הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

נוהל קציר סופי של מודל בעל חיים גדול של איסכמיה כרונית של שריר הלב עם אפיון המודינמי וניתוח זלוף

495 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/68545

⸱

22 באוגוסט 2025

 ,  ,  ,  , 
1Department of Surgery, Division of Cardiothoracic Surgery, Warren Alpert Medical School, Brown University, 2Cardiovascular Research Center, Rhode Island Hospital

במאמר זה

סיכום

הפרוטוקול הכירורגי הבא מייצג את ההליך השני והאחרון לאפיון יסודי ומהימן של תפקוד הלב וזלוף שריר הלב לאחר אינדוקציה מוצלחת של איסכמיה כרונית של שריר הלב במודל חזירים במאמץ לחקור טיפולים חדשים.

תקציר

שחזור ושלמות מחקר הם עקרונות יסוד לתגליות מדעיות, המיוצרים תוך שימוש בעקרונות ופרוטוקולים מבוססים ומוכחים. יתר על כן, עם השכיחות והעומס ההולכים וגדלים שמחלות לב וכלי דם (CVD) מטילות על יחידים ועל החברה בכללותה, חיוני לטפח מודל חזק ומתוקף לחקירה. הקבוצה שלנו משתמשת בפרוטוקול של שני ניתוחים במודל חזירים ששוכלל בהדרגה במהלך עשרים השנים האחרונות, שבו אנו גורמים לראשונה לאיסכמיה כרונית של שריר הלב על ידי מיקום מכווץ אמרואיד המחקה את הפתופיזיולוגיה של מחלת עורקים כליליים (CAD) בבני אדם. ההליך השני והסופני הוא אוסף מקיף ומתחשב של פרמטרים המודינמיים לבביים כמו גם זלוף כלילי אזורי, ואחריו המתת חסד של לב פועם וחתך מפורט של הלב. המעבדה שלנו משתמשת במיקרוספירות המסומנות באיזוטופים כדי לנתח את זרימת הדם של שריר הלב לאזור האיסכמי כשיטה רבת עוצמה לכימות בטחונות עקב חומרים טיפוליים ניסיוניים. יתר על כן, וככל הנראה התוצאה הקרדיווסקולרית החשובה ביותר הניתנת למדידה, אנו משתמשים בצנתור לולאת לחץ-נפח (PV) של החדר השמאלי כדי למדוד מגוון רחב של פרמטרים המודינמיים. אנו מקווים שעל ידי פירוט הניתוח הלבבי המקיף של מודל החזירים שלנו לאיסכמיה כרונית של שריר הלב, חוקרים אחרים יוכלו לשפר ולטפח פרוטוקולים וחקירה טיפולית משלהם לחיסול מחלות לב וכלי דם.

מבוא

בארצות הברית, כמעט מחצית מהאנשים סובלים לפחות ממרכיב אחד של מחלות לב וכלי דם, המורכב מקבוצה גדולה של מצבי מחלה של הלב וכלי הדם1. עד שנת 2060, צפוי כי השכיחות של אבחנות מרובות הכוללות מחלות לב וכלי דם תגדל באופן משמעותי בהשוואה לשנת 2025. לדוגמה, אוטם שריר הלב צפוי לעלות ב-30%, מחלת לב איסכמית (IHD) ב-31.3% ואי ספיקת לב ב-33%2. נתונים מדהימים אלה מדאיגים עוד יותר כאשר לוקחים אותם עם תחזיות דומות של גורמי סיכון קרדיווסקולריים, שבהם מספר האנשים עם סוכרת מוערך בעלייה של 39.3%, דיסליפידמיה ב-27.5% ויתר לחץ דם ב-27.2%2. בסך הכל, זה מדגיש את הצורך המיידי במודלים מחקריים אמינים וניתנים לשחזור כדי לחקור ביעילות טיפולים חדשניים למחלות לב וכלי דם וגורמי הסיכון שלו. הדגמנו את המודל האנלוגי הפיזיולוגי שלנו של CAD בחזירים3. השימוש בחזירים מסייע לממש את התוקף של מודל המחקר שלנו בייצוג מדויק של המצב האנושי של CAD, שבו מחקרים פרה-קליניים ספגו בעבר ביקורת על יכולת התרגום. לחזירים יש אנטומיה כלילית, פיזיולוגיה של הלב ופרוטאום ומטבוליזם של שריר הלב דומים לבני אדם4. יתר על כן, מרכיב מכריע במודל שלנו הוא להסביר במדויק את התוצאות הפיזיולוגיות, שריר הלב והמולקולריות הבאות עקב הטיפולים המחקריים.

בדרך כלל, ניסויים קליניים משמשים ליישום טיפולים רפואיים או כירורגיים חדשים כדי לחקור תוצאות קרדיווסקולריות מועילות, אשר מתגלות אך ורק באמצעות תצפית. זה ניכר בניסויים פורצי דרך של מספר תרופות אנטי סוכרתיות חדשות החוקרים את השפעתן הקרדיווסקולרית. לדוגמה, בניסוי מבוקר אקראי SUSTAIN-6, חולים עם סוכרת מסוג 2 שטופלו בסמגלוטיד, אגוניסט פפטיד-1 דמוי גלוקגון (GLP-1), נמצאו עם שיעורים נמוכים יותר של תופעות לוואי קרדיווסקולריות משמעותיות בהשוואה לפלצבו5. תצפיות דומות נצפו במחקר RCT אחר שחקר את sotagliflozin, מעכב קוטרנספורטר כפול של נתרן-גלוקוז 1 ו-2 (SGLT-1 ו-SGLT-2), המראה הפחתה של אירועים קרדיווסקולריים שליליים משמעותיים בחולים עם סוכרת מסוג 2, מחלת כליות כרונית וגורמי סיכון קרדיווסקולריים נוספים6. ממצאים אלה היו מכריעים בהרחבת אישור ה-FDA לטיפולים כאלה כדי להפחית את השכיחות של גורמי סיכון ומחלות לב וכלי דם. עם זאת, מגבלה עיקרית לממצאים תצפיתיים אלה היא חוסר הבנה של המנגנונים שבאמצעותם טיפולים חדשים אלה מנציחים השפעות כאלה. זה מדגים את חשיבות המודל שלנו בגילוי המדעי של הגורמים המכאניסטיים הבסיסיים לטיפולים חדשים למחלות לב וכלי דם.

על ידי שימוש במודל של בעלי חיים גדולים, אנו מסוגלים לאפיין באופן פולשני את השינויים המקרוסקופיים בתפקוד הלב ובזלוף שריר הלב, כמו גם להבין באופן מקיף את השינויים המולקולריים המיקרוסקופיים בתגובה לטיפולים ניסיוניים. אנו משתמשים בצנתור לולאה PV כדי לקבוע שינויים בתפקוד הלב. השימוש בלולאות PV הוא תקן הזהב לקביעה פולשנית של תפקוד החדרים במהלך סיסטולה ודיאסטולה ומשמש אמת מידה להשוואת טכניקות הדמיה לא פולשניות, כגון אקו לב או MRIלב 7. טכניקה זו מאפשרת לנו לבצע מספר מדידות כדי לקבוע כל משתנה המודינמי ולמקם מחדש את הצנתר בזמן אמת כדי להבטיח רכישת נתונים הניתנים לשחזור. כלומר, השימוש בטכניקה זו מוגבל בחוסר היכולת לאסוף נתונים אורכיים, כגון תפקוד לב בסיסי, תפקוד לב בהופעה איסכמית ובמהלך הטיפול. אנו מרגישים שזה מתקזז על ידי היכולת למדוד מדדים בלתי תלויים בעומס, ולהשיג את המצב התפקודי הפנימי של הלב. יתר על כן, השימוש בהזרקות מיקרוספרה עם תווית איזוטופית לאחר מיפוי הטריטוריה האיסכמית ביותר מסייע בזיהוי כל תועלת איסכמית של חומר טיפולי. זריקות מיקרוספרה הוכחו זה מכבר כייצוג מדויק של שינויים בזרימת הדם האזורית של שריר הלב8.

המעבדה שלנו משתמשת באופן עקבי במיקרוספירות בקוטר של 15 מיקרומטר ובריכוז של 2.5 מיליון מיקרוספירות למ"ל. קוטר זה מבטיח את המדידה המדויקת ביותר של זרימת הדם בשריר הלב, כפי שאושר על ידי מחקר קודם שהראה כי המיקרוספירות התפלגו כראוי בהתאם לזרימת הדם, והקוטר הקטן יותר הראה את השונות הנמוכה ביותר בהתפלגות בין שכבות החדר השמאלי9. בנוסף, יש צורך בכמות מינימלית של קליטה של מיקרוספירות כדי להבטיח תוצאות אמינות, אשר מיוצרות בקלות בריכוזים כה גבוהים המשמשים במעבדה שלנו. יחד, הטכניקות המופעלות במהלך הקציר הסופי מנתחות באופן עקבי וקפדני שינויים פיזיולוגיים מרכזיים בלב לאחר מספר טיפולים ניסיוניים. אפיון זה מחוזק עוד יותר על ידי היכולת לאסוף רקמת שריר הלב ולנתח ביסודיות שינויים אזוריים בטכנולוגיות מתקדמות, כגון מחקרים מולטיומיים, המספקים אפיון כמותי חזק בכל שכבה של הדוגמה המרכזית בתוך שריר הלב.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

ההליך הכירורגי הבא אושר על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים של בית החולים רוד איילנד ואוניברסיטת בראון (פרוטוקול #23-08-0005).

1. מודל בעלי חיים

  1. בחר חזירי יורקשייר שעברו בעבר מיקום של מכווץ אמרואיד סביב העורק הכלילי השמאלי הפרוקסימלי (LCx), ובכך לגרום לאיסכמיה כרונית של שריר הלב, וטיפול לאחר מכן בחומר טיפולי ניסיוני. שמור ~7 שבועות בין הניתוח הראשון למיקום אמרואיד לבין הקציר הסופי שלאחר מכן. אפשר שבועיים לסגירת האמרואיד וודא שהחזירים יעברו טיפול ניסיוני לאחר מכן. ודא שהחזירים בני ~18 שבועות ומשקלם ~40 ק"ג בזמן הבציר הסופי הזה ושקבוצות הניסוי והביקורת מותאמות לפי מין.
    הערה: איור מייצג מדגים את האנטומיה של הלב שאנו קוצרים, הכוללת את המקום שבו האמרואיד הוצב בעבר ואת האזור הצפוי של שריר הלב האיסכמי (איור 1).

2. הליך טרום ניתוחי

  1. מנע מזון בבוקר ההליך.
  2. להרדים את החזירים באמצעות זריקות תוך שריריות של טלזול (4.4 מ"ג/ק"ג) וקסילזין (2.2 מ"ג/ק"ג) ולהחדיר אותם באמצעות צינור אנדוטרכאלי עם אזיקים.
  3. יש להתחיל בשיכוך כאבים באמצעות 0.03 מ"ג/ק"ג בופרנורפין.
  4. יש להניח קטטר תוך ורידי (IV) (20-22 גרם) באחד מוורידי האפרכסת הגדולים ולהתחיל להחדיר 0.9% מי מלח בקצב של ~5-10 סמ"ק∙kg-1∙h-1.
    הערה: נוזל הווריד נמצא אך ורק בשיעור תחזוקה בהקשר של סטטוס העמותה של החזיר ואורך המקרה הכירורגי.
  5. לגלח את אתר הניתוח ואתרים אחרים המשמשים לניטור א.ק.ג.
  6. יש להעביר את החזירים לשולחן חדר הניתוח, לשכב על הקרקע כשהרגליים קשורות לשולחן, ולהמשיך בהרדמה באמצעות איזופלורן (0.75-3.0%).
  7. התחל ניטור א.ק.ג ולחץ דם והחל כרית הארקה חשמלית על החזירים.
  8. נקה את אתר הניתוח.
    הערה: זהו הליך מסוף; לכן, אין צורך לשמור על סטריליות. זוהי העדפה אישית ביחס להכנת אתר הניתוח והעטיפה.

3. הליך כירורגי

  1. צנתור עצם הירך
    1. משש את דופק הירך.
    2. הזריק 2% לידוקאין תת עורי כדי להתכונן למפשעה של עצם הירך שנחתכה במפשעה השמאלית או הימנית, בערך בניצב לקפל המפשעה, נע בצורה גולגולתית.
    3. בצע חתך של 4-5 ס"מ באמצעות אזמל #10, שוב נשאר בניצב לקפל המפשעה, מתחיל בזנב היכן שמישוש את דופק הירך ונע בגולגולת. (איור 2A)
    4. בעזרת צריבה חשמלית יש לנתח דרך הרקמה התת עורית עד לגובה עורק הירך. השתמש במחזר Weitlaner כדי להפיץ את השריר ולחשוף עוד יותר את עורק הירך.
      הערה: זה עשוי לדרוש כמות קטנה של פיצול שריר ה-semimembranosus וה-vastus medialis.
    5. נתח בצורה בוטה באמצעות מהדק בזווית ישרה כדי לחשוף את עורק הירך מהרקמה שמסביב. השתמש במספריים של מצנבאום כדי לחלק בחדות כל הידבקויות שלא ניתן להסיר בצורה בוטה.
    6. בודד את עורק הירך על ידי הקפת העורק בלולאת כלי דם.
    7. הנח לולאת כלי דם שנייה כדי להבטיח שליטה פרוקסימלית ודיסטלית על העורק.
    8. הפרין באופן סיסטמי את החזירים לפני הקנולציה במינון של 80 IU/kg.
      הערה: ודא שהסטרנוטומיה החציונית וחשיפה ללב הושלמו לפני ההפרין והשגת גישה לעצם הירך. אנו מוודאים שהחשיפה ללב מושלמת לפני ההפריניזציה מכיוון שכל ליזה של הידבקויות עלולה ליצור דימום. המטרה הכוללת של הפריניזציה היא למניעת פקקת בעת גישה הן לעורק הירך והן לחדר השמאלי.
    9. באמצעות טכניקת סלדינגר, נקב את עורק הירך עם מחט גישה של 18 G, הימנע מניקוב דופן העורק האחורי. כאשר הדם חוזר, קדם חוט מנחה דרך המחט לתוך העורק. הסר את המחט והנח את המעטפת העורקית 7F לתוך העורק. הסר את חוט ההנחיה ואת מרחיב כלי הדם, והשאיר רק את מעטפת העורקים במקומה.
      הערה: עורק הירך יכול להיות קשה לגישה מכיוון שהוא יכול לנתח בקלות. בהתחשב בכך שמדובר בהליך טרמינלי, מומלץ לחתוך בחדות את עורק הירך בעזרת מספריים של מצנבאום ולהכניס ישירות את חוט ההנחיה ללומן אם זה קורה. לאחר מכן ניתן להעביר בקלות את המעטפת העורקית לתוך הכלי מעל חוט המנחה. הקפד להדק את החלק הדיסטלי של עורק הירך באמצעות המוסטט קטן.
    10. ודא את זרימת הדם דרך הנדן. התחבר למשאבת הנסיגה של מנגנון הרווארד (איור 3).
  2. סטרנוטומיה חציונית
    1. בהתאם למספר המנתחים המשותפים, ניתן להשלים חלק זה במקביל לכריתת המפשעה.
    2. יש להזריק 2% לידוקאין תת עורי כדי להתכונן לסטרנוטומיה של קו האמצע.
    3. בצע חתך בקו האמצע מהחריץ החזה לתהליך ה-xiphoid באמצעות אזמל #10. (איור 2B)
    4. בעזרת צריבה חשמלית, חלקו את הרקמה התת עורית עד להגעה לעצם החזה ושמרו על המוסטזיס.
    5. כריתת תהליך ה-xiphoid על ידי שחרור כל הידבקויות לרוחב ונחות באמצעות צריבה חשמלית. השתמש בקלי clamp כדי להרים את ה-xiphoid למעלה ולחצות את בסיסו אופקית באמצעות צריבה חשמלית.
    6. ודא שהחריץ החזה מנותח באופן חופשי כדי להקל על חלוקת חלק זה של עצם החזה. זה בדרך כלל דורש חלוקה של כמה שרירי רצועה שטחיים.
    7. מנתחים בבוטות מתחת לעצם החזה בעזרת אצבע.
    8. בעזרת סכין Lebsche מחלקים בחדות את עצם החזה, ומבטיחים להישאר בקו האמצע. שנה את זווית הסכין לפי הצורך והמשך לאט לאחר שמגיעים לשליש האחרון של עצם החזה.
      הערה: השימוש בסכין עדיף על פני מסור עצם החזה, כמו אצל בני אדם, בשל הזווית התלולה והעובי של החלק הגולגולתי של עצם החזה, מה שמפחית באופן אידיאלי את הסיכון לפגיעה בכלי הדם הגדולים הבסיסיים. זה יכול להיות שימושי להניח גזה מתחת לחלק הגולגולתי של עצם החזה כדי להגן על כלי הדם הגדולים הבסיסיים.
    9. לאחר השלמת הסטרנוטומיה, יש לבזבז בצורה בוטה וחדה כל הידבקויות, אם קיימות, בין דופן החזה לקרום הלב או הצדר.
    10. הניחו מפסק חזה כדי לפרוש את הצלעות ולחשוף את הלב.
    11. פתחו את קרום הלב בעזרת מספריים של מצנבאום. נמשך לכיוון האטריום הימני והמשך בזנב לכיוון קודקוד החדר השמאלי.
    12. המשך לליז הידבקויות בצורה בוטה או חדה כדי לחשוף את התוספות הפרוזדוריות השמאלית והימנית. השימוש בספוג בוטנים על מהדק אליס יכול להועיל לדיסקציה זו.
    13. אם קשה לנתח ולזהות את נספחי הפרוזדורים, כריתת תימוס עשויה להועיל. כדי לבצע זאת, השתמש בצריבה חשמלית כדי לנתח רקמת תימוס.
    14. לאחר חשיפת נספחי הפרוזדורים, החל מהדקי קצב על שני הנספחים, המחוברים לתיבת קצב חיצונית חד-תאית. בדוק את הקצב ל-150 פעימות לדקה, וודא שכל פעימה נקלטת באק"ג.
    15. הקפידו על חשיפה של קודקוד החדר השמאלי, שוב באמצעות דיסקציה קהה וחדה.
    16. לבסוף, היכנסו לחלל הצדר השמאלי והקיפו את הווריד הנבוב התחתון (IVC) עם מהדק סטינסקי גדול. יש לבודד עם לולאת כלי.
    17. לאחר השלמת זה, זה הזמן המתאים להפרין את החזירים ולקבל גישה לעצם הירך.
  3. ניתוח הזרקה-זלוף מיקרוספרה
    1. גש לנספח הפרוזדורים השמאלי עם מחט פרפר עדינה המחוברת לצינור IV ותא עצירה תלת-כיווני. השתמש בהמוסטט קטן כדי להנחות את המחט ולהחזיק במקומה.
    2. חבר מזרק לתא העצירה עם מי מלח סטריליים ומשוך לאחור כדי להבטיח את המיקום הנכון. אם דם נמשך בקלות, המיקום נכון.
    3. חבר מזרק עם 5 מ"ל של מיקרוספירות המסומנות בלוטציום (ריכוז: 2.5 מיליון מיקרוספירות / מ"ל) לתא העצירה התלת-כיווני.
    4. הקצה עוזר חדר ניתוח לזמן למשך 90 שניות.
    5. התחל בנסיגת דם מעורק הירך באמצעות משאבת מכשיר הרווארד לסך של 10 מ"ל דם בקצב של 6.67 מ"ל לדקה והתחל בתזמון.
    6. במהלך 30 השניות הראשונות של נסיגת הדם, הזריקו את המיקרוספירות של הלוטטיום לתוך התוספתן השמאלי של הפרוזדורים (איור 4). באמצע הדרך, אשר את המיקום על ידי נסיגה על המזרק המכיל מיקרוספרות.
    7. לאחר השלמת זה, שטפו את הצינור עם מזרק של מי מלח הפריניים ושוב הקפידו על מיקום נכון.
    8. לאחר 90 שניות, נתק את הצינור מהגישה לעצם הירך למשאבת הנסיגה וחבר מחדש את הצינור החדש כדי לקבל ניתוח במהלך הקצב.
    9. התחל לצעוד ל-150 פעימות לדקה.
    10. חזור על שלבים 3.3.5, 3.3.6 ו-3.3.7 באמצעות 5 מ"ל של מיקרוספירות המסומנות בסמריום (ריכוז: 2.5 × 106 מיקרוספרות/מ"ל).
    11. הפסק את הקצב ונתק את מעטפת עורקי הירך ממשאבת הנסיגה של מנגנון הרווארד.
    12. הסר את מחט הפרפר והפעל לחץ כדי להבטיח המוסטזיס של תוספתן הפרוזדורים השמאלי.
  4. צנתור לולאת לחץ-נפח
    1. הניחו תפר חוט ארנק בקודקוד החדר השמאלי עם פוליפרופילן 4-0.
    2. באמצע האזור המקיף את התפר, יש לגשת ולהניח מעטפת עורקית נוספת בחדר השמאלי בטכניקת סלדינגר שתוארה לעיל.
    3. הכנס קטטר העברת לחץ-נפח מכויל עם קצה מיקרומנומטר לחדר השמאלי דרך הנדן. משוך את המעטפת העורקית מהחדר השמאלי מעל הצנתר והתחל להמיר את צורת גל הלחץ באמצעות מערכת מדידת לחץ-נפח. זה יודיע על מיקום הצנתר, למשל, אם הצנתר נמצא באבי העורקים, במתחם השסתומים או בחדר השמאלי. משוך לאחור את הקטטר לפי הצורך כדי לוודא שהוא נמצא בחלל החדר השמאלי ומקם אותו מחדש כדי להבטיח שהמורפולוגיה של לולאת נפח הלחץ נראית מתאימה (איור 5).
      הערה: הסרת הנדן מהחדר השמאלי מאפשרת העברה טובה יותר של מעקב אחר נפח הלחץ מהקטטר ומאפשרת קלות רבה יותר בשינוי מיקום הצנתר כדי לקבל את המורפולוגיה המתאימה ביותר של כל לולאת PV.
    4. הנח קטטר PV מכויל נוסף בגישה לעצם הירך כדי לקבל לחץ דם סיסטולי ודיאסטולי ולחץ עורקי ממוצע.
    5. לאחר שביעות רצון מהמורפולוגיה של לולאות ה-PV, בצע שלוש עצירות נשימה במנוחה כדי להפחית את השונות הנשימתית בלולאות הלחץ-נפח. זה ימדוד מספר משתנים תלויי עומס, כגון תפוקת לב ונפח שבץ.
    6. לאחר מכן, חסמו את ה-IVC על ידי נסיגה עדינה של לולאת כלי הדם ובצעו עצירת נשימה בו זמנית כדי להשיג משתנים בלתי תלויים בעומס, כגון יחס נפח לחץ סיסטולי קצה (ESPVR) ויחס נפח לחץ דיאסטולי קצה (EDPVR). חזור על הפעולה פעמיים נוספות.
    7. התחל לצעוד עד 150 פעימות לדקה וקבל שלוש עצירות נשימה כדי לאפיין את ביצועי הלב בתנאי לחץ.
    8. זה משלים את הפרופיל של תפקוד הלב. הסר את שני הצנתרים וקשר את תפר חוט הארנק בחדר השמאלי.
  5. מנצחים המתת חסד
    1. הסר את מובילי הקצב ואת כל המכשירים מהחזה.
    2. השג יניקה עבור המנתח השותף.
    3. נתח בצורה בוטה כל הידבקויות רוחביות של הלב לדופן החזה וודא שניתן להרים בקלות את קודקוד החדר השמאלי בצורה מעולה.
    4. בקש מהרדמה כדי להעמיק את ההרגעה.
    5. הנח מהדק קלי גדול על הווריד הנבוב העליון (SVC), אם זה נגיש בקלות, ומהדק סטינסקי גדול סביב ה- IVC. מהדק בו זמנית.
    6. קח מיד אזמל #10 כדי להסיר את הלב מהחזה. זה כולל הפרדת הלב מ- IVC, SVC, אבי העורקים, עורקי הריאה וורידי הריאה.
      הערה: על המנתח השותף לספק יניקה כדי לשמור על שדה הניתוח נקי ככל האפשר במהלך תקופה זו.
    7. העבירו את הלב מהחזה והניחו על שולחן נפרד.
    8. חותכים לשני חצאים: אפיקלי ובזאלי (איור 6A). זה יפריד את רקמת החדר מהפרוזדורים ומכלי הדם הגדולים.
    9. הפרד את החדר השמאלי מכל רקמת שריר הלב האחרת.
    10. יש לחלק כל מחצית באופן היקפי לשנים עשר חלקים על סמך קרבה לעורק הכלילי היורד הקדמי השמאלי (LAD) ולעורק הכלילי היורד האחורי, כפי שמתואר באיור 6B.
    11. אסוף דגימות רקמה מכל שאר החדרים, השסתומים, כלי הדם הגדולים והרקמות ההיקפיות, כגון הלבלב, הכבד, הריאות, הכליות וכו'.
    12. יש להקצות דגימה קטנה מכל חלק של החדר השמאלי ל-BioPAL לכימות מיקרוספרה. חלקים מסוימים מקובעים בפורמלין לניתוח היסטולוגי, בעוד שרוב הרקמה קפואה בחנקן נוזלי למחקרים מולקולריים עתידיים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

ראשית, על ידי הזרקת מיקרוספירות עם תווית איזוטופית לנספח הפרוזדורים השמאלי, נמדד זלוף שריר הלב האזורי. כדי לחשב את זרימת הדם בשריר הלב, כאשר נעשה שימוש בקצב קבוע של משיכת דם של 6.67 מ"ל/דקה, ניתן ליישם את המשוואה הבאה: זרימת דם בשריר הלב = (נסיגת דם ייחוס [6.67 מ"ל/דקה]/משקל הרקמה) (ספירת מיקרוספרה של רקמות כמותית / ספירת מיקרוספרה של ייחוס דם מכומת). במילים פשוטות, היחס בין המיקרוספירות הנמדדות בקטע שריר הלב הספציפי לזה שכומת בדם כאשר הוא נאסף בקצב מסוים גוזר את קצב זרימת הדם לאחר מכן לא...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

להליך כירורגי זה ארבעה שלבים קריטיים: חשיפת הלב, צנתור עצם הירך, הזרקת מיקרוספרה לניתוח פרפוזיה ורכישת לולאת לחץ-נפח. בכל הנוגע לחשיפת הלב, שיקול חשוב צריך להיות האפשרות להיתקל בהידבקויות משמעותיות עקב ההליך הכירורגי הראשון. בעת ביצוע הסטרנוטומיה החציונית, ניתן להדביק את קרום הלב לדופן החזה, אותו יש לטאטא בצורה בוטה לפני תחילת הסטרנוטומיה. כאשר מתקרבים לשליש האחרון של עצם החזה, הוא הופך לעבה משמעותית וזוויות חדות כלפי מטה. תמרון מועיל עשוי להיות הנחת גזה מתחת לחלק זה של עצם החזה כדי ליצו...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין גילויים או ניגודי אינטרסים.

תודות

מימון המחקר ניתן על ידי המכונים הלאומיים לבריאות, כולל מספרי המענקים הבאים: T32HL16051703 (K.C.M., C.S., D.D.H, M.K.), R01HL46716 (F.W.S) ו-R01HL128831 (F.W.S). ברצוננו להביע את תודתנו העמוקה לצוות הווטרינרי בבית החולים רוד איילנד ובאוניברסיטת בראון על הטיפול ההומני בבעלי חיים ותמיכתם יוצאת הדופן בפרויקטים הרבים שלנו.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
#10 אזמלמדלייןMDS15310
0.9% מי מלחדכרה/וטיבקס17033-492-50קצב: 5-10 מ"ל/ק"ג במהלך המארז
18 גרם מחטיםפטרסון וטרינרי78032793לציור תרופות/מיקרוספירות
2% לידוקאיןפניקס57319-533-05מינון: 2-5 מ"ג/ק"ג
4-0 תפר פוליפרופילןקובידיאןD9H0436Yלמחרוזת ארנק
כל המכשירים הכירורגייםסטריס ומדלייןדרוש נציג מכירותהכל נפוץ בחדרי ניתוח בבתי חולים
משכך כאבים: בופרנורפיןהוספירהשם מותג: בופרדיןמינון: 0.03 מ"ג/ק"ג
הרדמה: טלזולאנונימי(טילטמין וזולאזפאם)מינון: 4.4 מ"ג/ק"ג
הרדמה: קסילזין (רומפון)דצ'רהלא ישיםמינון: 2.2 מ"ג/ק"ג
נדן עורקיקורדיס401-711 מיליון6F או 7F; דורש שניים
סט עירוי מחט פרפרסרפלוSV-25BLKלהזרקת מיקרוספרה; בדרך כלל 23-25 גרם
כלורהקסידין 4%BD E-Z פילינג371073הכנה כירורגית, אם מעדיפים
צינור אנדוטרכיאלי אזוקראש.7-0 בדרך כללעשוי להזדקק לגדלים שונים בהתאם לגודל ומשקל החזירים
מערכת ניטור א.ק.גסימן בינייםלא ישיםמוניטור רב-פרמטרי
צריבה חשמליתBovie מומחה פרושנות ה-1250בדרך כלל מגדירים 2 במידת האפשר
איזופלורן, USPדצ'רהמינון: 0.75%-3.0%
מחשב ניידHP מיקרוסופטלא ישיםיכול להשתמש בכל מחשב נייד המועדף על ידי אדם
סכין Lebscheאינטגרה300-425לא ישים
לוטטיום סטריכדוריםביופל בע"מC-15E20כמות: 5 סמ"ק לניתוח
מיני לולאות כלי לבנות (ניתנות לזיהוי רנטגן)דה רויאל30-711לבודד את עורק הירך ו- IVC
מזרקים מרובים של 5 סמ"קטרומוSS-05Lלשטיפות והזרקות מיקרוספירה
קוצב לבאוסיפקה מדיקל2428001קוצב זמני
צנתרי לולאה PVטרנסוניקדגם: FDH-5018B-E3450 ו-S/N: 50-679לרכישת לולאת PV
תוכנת מחשב PV Loopמדע טרנסוניתוכנת ADV500תכנות במחשב הנייד שלך
מערכת רכישת נתונים לולאה PVטרנס-סוניות ו-ADIinstrumentsדגמים: FY097B ו-PowerLab 8/35מחבר את הצנתרים למחשב
סמריום סטריכדוריםביופל בע"מC-15A20כמות: 5 סמ"ק לניתוח
פטיש קטןאינטגרה410-335לא ישים
כפפות סטריליותהדרן820955עדיין ממליץ על כפפות ושמלה סטריליות
מי מלח סטרילייםבקסטרG171328לדלל להכנת שטיפות מי מלח הפראניות
מערכת יניקהגומקו4042עדיף אם יניקת קיר של מתקן משלו
טיפ יניקה: YankauerמדלייןDYND50130חשוב לשמור על השדה נקי בעת כריתת הלב
הפרין סיסטמיקובטרוס82496מינון: 80 יחב"ל/ק"ג
תא עצירה תלת כיוונימעבדות יורגנסן בע"מ200820להזרקות מיקרוספרה
אמבט מים חמיםפישרלחימום הצנתרים לפני השימוש
משאבת נסיגהמנגנון הרווארד70-2002להוציא דם היקפי בקצב קבוע
חזירי יורקשיירCBSET, בע"מלא ישיםחזירים כבר עברו את ההליך הכירורגי הראשוני

מקורות

  1. Tsao, C. W., et al. Heart disease and stroke statistics-2022 update: a report from the American Heart Association. Circulation. 145 (8), e153-e639 (2022).
  2. Mohebi, R., et al. Cardiovascular disease projections in the United States based on the 2020 census estimates. J Am Coll Cardiol. 80 (6), 565-578 (2022).
  3. Stone, C. R., et al. Crafting a rigorous, clinically relevant large animal model of chronic myocardial ischemia: what have we learned in 20 years. Methods Protoc. 7 (1), 17(2024).
  4. Jia, H., Chang, Y., Song, J. The pig as an optimal animal model for cardiovascular research. Lab Anim (NY). 53 (6), 136-147 (2024).
  5. Marso, S. P., et al. Semaglutide and cardiovascular outcomes in patients with type 2 diabetes. N Engl J Med. 375 (19), 1834-1844 (2016).
  6. Aggarwal, R., et al. Effect of sotagliflozin on major adverse cardiovascular events: a prespecified secondary analysis of the SCORED randomised trial. Lancet Diabetes Endocrinol. 13 (4), 321-332 (2025).
  7. Stonko, D. P., et al. A technical and data analytic approach to pressure-volume loops over numerous cardiac cycles. JVS Vasc Sci. 3, 73-84 (2022).
  8. Cannon, P. J. Radioisotopic studies of the regional myocardial circulation. Circulation. 51 (6), 955-963 (1975).
  9. Domenech, R. J., et al. Total and regional coronary blood flow measured by radioactive microspheres in conscious and anesthetized dogs. Circ Res. 25 (5), 581-596 (1969).
  10. Roth, D. M., et al. Development of coronary collateral circulation in left circumflex Ameroid-occluded swine myocardium. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 253 (5 Pt 2), H1279-H1288 (1987).
  11. Elmadhun, N. Y., Sadek, A. A., Sabe, A. A., Lassaletta, A. D., Sellke, F. W. Alcohol and the heart: a proteomics analysis of pericardium and myocardium in a swine model of myocardial ischemia. Ann Thorac Surg. 100 (5), discussion 1635 1627-1635 (2015).
  12. Harris, D. D., et al. Proteomic analysis and sex-specific changes in chronically ischemic swine myocardium treated with sodium-glucose cotransporter-2 inhibitor canagliflozin. J Am Coll Surg. 238 (6), 1045-1055 (2024).
  13. Harris, D. D., et al. Proteomic profiling of SGLT-2 inhibitor canagliflozin in a swine model of chronic myocardial ischemia. Biomedicines. 12 (3), 558(2024).
  14. Sabe, A. A., et al. Investigating the effects of resveratrol on chronically ischemic myocardium in a swine model of metabolic syndrome: a proteomics analysis. J Med Food. 18 (1), 60-66 (2015).
  15. Sabe, S. A., et al. Effects of canagliflozin on myocardial microvascular density, oxidative stress, and proteomic profile. J Mol Cell Cardiol Plus. 6, 100052(2023).
  16. Xu, C. M., et al. Proteomic assessment of hypoxia-pre-conditioned human bone marrow mesenchymal stem cell-derived extracellular vesicles demonstrates promise in the treatment of cardiovascular disease. Int J Mol Sci. 24 (2), 1674(2023).
  17. Billig, S., et al. Transesophageal echocardiography in swine: evaluation of left and right ventricular structure, function and myocardial work. Int J Cardiovasc Imaging. 37 (3), 835-846 (2021).
  18. Hocum Stone, L. L., et al. Magnetic resonance imaging assessment of cardiac function in a swine model of hibernating myocardium 3 months following bypass surgery. J Thorac Cardiovasc Surg. 153 (3), 582-590 (2017).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

מודל חזיריםAmeroid Constrictorמחלת עורקים כלילייםלולאות לחץ-נפחזרימת דם שרירית לבביתמיקרוספירות מסומנות באיזוטופים

מאמר זה פורסם

הסרטון יגיע בקרוב

צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.