הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

ב Ovo Xenografting של תאי לוקמיה לימפובלסטית חריפה (ALL) שמקורם בחולה (PDX-ALL)

937 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/68290

⸱

1 באוגוסט 2025

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Biochemistry & Molecular Biology, Arnie Charbonneau Cancer and Alberta Children's Hospital Research Institutes, University of Calgary, 2Department of Cell Biology & Anatomy, Arnie Charbonneau Cancer and Alberta Children's Hospital Research Institutes, University of Calgary, 3Department of Medicine, Oncology, and Microbiology/Immunology/Infectious Diseases, Arnie Charbonneau Cancer and Alberta Children's Hospital Research Institutes, University of Calgary, 4Department of Biochemistry & Molecular Biology and Oncology, Arnie Charbonneau Cancer and Alberta Children's Hospital Research Institutes, University of Calgary, 5Cogno-Mechatronics Engineering, Pusan National University

במאמר זה

סיכום

פרוטוקול זה מתאר השתלת ביצית של תאי לוקמיה לימפובלסטית חריפה B ו-T (ALL) שמקורם בחולה, המתרחשת 4 ימים לאחר ההזרקה.

תקציר

מחקר זה מציג שיטה מהירה, חסכונית ויעילה להשתלת ביציות של תאי לוקמיה לימפובלסטית חריפה (ALL) שמקורם בחולה , המקיפה שושלות של תאי B ותאי T. באמצעות עוברי תרנגולות מופרות, הזרקנו תאי B-ALL ו-T-ALL שמקורם בחולה לתוך כלי הדם של העוברים 11 ימים לאחר ההפריה (11dpf). למרבה הפלא, ארבעה ימים לאחר ההזרקה, תאי הלוקמיה האנושיים המושתלים הפגינו הישרדות משמעותית, התפשטות וקולוניזציה של כלי הדם בתוך עובר התרנגולת המתפתח. ב-15dpf, זיהינו עלייה ניכרת בתאי CD10/CD19+ B-ALL ו-CD4/CD8+ T-ALL בדגימות דם מכלי הדם של העובר, מה שאישר את ההשתלה המוצלחת. מערכת זו מאפשרת הערכה יעילה וניתנת לשחזור של התנהגות תאי לוקמיה באורגניזם חי ללא העלויות הניכרות והאילוצים האתיים הקשורים למודלים אחרים של בעלי חיים. גישה מהירה זו מספקת פלטפורמה in vivo בעלת תפוקה גבוהה ורלוונטית ביולוגית להערכת תרכובות טיפוליות פוטנציאליות. מערכת ה-xenograft שמקורה בחולה ביצית (PDX)-ALL המוצגת כאן מציעה כלי מבטיח לסינון תרופות פרה-קליניות, מחקרים מכניסטיים ופוטנציאל לגישות רפואה מותאמת אישית בחקר לוקמיה.

מבוא

הממברנה הכוריואלנטואית של הגוזל (CAM), מתחילה להתגבש ביום 7 לאחר ההפריה לאחר הדגירה, ומסתיימת ביום ה-12. ה-CAM מחזיק באור הזרקורים כמודל in vivo מתאים לאנגיוגנזה1 והשתלת תאים סרטניים 2,3,4,5,6,7,8,9,10, במיוחד תאי סרטן הקשורים לדם 11מכיוון שהוא חסר חיסון מטבעו ויש לו כלי דם מפותחים היטב., יתר על כן, ה-CAM היא גם מערכת רצויה לחקירת פלישת גידול וגרורות מכיוון שהיא נושאת מספר חלבוני מטריצה חוץ-תאיים, כולל קולגן, אינטגרין αVβ3, פיברונקטין, למינין ומטריקס מטאלופרוטאינאז-2 (MMP-2)10.

לוקמיה לימפובלסטית חריפה (ALL) היא סרטן של מח העצם והדם המאופיין בעלייה מהירה של לימפוציטים B ו-T לא בשלים. זהו סרטן הילדים הנפוץ ביותר והגורם העיקרי למוות מסרטן בקרב ילדים. ALL ניתן לריפוי ב->85% מהילדים שנפגעו, אך למבוגרים ותינוקות יש שיעורי ריפוי נמוכים משמעותית, ול-ALL הישנות/עמידות יש הישרדות של 5 שנים של <10%12. לפיכך, יש צורך בדחיפות בפיתוח אסטרטגיות טיפול חדשות למניעה או עצירה של ALL הישנות או עמידות. למרות שפותחו מספר מודלים של קסנוגרפטים, כגון עכבר וחולדה13, שיטות אלה גוזלות זמן (למשל, חודשים) ויקרות, ודורשות תקנות אתיות מקיפות כדי לענות על צורך קליני שלא נענה לטיפול חדשני ב-ALL, פיתוח מודל בעלי חיים הניתן לשחזור, חסכוני בזמן ובעלות המתאים להרחבת עבודת מבחנה בסיסית הוא הכרחי.

במחקר זה, אנו מדווחים על הקמה מוצלחת של פרוטוקול xenografting בביצית המייצר באופן אמין קולוניזציה תלת מימדית של כלי דם של תאי B- ו-T-ALL של המטופלים, אשר עשוי לשמש לתכנון טיפול חדשני שיכול לעצור את התקדמות ALL ולפיתוח כלי חיזוי לתוצאות הטיפול והסיכונים של ALL.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

הניסויים בוצעו על סמך הפרוטוקול שאושר על ידי ועדת האתיקה באוניברסיטת קלגרי (REB15-1143; שם התקבלה הסכמה מדעת מכל הנבדקים) ומועצת האתיקה של מחקר הבריאות של ועדת הסרטן של אלברטה (HREBA). CC-17-0108_REN8). חולים עם ALL בעת האבחנה (לפני תחילת טיפול כלשהו), שהיו להם בלסטים במחזור (בלסטים לא רק במח אלא גם בדם), נכללו במחקר. הריאגנטים והציוד המשמש מפורטים בטבלת החומרים.

1. דגירה של ביצים

  1. רכשו ביצי עוף מופרות. השג ~10% יותר ביציות מהנדרש כדי לקחת בחשבון את מספר הביציות שנפגעו במהלך המשלוח או הליך הפיצוח.
  2. אחסן את הביצים המופרות עד שבועיים בטמפרטורה של 12 מעלות צלזיוס מבלי לאבד את החיוניות.
  3. מעבירים את הביצים לאינקובטור גלגול לח (~50%-60%) בטמפרטורה של 39 מעלות צלזיוס.
  4. דגרו את הביצים בחממה למשך 10dpf. שימו לב שהיום הראשון מתחיל כאשר הביצים מועברות לחממה.

2. בידוד תאי לוקמיה לימפובלסטית חריפה מדגימות דם מחולים עם ALL

  1. בודד את התאים כמתואר קודם לכן14,15.
  2. אסוף 10 מ"ל של דם היקפי (או מח) מחולי B- ו-T-ALL לתוך מבחנות הפרין.
  3. העבירו את דגימות הדם לתוך צינור צנטריפוגה סטרילי של 50 מ"ל ודללו שלוש פעמים עם 2 נפחים של 1x מי מלח עם חוצץ פוספט (PBS) המכילים 137 מ"מ של NaCl, 2.7 מ"מ של KCl, 10 מ"מ של Na2HPO4 ו-1.8 מ"מ של KH2PO4.
  4. שכב נפח 1 של דגימות הדם המדוללות על נפח אחד של מדיום שיפוע צפיפות וצנטריפוגה בטמפרטורת החדר ללא בלם ב-300 x גרם למשך 30 דקות.
  5. אסוף את שכבת המעיל של תאים חד-גרעיניים (MNCs) מהממשק והעביר אותה לצינור סטרילי חדש של 15 מ"ל באמצעות פיפטה סטרילית.
  6. הוסף 10 מ"ל של 1x PBS וצנטריפוגה ב-300 x גרם למשך 5 דקות כדי להסיר את כל רכיבי הסרום שנותרו (חזור על שלב זה פעמיים).
  7. הוסף 2 מ"ל של 0.8% NH4Cl לכדור התא, מערבול בעדינות, דוגר בטמפרטורת החדר למשך 5 דקות וסובב ב-300 x גרם למשך 5 דקות כדי ליזק כדוריות דם אדומות (במידת הצורך, חזור על שלב זה).
  8. שטפו את התאים ב-1x PBS כמתואר בשלב 2.6.
  9. השעו מחדש את התאים ב-RPMI 1640 המכילים 10% FBS וספרו את מספר התאים באמצעות המוציטומטר.
  10. הערכת כדאיות התא באמצעות בדיקת Trypan Blue Exclusion.
  11. השעו מחדש את התאים במדיום ההקפאה (10% DMSO ב-FBS), הקפיאו אותם בטמפרטורה של -80 מעלות צלזיוס ואחסנו אותם בחנקן נוזלי.

3. הגברה של 2 דוררביעי - לנטי-וירוס חסר יכולת הנושא mCherry

  1. זרעים HEK293T תאי כליה עובריים אנושיים במפגש של ~60%-70% לצלחת של 6 בארות המכילה DMEM בתוספת 10% FBS ו-1% פניצילין-סטרפטומיצין ב-37 מעלות צלזיוס באינקובטור לח עם 5% CO2.
  2. קוטרנספקט את התאים (1.5 x 106) עם העברת FUW-Luc-mCherry-puro, אריזת pCMVΔr8.91 ווקטורי מעטפת pVSV-G ביחס של 3:2:1 באמצעות Lipofectamine 3000 למשך יומיים.
  3. קצרו את הסופרנטנט המכיל lentivirus וסננו דרך מסנן של 0.45 מיקרומטר.
  4. העבירו את הסופרנטנט הנגיפי שנוקה לצינורות צנטריפוגה, צנטריפוגה ב-20,000 x גרם למשך שעתיים ב-4 מעלות צלזיוס, השליכו את הסופרנטנט והשעו מחדש את הגלולה ב-100 מיקרוליטר של PBS או מדיום נטול סרום.
  5. מדוד את ריבוי ההדבקה (MOI) באמצעות ערכת טיטר qPCR Lentivirus.

4. תיוג של כל קווי התאים הגדלים ברציפות ותאי ALL שמקורם בחולה עם mCherry

  1. לוח1 x 106 תאים/מ"ל של B-(SEM) ו-T-ALL (MOLT3)16,17 קווי תאים ותאי B- או T-ALL שמקורם בחולה בצלחות של 6 בארות המכילות RPMI 1640 + 10% FBS.
  2. יש להדביק את התאים ב-300 מיקרוליטר של תכשיר לנטי-ויראלי עם טיטר ויראלי של 3.47 x 106 IU/mL כדי לקבל MOI של 1 עבור 1 x 106 תאים, לערבב בעדינות ולדגור ב-37 מעלות צלזיוס עם 5% CO2 למשך יומיים.
  3. הוסף 1 מיקרוגרם/מ"ל פורומיצין למדיום התרבית כדי לבחור תאים שעברו התמרה יציבה למשך יומיים.
  4. דמיין תאים עם תווית mCherry עם מיקרוסקופ פלואורסצנטי.

5. השתלת ביצית xeno

  1. ביום ה-10 (ראה לעיל סעיף דגירה של ביצים), בדוק את כלי הדם של עוברי הגוזלים באור כדי להעריך את כדאיות העוברים. לאחר מכן, שטפו ביצים בעדינות עם 70% אתנול כדי לעקר את פני השטח.
  2. קדחו לתוך תא האוויר של הביצים כדי ליצור חלון קטן (בקוטר ~2.0 ס"מ) באמצעות מקדחה ידנית.
  3. אוטמים עם סרט דבק שקוף ומחזירים לחממה של 5% CO2 .
  4. ביום ה-11, יש להזריק 1 x 107 מ"מ תאי ALL המסומנים בדובדבן לכלי הדם של העוברים המתפתחים באמצעות מחטים של 34 גרם. שימו לב שהתברר שקשה לאשר אם כל התאים הוזרקו למיקומים זהים על פני עוברים שונים מכיוון שפתיחת החלון באותם מיקומים אינה מובטחת.
  5. אטמו את החלונות עם סרט דבק שקוף, החזירו לאינקובטור 5% CO2 ועקבו אחר כדאיות העובר מדי יום.
  6. ביום ה-15, נתחו כלי דם מעוברים, הניחו אותם על שקופיות זכוכית וצלמו קסנוגרפים מוצלחים באמצעות מיקרוסקופ ניתוח המצויד ביכולות פלואורסצנטיות.
    הערה: מעבר ל-15dpf (מכיוון שנוצות מכסות את כל הגוף, והחלבון כמעט נעלם), יש לבצע אימונוהיסטוכימיה כדי להעריך את השינויים בהתפשטות ובקולוניזציה של כל התאים בכלי הדם של עובר הגוזל.

6. ציטומטריית זרימה

  1. ביום ה-15, אספו דם מכלי הדם של עובר התרנגולת באמצעות מזרק סטרילי עם מחט של 32 גרם, העבירו אותו לצינור סטרילי של 1.5 מ"ל המכיל הפרין, וצנטריפוגה ב-226 x גרם למשך 10 דקות ב-4 מעלות צלזיוס.
  2. הסר את הסופרנטנט (פלזמה) והשהה מחדש את כדור התא ב-1x PBS המכיל 1% BSA (אלבומין בסרום בקר).
  3. בצע את שלב 2.7 ושלב 2.8 כדי ליז כדוריות דם אדומות.
  4. סמן תאי B-ALL עם נוגדנים אנושיים של FITC-CD10 ונוגדני PE-CD19 אנושיים, ותאי T-ALL עם נוגדנים אנושיים של FITC-CD4 ונוגדני PE-CD8 אנושיים, בהתאמה, בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס בחושך למשך 30 דקות.
  5. שטפו את התאים המסומנים פעמיים עם PBS המכיל 1% BSA, צנטריפוגה ב-226 x גרם למשך 5 דקות ב-4 מעלות צלזיוס, השעו מחדש ב-1x PBS ונתחו על ידי ציטומטריית זרימה.
  6. הגדר את מתחי הפיזור קדימה (FSC) ופיזור הצד (SSC) ב-400 וולט ו-360 וולט, בהתאמה. כוונן את רווחי הגלאי עבור ערוצי FITC ו-PE ל-450-500 וולט ו-400-450 וולט, בהתאמה.
    הערה: אסטרטגיית שער: (א) שער פיזור אור (FSC לעומת SSC): השתמש ב-FSC-A לעומת SSC-A לזיהוי אוכלוסייה עם פיזור ביניים קדימה (גודל) ופיזור צד נמוך (גרעיניות), המתאים לאזור הלימפובלסט. שימו לב ששלב זה מסייע לא לכלול פסולת ותאים גרגירים יותר כגון מונוציטים או גרנולוציטים; (ב) בחירת סינגל (FSC-H לעומת FSC-A): בצע אפליה כפולה על ידי שער על FSC-H לעומת FSC-A, מה שמבטיח שרק אירועים של תא בודד מנותחים18.
  7. כמת תאי CD10/CD19+ B-ALL ו-CD4/CD8+ T-ALL על ידי ספירת אירועים ברבע 2 (Q2; FITC/PE+) של FITC לעומת חלקות PE18. הווה פירושו ± SEM של שלושה ניסויים בלתי תלויים (n = 3).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

כדי לקבוע אם ההשתלה של תאי ALL אנושיים בעוברי עוף מתפתחים הייתה מוצלחת, הוגברו הדורהשני של lentivirus הנושא mCherry והשתמשו בהם כדי לסמן קווי תאים B- ו-T-ALL, SEM ו-MOLT3 16,17, בהתאמה. כפי שמוצג באיור 1A, ~50% מהתאים B-(שני הפאנלים השמאליים העליונים) ו-T-(שני הפאנלים הימניים העליונים) סומנו ב-mCherry. לאחר מכן, תאי B-(#1 ו-#2) ו-T-(#3 ו-#4) שמקורם במטופל סומנו גם הם ב-mCherry (איור 1A, ארבעה ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

זוהו שלושה שלבים קריטיים במהלךההשתלה בביצית כדי למנוע זיהום מיקרוביאלי ולמקסם את ההישרדות של עוברי תרנגולות: כלומר, (1) עיקור פני קליפת הביצה עם 70% אתנול לפני יצירת החלון ו-(2) איטום הדוק של חלון קליפת הביצה עם צלוטייפ כדי למנוע אידוי של תוכן עובר התרנגולת במהלך הדגירה, ו-(3) שימוש במחט העדינה (למשל, 34 גרם) והזרקת כל התאים בנפח מינימלי (למשל, 100 מיקרוליטר) כדי להבטיח אספקה תקינה של כלי הדם ולמזער הפרעה מכנית. ניתוחי פתרון הבעיות שלנו גילו כי 1 x 107 תאי ALL המסומנ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים שאין אינטרסים פיננסיים מתחרים.

תודות

אנו מודים לד"ר אנדרו קונג מאוניברסיטת קולומביה על מתן FUW-Luc-mCherry-puro. עבודה זו נתמכה על ידי מענקים מ-CIHR (PJT-174983) ל-KYL ומקרן המחקר הלאומית של קוריאה (NRF; RS-2023-00284121) ל-KYL ו-M-YJ.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
34 גרם מחטיםBD פריסייף
Attune NxT זרימה ציטומטרתרמו פישר
מזרק BD Perisafe (32 גרם)BD פריסייף
אלבומין סרום בקר (BSA)מיליפור סיגמאא9647
מדיום הקפאת תאיםגיבקו, תרמו-פישר סיינטיפיק12648010
צנטריפוגה (צנטריפוגה Allegra X-22R)בקמן קולטר 
כפפות חד פעמיותכפפות בחינת ניטריל Royal Touch300
ניתוח מיקרוסקופלייקה MZ16FA
DMEMגיבקו, תרמו-פישר סיינטיפיק11965092
DMSOInvitrogen, ThermoFisher ScientificD12345
אינקובטור ביצים, חממת גלגול Vevitts 120ויקסט טריידינג ושות'
אלכוהול אתילי (95%)VWR בינלאומיBDH1158-4LP
סרום בקר עוברי (FBS)גיבקו, תרמו-פישר סיינטיפיק26140079
תמיסת פיקול (פיקול?? פאקה פלוס)מיליפורסיגמאGE17-1440-02
נוגדן FITC-CD10סנטה קרוז ביוטקSC-46656 FITC
נוגדן FITC-CD4סנטה קרוז ביוטקSC-19641 FITC
מיקרוסקופ פלואורסצנטי לייקה מיקרוסיסטמס
מקדחה ידנית (Dremel3000)בוש
HEK293T ATCC, VA, ארצות הבריתCRL-3216
המוציטומטרVWR בינלאומי, Hausser Scientific15170-263
מלח נתרן הפרין מרירית מעי חזירמיליפור סיגמאH3149
מבחנות Heparinizedשואב BD ת"ד 366480
ליפופקטמין 3000Invitrogen, ThermoFisher ScientificL3000008
ערכת טיטר לנטיווירוס מולטיפלקס (ערכת טיטר qPCR Lentivirus)אבםLV900
NH4Cl (אמוניום chloride_מיליפור סיגמאא9434
מיקרוסקופ הפוך אולימפוס IX71אולימפוס
נוגדן PE-CD19סנטה קרוז ביוטקSC-19650 PE
נוגדן PE-CD8סנטה קרוז ביוטקSC-1177 PE
פניצילין-סטרפטומיצין (10,000 יח'/מ"ל) גיבקו, תרמו-פישר סיינטיפיק15140122
מי מלח חומציים פוספט (PBS)סיגמאעמ' 3813
פיפטות (נפח מתכוונן)אפנדורף
פורומיציןגיבקו, תרמו-פישר סיינטיפיקA1113803
RPMI 1640גיבקו, תרמו-פישר סיינטיפיק11875093
סקוטייפ סלוטייפ3 דקות
צלחות סטריליות עם 6 בארותחוות דעת על VWR international , קורנינג22250-140
צינורות צנטריפוגה סטרילייםAxygen Inc, קורנינגAXYMCT-150-C-S
צלוחיות תרבית סטריליות (75T)VWR בינלאומי10062-872
צינורות בז סטריליים (15 מ"ל)סרשטדט62.554.502
צינורות בז סטריליים (50 מ"ל)סרשטדט62.547.254
מסנן סטרילי (0.45 ומיקרו; מסנן m)VWR בינלאומי76778-974
מלקחיים סטרילייםVWR בינלאומי82027-404
מגלשות זכוכית סטריליותVWR בינלאומי48300-031
קצות פיפטה סטריליותVWR בינלאומי76322-136, 76322-134, 76322-154
מזרקים סטרילייםמזרק BD309628?
טריפאן כחולInvitrogen, ThermoFisher ScientificT10282

מקורות

  1. Folkman, J. What is the evidence that tumors are angiogenesis dependent. J Natl Cancer Inst. 82 (1), 4-6 (1990).
  2. Hagedorn, M., et al. Accessing key steps of human tumor progression in vivo by using an avian embryo model. Proc Natl Acad Sci U S A. 102 (5), 1643-1648 (2005).
  3. Dumartin, L., et al. Netrin-1 mediates early events in pancreatic adenocarcinoma progression, acting on tumor and endothelial cells. Gastroenterology. 138 (5), 1595-1606 (2010).
  4. Aguirre-Ghiso, J. A., Estrada, Y., Liu, D., Ossowski, L. ERK activity as a determinant of tumor growth and dormancy: Regulation by p38. Cancer Res. 63 (7), 1684-1695 (2003).
  5. Baroni, T. E., et al. Ribonomic and short hairpin RNA gene silencing methods to explore functional gene programs associated with tumor growth arrest. Methods Mol Biol. 383, 227-244 (2007).
  6. Lopez-Rivera, E., et al. Inducible nitric oxide synthase drives mTOR pathway activation and proliferation of human melanoma by reversible nitrosylation of TSC2. Cancer Res. 74 (4), 1067-1078 (2014).
  7. Balke, M., et al. A short-term in vivo model for giant cell tumor of bone. BMC Cancer. 11, 241(2011).
  8. Balke, M., et al. Morphologic characterization of osteosarcoma growth on the chick chorioallantoic membrane. BMC Res Notes. 3, 58(2010).
  9. Sys, G. M. L., et al. The CAM-assay as a xenograft model for sarcoma. J Vis Exp. (77), e50522(2013).
  10. Li, M., et al. The Chick Chorioallantoic Membrane (CAM) assay as an efficient xenograft model of hepatocellular carcinoma. J Vis Exp. (104), e52411(2015).
  11. Pontel, L. B., et al. Acute lymphoblastic leukemia necessitates GSH-dependent ferroptosis defenses to overcome FSP1-epigenetic silencing. Redox Biol. 102408, (2022).
  12. Oriol, A., et al. Outcome after relapse of acute lymphoblastic leukemia in adult patients included in four consecutive risk-adapted trials by the PETHEMA Study Group. Haematologica. 95 (4), 589-596 (2010).
  13. Xin, Q., Chen, Z., Wei, W., Wu, Y. Animal models of acute lymphoblastic leukemia: Recapitulating the human disease to evaluate drug efficacy and discover therapeutic targets. Biochem Pharmacol. 198, 114970(2022).
  14. Gilmore, M. J., Prentice, H. G., Blacklock, H. A., Janossy, G., Hoffbrand, A. V. A technique for rapid isolation of bone marrow mononuclear cells using Ficoll-Metrizoate and the IBM 2991 blood cell processor. Br J Haematol. 50 (4), 619-626 (1982).
  15. Boyer, T., et al. Flow cytometry to estimate leukemia stem cells in primary acute myeloid leukemia and in patient-derived xenografts, at diagnosis and follow-up. J Vis Exp. (133), e56976(2018).
  16. Kang, S. M., et al. Genome-wide loss-of-function genetic screening identifies opioid receptor mu1 as a key regulator of L-asparaginase resistance in pediatric acute lymphoblastic leukemia. Oncogene. 36 (42), 5910-5913 (2017).
  17. Lee, J. K., et al. HAP1 loss confers L-asparaginase resistance in ALL by downregulating the calpain-1-Bid-caspase-3/12 pathway. Blood. 133 (20), 2222-2232 (2019).
  18. Kalina, T., et al. EuroFlow standardization of flow cytometer instrument settings and immunophenotyping protocols. Leukemia. 26 (9), 1986-2010 (2012).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

גלה מאמרים נוספים

קסנוגרפט ממקור חולהמודל עובר עוףתאי B-ALLתאי T-ALLציטומטריית זרימהמיקרוסקופיה פלואורסצנטיתסריקת תרופות פרה-קליניתהשתבנות של תאי לוקמיה
ב Ovo Xenografting של תאי לוקמיה לימפובלסטית חריפה (ALL) שמקורם בחולה (PDX-ALL)
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.