות לחץ בעכברים שעוברים את הבדיקה. מידע נוסף על הכנסת עכברים לצינור ניתן בשלב 5.3.

  1. הנח את כל הכלובים המכילים עכברים מאותו המין לבדיקה על עגלה. כלובי הובלה לאזור הבדיקות. נקו את הצינורות ואת אזור הבדיקה עם 2% כלורהקסידין ואחריו 70% אתנול. ניתן לנקות את הצינורות בקלות באמצעות פיפטה סרולוגית של 50 מ"ל על ידי דחיפת מגבת נייר דרך הצינור.
  2. הנח את שני הכלובים למשחק הראשון על משטח הבדיקה. הסר את המכסים והניח אותם ליד כל כלוב.
  3. אתר את שני העכברים לבדיקה. החזק עכבר אחד בכל יד, המתאים לצד שהוקצה לו בצינור. לאחר מציאת העכבר הראשון, החזק בעדינות את זנבו ושמור אותו בכלוב תוך כדי חיפוש אחר השני.
    הערה: החזקת זנב העכבר קרוב למרכז אורכו תאפשר לחוקר לשלוט בעדינות בעכבר מבלי לרסן אותו חזק מדי. החזק את העכבר כך שכל ארבע כפותיו יישארו על מצעי הכלוב כדי למנוע לחץ מיותר על העכבר.
  4. הוציאו בו זמנית את שני העכברים מכל כלוב והניחו אותם בעדינות עם ראשיהם בכניסה לצינור.
    הערה: אם העכברים התרגלו או שיש להם ניסיון קודם בבדיקות, הם בדרך כלל נכנסים לצינור תוך מספר שניות. אם העכברים נאיביים לצינור, הם עשויים להסס להיכנס לניסוי הראשון. במידת הצורך, ניתן להעביר את העכברים לצינור הבא בגודלו כדי לעודד כניסת צינור.
  5. שמור על אחיזה בזנב של כל עכבר כדי למנוע מהעכברים ליצור מגע בטרם עת. ודא שהעכברים לא נאלצים להיכנס לצינור. עם זאת, ברגע שהם מתחילים להיכנס לצינור, ניתן לדחוף אותם בעדינות כדי לעודד כניסה מלאה לתוך הצינור.
  6. כאשר שני העכברים נכנסו לצינור, שחררו את הזנבות והתרחקו מהצינור (איור 1A). שני העכברים צריכים להתקדם לתוך הצינור ולהיפגש ליד המרכז (איור 1B).
    1. צפו במשחק ורשמו את המנצח והמפסיד. עכבר נחשב כמי שאיבד את הגפרור כאשר שתיים מכפות רגליו יוצאות מהשפופרת ובאות במגע עם משטח הבדיקה (איור 1C).
      הערה: עכבר אחד בדרך כלל ידחוף את השני מהצינור, אם כי חלק מהעכברים יבצעו נסיגה לא מאולצת לאחר מגע עם העכבר היריב. מדי פעם, שני העכברים נסוגים בו זמנית, או שעכבר אחד נסוג מיד לאחר הכניסה לצינור מבלי ליצור קשר עם העכבר היריב. אם אחד מהאירועים הללו מתרחש, החזירו את שני העכברים לצינור והתחילו מחדש את ההתאמה. העכברים בדרך כלל יבצעו התאמה סטנדרטית יותר בניסיון השני. אם אף אחד מהעכברים לא נסוג תוך 2 דקות, בטל את המשחק והפעל אותו שוב בסוף ההפעלה.
  7. לאחר סיום המשחק, החזירו את העכברים לכלובי הבית שלהם. נקה את הצינור ואת משטח הבדיקה עם 70% אתנול.
  8. המשך להפעיל משחקים באמצעות העיצוב המתואר בשלב 1. כל סיבוב מתחיל מיד לאחר הסיבוב הקודם. לאחר שכל ההתאמות ממין אחד בוצעו, החזירו את הכלובים למתלה/עגלה ובדקו את העכברים מהמין השני באותו הליך.
    1. נקה היטב את משטח הבדיקה והצינורות בין עכברים נקבות וזכרים רצים. לאחר השלמת הבדיקה, נקו גם את הצינורות וגם את אזור הבדיקה עם 2% כלורהקסידין.
  9. לניתוח סטטיסטי, ספרו את מספר הניצחונות עבור כל קבוצה ונתחו באמצעות המבחן הבינומי כדי להשוות את ההתפלגות הנצפית לעומת הצפויה, כאשר ההתפלגות הצפויה נקבעה על 50% ניצחונות לכל קבוצה.
    1. חשב את אחוז הזכייה עבור כל עכבר על-ידי חלוקת מספר הזכיות במספר המשחקים (בדרך כלל שלושה משחקים, אלא אם כן משחק בוטל עקב עכבר חסר או בעיות אחרות). השווה את אחוז הזכייה עבור כל קבוצה באמצעות מבחן מאן-וויטני.
      הערה: אם חוזרים על עצמם, התאמות אלה מניבות תוצאות דומות בהיעדר מניפולציות ניסיוניות נוספות. לדוגמה, מחקר קודם הבחין כי 40 מתוך 47 התאמות הניבו את אותה תוצאה כאשר נערכו בימים8 עוקבים.

6. בדיקת צינור בתוך כלוב להערכת היררכיות דומיננטיות חברתית

הערה: עכברים יוצרים היררכיות דומיננטיות חברתיות יציבות שניתן לחשוף על ידי בדיקת צינור סיבוב של כל העכברים בתוך כלוב 4,6. גם עכברים זכרים וגם נקבות יוצרים את ההיררכיות הללו8. היררכיות דומיננטיות חברתיות מוערכות בצורה הטובה ביותר בכלובים המכילים לפחות 5 עכברים.

  1. תכננו התאמות מראש, עם איזון נגדי כמתואר בשלב 1.
  2. הפעל התאמות בדיקת מבחנה כמתואר בשלב 5. בדוק כלוב אחד בכל פעם ובדוק את כל העכברים בצורה עגולה. נקה את הצינור ואת אזור הבדיקה עם 70% אתנול בין כל משחק.
  3. בדוק כל כלוב פעם ביום למשך 5 ימים לפחות כדי לקבוע את סדרי הדירוג היציבים של כל עכבר.
  4. לניתוח סטטיסטי, הערך את מספר הניצחונות לכל עכבר. דרג כל עכבר לפי מספר הזכיות.

7. שימוש בבדיקת הצינור לבדיקה טיפולית פרה-קלינית

הערה: החוסן והיציבות של פנוטיפים של דומיננטיות חברתית במודלים רבים של עכברים, כמו גם הקלות בביצוע בדיקת השפופרה, הופכים את בדיקת המבחנה לפרדיגמה שימושית לבדיקה פרה-קלינית של אסטרטגיות טיפוליות. לשם כך, ניתן לבצע את בדיקת המבחנה באמצעות עיצוב בתוך החיה, שכן ניתן לבצע את הבדיקה באופן סדרתי. אפשר גם לעשות עיצוב מוצלב עם תרופה, ואז לשלוט או להיפך. בדיקת המבחנה שימשה בעבר להערכת טיפולים מגבירי פרוגרנולין בעכברי Grn+/- 22,23, שהראו כי פנוטיפים של דומיננטיות חברתית הפיכים במודל עכבר זה. להבהרת הדיון להלן, עכברים יתוארו כ"ביקורת" (סוג פראי, לא טרנסגני וכו') או "מודל" (נוקאאוט, טרנסגני וכו'), והתערבויות ניסיוניות יתוארו כ"רכב" או "מטופל" (התערבות טיפולית). בעוד שעכברים מכונים "בקרה" ו"מודל" להלן, אידיאלי להשתמש בחברי המלטה עבור כל אחת מהקבוצות הללו.

  1. לפני התערבות ניסיונית, בצע בדיקה מקדימה כדי לאשר את נוכחותו של פנוטיפ הדומיננטיות החברתית הצפוי בעכברי המודל שישמשו לבדיקה. בדוק את כל מאגר עכברי הביקורת והמודל זה מול זה והשתמש בנתונים אלה כדי להקצות עכברים לקבוצות טיפול כדי להבטיח שהקבוצות מאוזנות בנקודת ההתחלה.
  2. ייתכן שיהיה צורך במשכי טיפול שונים בהתאם לטיפול. לדוגמה, אם התרופה היא AAV, אפשרו לעכברים להתאושש מהניתוח ויש להם זמן עד שהתרופה תיכנס לתוקף. אם התרופה היא מולקולה קטנה, קבע את פרדיגמות הטיפול לפני בדיקת המבחנה22.
  3. הקצה עכברים לקבוצות ניסוי כך שלעכברים שטופלו ולעכברים מכל גנוטיפ יש פנוטיפים של דומיננטיות חברתית ברמה דומה. אם עכברים נבדקים מספר פעמים מול כמה יריבים, אחוז הניצחון של כל עכבר (מתואר בשלב 5.9) יכול לשמש ליצירת שתי קבוצות עם פנוטיפים דומים.
    1. לחלוקה אקראית באמת של עכברים לקבוצות על סמך הנחיות ARRIVE, השתמש בפרוטוקול אקראיות בלוק המבוסס על אחוז הזכייה של כל עכבר8.
  4. לאחר הקצאת הקבוצות, בדוק את העכברים במספר נקודות זמן במהלך הטיפול. לפרטים על השוואות המבוצעות בדרך כלל, עיין בהערה למטה:
    הערה: (1) עכברי בקרת רכב לעומת עכברי דגם רכב (זוהי השוואת בקרה כדי להראות שהטיפול ברכב אינו מטשטש את הפנוטיפ של דגם העכבר); (2) עכברי בקרת רכב לעומת עכברי מודל מטופלים (זה בודק את ההשערה שעכברי המודל המטופלים שונים מקבוצת ביקורת רגילה); (3) עכברי דגם רכב לעומת עכברי מודל מטופלים (זה בודק את ההשערה שהטיפול משנה את הפנוטיפ של מודל העכבר); (4) עכברי בקרת רכב לעומת עכברי ביקורת שטופלו (זוהי השוואת בקרה לקביעת השפעות הטיפול בעכברים ללא פנוטיפ דומיננטיות חברתית).
  5. בדרך כלל, הבדיקה תבוצע במשך יומיים, עם כ-6 התאמות ביום, עם השוואות (1-4) המוזכרות בשלב 7.4. כדי להימנע מבדיקת יתר, הפעל את ההשוואות (1) ו-(2) ביום הראשון, ואת ההשוואות (3) ו-(4) ביום השני. מכיוון שעכברי בקרת הרכב נבדקים מול שתי קבוצות הדגמים ביום הראשון, יש לשלב את ההתאמות של כל השוואה.
  6. לאחר סיום הבדיקה, החזירו את העכברים לכלובים הביתיים שלהם. נקה את הצינור ואת משטח הבדיקה עם 70% אתנול.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

בדיקת הצינור שימשה באופן נרחב במודל עכבר של דמנציה פרונטו-טמפורלית עקב מוטציות פרוגרנולין, Grn+/-  עכברים 8,9,22,23,25. העכברים האלה מפגינים דומיננטיות חברתית נמוכה עד גיל 9 חודשים (איור 2A-D)8. פנוטיפ הדומיננטיות החברתית הנמוכה של ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

מבחן המבחנה לדומיננטיות חברתית מספק בדיקה שמאומצת בקלות ומבוצעת במהירות שהחוקרים עשויים למצוא שימושית כמדד תוצאה ראשוני או כחלק מסוללת מבחני התנהגות במודלים של עכברים. מאמר זה מספק פרוטוקולים בסיסיים לביצוע בדיקת מבחנה בין זרים או בין חברים לכלוב.

החוקרים צריכים להיות מודעים למספר פרמטרים שעשויים להשפיע על התנהגות בדיקת המבחנה. עבור כל הפרמטרים הללו, מומלץ לבצע מחקרי פיילוט כדי לקבוע את השפעותיהם על דגם עכבר מסוים. גם עכברים זכרים וגם נקבות עשויים לבצע את בדיק...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

אריק ד. רוברסון שימש כיועץ ל-AGTC וללילי וקיבל תמלוגים מג'ננטק.

תודות

אנו מודים לג'יימס בלאק ומרים רוברסון על העזרה בגידול עכברים ותחזוקת המושבה, לאנתוני פיליאנו ואלישיה הול על הסיוע במבחני פיילוט לבדיקת צינורות, ולרוברט פארס ג'וניור על אספקת עכברי נוקאאוט של פרוגרנולין. עבודה זו נתמכה על ידי הקונסורציום למחקר FTD ופרויקט Bluefield לריפוי FTD, המכון הלאומי להפרעות נוירולוגיות ושבץ מוחי (R01NS075487, P30NS047466 ו-F32NS090678), והמכון הלאומי להזדקנות (P30AG086401, R00AG056597 ו-K00AG068428). ניסויי התנהגות בוצעו במתקן הליבה להערכת התנהגות בעלי חיים באוניברסיטת אלבמה בברמינגהם.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
תזונה לבעלי חייםEnvigoדיאטת NIH-31 #7917צ'או בעלי חיים
תמיסת כלורהקסידין 2% 1GALפטרסון אספקה וטרינרית בע"מ78924243לניקוי צינורות ומשטח
אתנול 70%ויון ביוסיינססVNEE0069CS/4לניקוי צינורות ומשטח
צינור גדול לעכברים זכרים > 9 חודשיםהום דיפומק"ט לחנות #  10000179421-7/8 אינץ' OD x 1-1/2 אינץ' תעודת זהות x 24 אינץ' צינור ויניל PVC שקוף
צינור בינוני לעכברים זכרים 6– בת 9 חודשים, נקבות עכברים > 9 חודשיםהום דיפומק"ט לחנות #  10000179451-5/8 אינץ'. OD x 1-1/4 אינץ' תעודת זהות x 24 אינץ' צינור ויניל PVC שקוף
צינור קטן לעכברים זכרים < בן 6 חודשים, נקבות עכברים < בן 9 חודשיםהום דיפומק"ט לחנות #  10000179381-3/8 אינץ'. OD x 1 אינץ' תעודת זהות x 24 אינץ' צינור ויניל קלוע PVC שקוף

מקורות

  1. Choi, T. Y., Jeong, S., Koo, J. W. Mesocorticolimbic circuit mechanisms of social dominance behavior. Exp Mol Med. 56 (9), 1889-1899 (2024).
  2. Fulenwider, H. D., Caruso, M. A., Ryabinin, A. E. Manifestations of domination: Assessments of social dominance in rodents. Genes Brain Behav. 21 (3), e12731(2022).
  3. Lindzey, G., Winston, H., Manosevitz, M. Social dominance in inbred mouse strains. Nature. 191, 474-476 (1961).
  4. Fan, Z., et al. Using the tube test to measure social hierarchy in mice. Nat Protoc. 14 (3), 819-831 (2019).
  5. Cum, M., et al. A multiparadigm approach to characterize dominance behaviors in CD1 and c57BL6 male mice. eNeuro. 11 (11), (2024).
  6. Wang, F., et al. Bidirectional control of social hierarchy by synaptic efficacy in medial prefrontal cortex. Science. 334 (6056), 693-697 (2011).
  7. Van De Weerd, H. A., Van Den Broek, F. A., Beynen, A. C. Removal of vibrissae in male mice does not influence social dominance. Behav Processes. 27 (3), 205-208 (1992).
  8. Arrant, A. E., Filiano, A. J., Warmus, B. A., Hall, A. M., Roberson, E. D. Progranulin haploinsufficiency causes biphasic social dominance abnormalities in the tube test. Genes Brain Behav. 15 (6), 588-603 (2016).
  9. Filiano, A. J., et al. Dissociation of frontotemporal dementia-related deficits and neuroinflammation in progranulin haploinsufficient mice. J. Neurosci. 33 (12), 5352-5361 (2013).
  10. Shahbazian, M., et al. Mice with truncated mecp2 recapitulate many Rett syndrome features and display hyperacetylation of histone h3. Neuron. 35 (2), 243-254 (2002).
  11. Spencer, C. M., Alekseyenko, O., Serysheva, E., Yuva-Paylor, L. A., Paylor, R. Altered anxiety-related and social behaviors in the fmr1 knockout mouse model of fragile x syndrome. Genes Brain Behav. 4 (7), 420-430 (2005).
  12. Irie, F., Badie-Mahdavi, H., Yamaguchi, Y. Autism-like socio-communicative deficits and stereotypies in mice lacking heparan sulfate. Proc Natl Acad Sci U S A. 109 (13), 5052-5056 (2012).
  13. Veenstra-Vanderweele, J., et al. Autism gene variant causes hyperserotonemia, serotonin receptor hypersensitivity, social impairment and repetitive behavior. Proc Natl Acad Sci U S A. 109 (14), 5469-5474 (2012).
  14. Jiang-Xie, L. F., et al. Autism-associated gene dlgap2 mutant mice demonstrate exacerbated aggressive behaviors and orbitofrontal cortex deficits. Mol Autism. 5, 32(2014).
  15. Huang, W. H., et al. Early adolescent rai1 reactivation reverses transcriptional and social interaction deficits in a mouse model of smith-magenis syndrome. Proc Natl Acad Sci U S A. 115 (42), 10744-10749 (2018).
  16. Rascovsky, K., et al. Sensitivity of revised diagnostic criteria for the behavioural variant of frontotemporal dementia. Brain. 134 (Pt 9), 2456-2477 (2011).
  17. Zhou, T., et al. History of winning remodels thalamo-PFC circuit to reinforce social dominance. Science. 357 (6347), 162-168 (2017).
  18. Zhou, X., et al. Prosaposin facilitates sortilin-independent lysosomal trafficking of progranulin. J Cell Biol. 210 (6), 991-1002 (2015).
  19. Cook, A. K., et al. Dendritic spine head diameter is reduced in the prefrontal cortex of progranulin haploinsufficient mice. Mol Brain. 17 (1), 33(2024).
  20. Park, M. J., Seo, B. A., Lee, B., Shin, H. S., Kang, M. G. Stress-induced changes in social dominance are scaled by AMPA-type glutamate receptor phosphorylation in the medial prefrontal cortex. Sci Rep. 8 (1), 15008(2018).
  21. Tada, H., et al. Neonatal isolation augments social dominance by altering actin dynamics in the medial prefrontal cortex. Proc Natl Acad Sci U S A. 113 (45), E7097-E7105 (2016).
  22. Arrant, A. E., Filiano, A. J., Unger, D. E., Young, A. H., Roberson, E. D. Restoring neuronal progranulin reverses deficits in a mouse model of frontotemporal dementia. Brain. 140 (5), 1447-1465 (2017).
  23. Kurnellas, M., et al. Latozinemab, a novel progranulin-elevating therapy for frontotemporal dementia. J Transl Med. 21 (1), 387(2023).
  24. Ueno, H., et al. Effects of repetitive gentle handling of male c57bl/6ncrl mice on comparative behavioural test results. Sci Rep. 10 (1), 3509(2020).
  25. Arrant, A. E., Nicholson, A. M., Zhou, X., Rademakers, R., Roberson, E. D. Partial tmem106b reduction does not correct abnormalities due to progranulin haploinsufficiency. Mol Neurodegener. 13 (1), 32(2018).
  26. Chachua, T., et al. Sex-specific behavioral traits in the BRD2 mouse model of juvenile myoclonic epilepsy. Genes Brain Behav. 13 (7), 702-712 (2014).
  27. Lijam, N., et al. Social interaction and sensorimotor gating abnormalities in mice lacking dvl1. Cell. 90 (5), 895-905 (1997).
  28. Nishimura, I., Yang, Y., Lu, B. Par-1 kinase plays an initiator role in a temporally ordered phosphorylation process that confers tau toxicity in drosophila. Cell. 116 (5), 671-682 (2004).
  29. Zhang, C., et al. Dynamics of a disinhibitory prefrontal microcircuit in controlling social competition. Neuron. 110 (3), 516-531.e6 (2022).
  30. Lin, D. Y., Zhang, S. Z., Block, E., Katz, L. C. Encoding social signals in the mouse main olfactory bulb. Nature. 434 (7032), 470-477 (2005).
  31. Matsuo, T., et al. Genetic dissection of pheromone processing reveals main olfactory system-mediated social behaviors in mice. Proc Natl Acad Sci U S A. 112 (3), E311-E320 (2015).
  32. Koh, H. Y., Kim, D., Lee, J., Lee, S., Shin, H. S. Deficits in social behavior and sensorimotor gating in mice lacking phospholipase cbeta1. Genes Brain Behav. 7 (1), 120-128 (2008).
  33. Long, J. M., Laporte, P., Paylor, R., Wynshaw-Boris, A. Expanded characterization of the social interaction abnormalities in mice lacking dvl1. Genes Brain Behav. 3 (1), 51-62 (2004).
  34. Moretti, P., Bouwknecht, J. A., Teague, R., Paylor, R., Zoghbi, H. Y. Abnormalities of social interactions and home-cage behavior in a mouse model of Rett syndrome. Hum Mol Genet. 14 (2), 205-220 (2005).
  35. Nishijima, I., et al. Secretin receptor-deficient mice exhibit impaired synaptic plasticity and social behavior. Hum Mol Genet. 15 (21), 3241-3250 (2006).
  36. Rodriguiz, R. M., Chu, R., Caron, M. G., Wetsel, W. C. Aberrant responses in social interaction of dopamine transporter knockout mice. Behav Brain Res. 148 (1-2), 185-198 (2004).
  37. Greenberg, G. D., Howerton, C. L., Trainor, B. C. Fighting in the home cage: Agonistic encounters and effects on neurobiological markers within the social decision-making network of house mice (mus musculus. Neurosci Lett. 566, 151-155 (2014).
  38. Benton, D., Dalrymple-Alford,, John, C., Brain, P. F. Comparisons of measures of dominance in the laboratory mouse. Anim Behav. 28, 1274-1279 (1980).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

Progranulin
הערכת דומיננטיות חברתית במודלים של עכברים באמצעות מבחן המבחנה
צור קשר
המלצה לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

2026 © זכויות יוצרים MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.